معرف‌های انتقال سلولی به معرف‌های معمولی برای مطالعه و کنترل عملکرد ژن در سلول‌های یوکاریوتی تبدیل شده‌اند. معرف های ترانسفکشن به طور گسترده در تحقیقات عملکرد ژن، تنظیم بیان ژن و تجزیه و تحلیل جهش، و همچنین ژن درمانی، سلول درمانی، تولید پروتئین و تولید واکسن استفاده می شود. پس ترانسفکشن چیست؟ و چگونه می توان یک نوع معرف ترانسفکشن را بر اساس آزمایشات خود انتخاب کرد؟

انواع ترانسفکشن چیست؟

ویژگی های معرف های ترانسفکشن از Yeasen

چگونه بر اساس آزمایشات خود نوعی معرف ترانسفکشن انتخاب کنید؟

مورد درخواست

مرجع شرایط ترانسفکشن

سوالات متداول

با توجه به ریدینگ

انواع ترانسفکشن چیست؟

با توجه به اینکه آیا نوکلئیک اسید پس از ترانسفکشن در کروموزوم سلول میزبان ادغام می شود یا خیر، آن را به "گذرا" (ترانسفکشن گذرا) و "پایدار" (ترانسفکشن پایدار) تقسیم می کنند. کارایی ترانسفکشن، سمیت سلولی، اثرات بر فیزیولوژی طبیعی و سطوح بیان ژن روش های مختلف ترانسفکشن متفاوت است. اصول، کاربردها و ویژگی ها در جدول زیر مقایسه شده است:

جدول 1 مقایسه روش های مختلف ترانسفکشن

ویژگی های معرف های ترانسفکشن از Yeasen

برای معرف‌های ترانسفکشن DNA و معرف‌های ترانسفکشن RNA، Yeasen Biotechnology دارای تیم تحقیق و توسعه و تولید قوی است، به طور مداوم فرمول‌ها را بهینه می‌کند، فرآیندهای تولید را بهبود می‌بخشد و محصولات متنوعی را بر اساس لیپوزوم‌های کاتیونی و پلیمرهای کاتیونی روانه بازار کرده است. موسسات و شرکت های تحقیقاتی علمی طیف کاملی از محصولات را ارائه می دهند و خط تولید تمام زمینه های درگیر در معرف های ترانسفکشن را پوشش می دهد.

• راندمان بالا: مناسب برای انتقال گذرا یا انتقال پایدار خطوط سلولی.
• سمیت کم: سلول های ترانسفکت شده به خوبی زنده می مانند.
• سازگاری گسترده: پوشش جامع سلول های معمولی و سلول های اولیه سخت ترانسفکشن.
• کارکرد آسان: مناسب برای محیط در حضور سرم، بدون تغییر محیط قبل و بعد از ترانسفکشن.
• مقرون به صرفه: اقتصادی و عملی، راندمان انتقال بالا، قیمت پایین.

چگونه بر اساس آزمایشات خود نوعی معرف ترانسفکشن انتخاب کنید؟

انتخاب معرف‌های ترانسفکشن باید با توجه به اهداف آزمایشی مختلف و محتویات آزمایشی، مانند مواد ترانسفکت‌شده، سلول‌های خاص، راحتی کار و سایر عوامل انتخاب شود.

مورد درخواست

معرف ترانسفکشن لیپوزومی Hieff Trans™

Hieff Trans™ به صورت مایع استریل عرضه می شود. به طور کلی، برای ترانسفکشن صفحه 24 چاهی، هر بار حدود 1.5 میکرولیتر، 1 میلی لیتر Hieff Trans™ می تواند حدود 660 ترانسفکشن انجام دهد. برای بشقاب 6 چاهی، هر بار حدود 6 میکرولیتر، 1 میلی لیتر Hieff Trans™ می تواند حدود 660 ترانسفکشن انجام دهد. 160 ترانسفکشن;

برای جزئیات بیشتر، لطفا ببینید اطمینان در انتقال با معرف Hieff Trans™ Lipofectamine

پلی اتیلن خطی (PEI) MW40000 (لیز سریع)

PEI 40000 یک پلیمر کاتیونی بسیار باردار با وزن مولکولی 40000 است که مولکول های اسید نوکلئیک با بار منفی را به راحتی به هم متصل می کند و یک کمپلکس را تشکیل می دهد و اجازه می دهد کمپلکس وارد سلول ها شود. PEI 40000 یک معرف ترانسفکشن گذرا با سمیت سلولی کم، راندمان انتقال بالا و راندمان بیان ژن بالا در سلول هایی مانند HEK293 و CHO است. معرف‌های انتقال خطی PEI برای طیف وسیعی از رده‌های سلولی از جمله سلول‌های HEK-293، HEK293T، CHO-K1، COS-1، COS-7، NIH/3T3، Sf9، HepG2 و Hela تأیید شده‌اند. راندمان ترانسفکشن 80 تا 90 درصد است.

برای جزئیات بیشتر، لطفا ببینید مورد علاقه جدید برای ترانسفکشن -- خطی PEI MW 40000، یک معرف ترانسفکشن کارآمدتر

Hieff Trans™ در شرایط آزمایشگاهی معرف انتقال siRNA/miRNA

این محصول می تواند بیش از 90 درصد راندمان بیان 1 نانومولار siRNA را در طیف وسیعی از خطوط سلولی به دست آورد و از اثرات خارج از هدف جلوگیری کند. مناسب برای ترانسفکشن انواع سلول ها از جمله Hela، MCF-7، HepG2، CHO و سایر سلول های چسبنده. و خطوط سلولی تعلیق با ترانسفکشن دشوار، مانند سلول های K562 یا THP-1، می توانند 80 درصد راندمان خاموش کنندگی را به دست آورند. از جمله برخی از سلول های اولیه، فیبروبلاست های اولیه انسانی و سلول های کبدی اولیه انسانی و غیره، راندمان خاموش کردن 80٪ قابل دستیابی است.

مرجع شرایط ترانسفکشن

علاوه بر دستورالعمل های مربوط به هر محصول، مشتریان با توجه به محتوای آزمایشی خاص خود عمل می کنند و تفاوت های مختلفی در میزان استفاده وجود خواهد داشت. با توجه به شرایط انتقال سلول در شرایط آزمایشگاهی گزارش شده توسط مشتریان پس از استفاده از محصول، آنها برای مرجع شما مرتب شده اند.

سوالات متداول

1 معرف ترانسفکشن لیپوزومی Hieff Trans™

1.1 س: آیا هنگام تهیه کمپلکس های معرف ترانسفکشن اسید نوکلئیک، سرم وجود دارد؟

پاسخ: وجود سرم بر تشکیل لیپوزوم ها تأثیر می گذارد. هنگام تهیه کمپلکس های معرف ترانسفکشن اسید نوکلئیک توصیه می شود از یک محیط بدون سرم (معمولاً محیط MEM) استفاده شود.

1.2 س: هنگام استفاده از معرف ترانسفکشن اسید نوکلئیک لیپوزومی Hieff Trans™ باید به چه نکاتی توجه کنم؟

الف:

1) هنگامی که سلول ها ترانسفکت می شوند، تراکم سلول ترجیحاً 80٪ - 95٪ است و تراکم آبکاری خاص با توجه به وضعیت سلول ها تعیین می شود.

2) استفاده از DNA با خلوص بالا به دستیابی به راندمان انتقال بالاتر کمک می کند.

3) هنگام تهیه کمپلکس های ترانسفکشن، DNA و معرف های ترانسفکشن باید با محیط عاری از سرم رقیق شوند.

4) در طول ترانسفکشن نمی توان آنتی بیوتیک ها را به محیط اضافه کرد.

5) معرف ها باید در دمای 8-2 درجه سانتیگراد نگهداری شوند و باید مراقب باشید که از باز کردن مکرر درب برای مدت طولانی جلوگیری شود.

6) غلظت DNA و تعداد معرفهای لیپوزوم کاتیونی باید برای اولین استفاده بهینه شود تا حداکثر بازده انتقال حاصل شود. نسبت DNA به معرف ترانسفکشن معمولاً 1:2-1:3 توصیه می شود.

1.3 س: آیا پس از ترانسفکشن باید خاتمه داده شود؟

ج: نیازی نیست. کمپلکس های لیپوزوم به مدت 6 ساعت پایدار هستند. اگر محیط سلولی قبل از ترانسفکشن تغییر نکند، برای اطمینان از مواد مغذی مورد نیاز برای رشد طبیعی سلول، لازم است پس از 4-6 ساعت به محیط جدید تغییر دهید. اما اگر محیط قبل از ترانسفکشن تعویض شده باشد، پس از ترانسفکشن لیپوزوم نیازی به تعویض محیط نیست.

1.4 س: آیا می توان انتقال مشترک DNA و siRNA را انجام داد؟ تاثیرش چطوره؟

پاسخ: بله، هنگامی که DNA و siRNA به طور مشترک ترانسفکت شوند، بازده انتقال siRNA کمی بدتر خواهد بود.

1.5 س: آیا می توان از معرف ترانسفکشن برای ترانسفکشن بسته بندی لنتی ویروسی استفاده کرد؟

پاسخ: بسته بندی لنتی ویروسی امکان پذیر است.

1.6 س: آیا می توان سلول های سوسپانسیون را با معرف ترانسفکشن اسید نوکلئیک لیپوزومی Hieff Trans™ ترانسفکت کرد؟

پاسخ: معرف ترانسفکشن اسید نوکلئیک لیپوزوم Hieff Trans™ را می توان برای ترانسفکشن سلولی سوسپانسیون استفاده کرد، برای جزئیات به پروتکل مراجعه کنید. علاوه بر این، ما همچنین یک معرف ترانسفکشن را به طور خاص برای سلول‌های سوسپانسیون معرفی کردیم (Cat No.40805، معرف ترانسفکشن لیپوزومی بدون سلول سوسپانسیون Hieff Trans™)

2 Hieff Trans™ در شرایط آزمایشگاهی معرف انتقال siRNA/miRNA

2.1 س: آیا معرف ترانسفکشن پس از ترانسفکشن نیاز به تعویض دارد؟

پاسخ: این مشکل را می توان به دو مورد تقسیم کرد: 1. اگر هیچ تغییری در محیط قبل از ترانسفکشن وجود نداشت، باید محیط را حدود 6 ساعت پس از ترانسفکشن تغییر داد تا از مواد مغذی مورد نیاز برای رشد سلول اطمینان حاصل شود. 2. اگر تغییر محیط قبل از ترانسفکشن وجود داشته باشد، آیا می توان با توجه به عملکرد طبیعی سلول های کشت شده عمل کرد؟ ? بعد از عملیات تعویض مایع؟

2.2 س: آیا می توان معرف های ترانسفکشن را منجمد کرد؟

پاسخ: نمی توان آن را منجمد کرد، زیرا معرف ترانسفکشن یک معرف ترانسفکشن کاتیونی PEI است. انجماد در دماهای پایین باعث از بین رفتن فعالیت معرف ترانسفکشن PEI می شود. بنابراین، بهتر است آن را در دمای 2-8 درجه سانتیگراد نگهداری کنید تا بهترین ترانسفکشن را حفظ کنید. اثربخشی

اطلاعات محصول

برخی از مقالات منتشر شده با استفاده از محصولات ما

[1] لیو آر، یانگ جی، و همکاران. کنترل اپتوژنتیک عملکرد و متابولیسم RNA با استفاده از پروتئین های مهندسی شده با قابلیت تعویض نور RNA Nat Biotechnol. 3 ژانویه 2022. (IF:55)

[2] لو جی، یانگ کیو، و همکاران. TFPI یک گیرنده کریپت کولون برای TcdB از کلاد 2 C. difficile hypervirulent است. سلول 17 مارس 2022. (IF: 41.582)

[3] ژو جی، چن پی، و همکاران. گونه‌های Cas12a برای اثر کم‌تر خارج از هدف در سطح ژنوم از طریق تشخیص دقیق PAM طراحی شده‌اند. Mol Ther. 5 ژانویه 2022. (IF: 11.454)

[4] چن اس، کائو ایکس، و همکاران. circVAMP3 جداسازی فاز CAPRIN1 را تحریک می‌کند و با سرکوب ترجمه c-Myc، کارسینوم سلول‌های کبدی را مهار می‌کند. Adv Sci (Weinh). 24 ژانویه 2022. (IF:16.808)

[5] Gu C، Wang Y، و همکاران. AHSA1 یک هدف درمانی امیدوارکننده برای تکثیر سلولی و مقاومت در برابر مهارکننده پروتئازوم در مولتیپل میلوما است. J Exp Clin Cancer Res. 6 ژانویه 2022. (IF:11.161)

[6] Zhang Y، Yu X، و همکاران. فاکتور پیرایش آرژنین/سرین غنی 8 بدخیمی و ضایعه استخوانی را از طریق پیوند جایگزین CACYBP و ارتباطات سلولی مبتنی بر اگزوزوم ترویج می‌کند. Clin Transl Med. فوریه 2022 (IF: 11.492)

[7] Qin J، Cai Y، و همکاران. مکانیسم مولکولی آگونیسم و ​​آگونیسم معکوس در گیرنده گرلین Nat Commun. 13 ژانویه 2022. (IF: 14.9)

[8] تانگ ایکس، دنگ زی، و همکاران.یک پروتئین جدید که توسط circHNRNPU کدگذاری شده است، با تنظیم ریزمحیط مغز استخوان و پیرایش جایگزین، پیشرفت میلوم متعدد را ارتقا می دهد. J Exp Clin Cancer Res. 8 مارس 2022. (IF:11.161)

[9] Xie F، Su P، و همکاران. مهندسی وزیکول های خارج سلولی غنی شده با پالمیتویله ACE2 به عنوان درمان COVID-19. Adv Mater. 19 اکتبر 2021. (IF:30.849)

[10] لیانگ Y، لو کیو، و همکاران. فعال سازی مجدد سرکوبگر تومور در سرطان پستان با تعویض تقویت کننده از طریق شبکه NamiRNA Nucleic Acids Res. 7 سپتامبر 2021. (IF: 16.9)

[11] فن Y، وانگ جی، و همکاران. CircNR3C2 اثر سرکوب کننده تومور با واسطه HRD1 را از طریق اسفنج miR-513a-3p در سرطان پستان سه گانه منفی ترویج می کند. مول سرطان. 2 فوریه 2021. (IF:27.403)

[12] Dai L، Dai Y، و همکاران. بینش ساختاری به استخدام پیچیده BRCA1-BARD1 برای کروماتین آسیب دیده. سلول مول. 1 ژوئیه 2021. (IF: 17.97)

[13] Zhang K، Wang A، و همکاران. محور UBQLN2-HSP70 دانه های poly-Gly-Ala را کاهش می دهد و نقص های رفتاری را در مدل حیوانی C9ORF72 کاهش می دهد. نورون. 16 ژوئن 2021. (IF: 17.17)

[14] لی تی، چن ایکس، و همکاران. یک دستگاه اپتوژنتیک مبتنی بر BRET مصنوعی برای بیان ترانس ژن ضربانی که هموستاز گلوکز را در موش‌ها ممکن می‌سازد. Nat Commun. 27 ژانویه 2021. (IF: 14.92)

[15] یان اف، هوانگ سی، و همکاران. ترئونین ADP-ریبوزیلاسیون یوبیکوئیتین توسط یک خانواده عامل باکتریایی یوبی کوئیتیناسیون میزبان را مسدود می کند. سلول مول. 21 مه 2020. (IF: 17.97)

[16] Sun X، Peng X، و همکاران. ADNP با تعدیل سیگنال دهی Wnt/β-catenin باعث تمایز عصبی می شود. Nat Commun. 12 ژوئن 2020. (IF: 14.911)

[17] یانگ ایکس، وانگ اچ، و همکاران. سیم کشی مجدد سیگنالینگ ERBB3 و ERK باعث مقاومت در برابر مهار FGFR1 در سرطان دستگاه گوارش می شود که دارای جهش ERBB3-E928G است. سلول پروتئین. دسامبر 2020 (IF: 14.872)

[18] Zou Y، Wang A، و همکاران. تجزیه و تحلیل مناظر ردوکس و پویایی در سلول های زنده و in vivo با استفاده از سنسورهای فلورسنت کدگذاری شده ژنتیکی پروتوک Nat. اکتبر 2018 (IF: 13.490)

[19] هائو اچ، هو اس، و همکاران. از دست دادن CXCR7 اندوتلیال، هموستاز عروقی و بازسازی قلب را پس از انفارکتوس میوکارد مختل می کند: پیامدهایی برای کشف داروی قلبی عروقی. گردش. 28 مارس 2017. (IF: 29.69)

با توجه به ریدینگ

معرف ترانسفکشن - Hieff Trans™ و PEI

خطی PEI MW 40000، یک معرف ترانسفکشن کارآمدتر