जैव प्रौद्योगिकी की तीव्र प्रगति ने इन विट्रो आरएनए संश्लेषण तकनीक के माध्यम से उत्पादित mRNA टीकों के निर्माण के माध्यम से COVID-19 जैसी संक्रामक बीमारियों से निपटने पर गहरा प्रभाव डाला है। संयुक्त राज्य अमेरिका में मॉडर्ना, जर्मनी में क्योरवैक और जर्मनी में बायोएनटेक सहित कई कंपनियों ने न केवल चिकित्सीय mRNA टीके विकसित किए हैं, बल्कि ट्यूमर, संक्रामक रोगों और पुरानी बीमारियों जैसी स्थितियों के लिए उपचार भी विकसित किए हैं।
mRNA टीकों के अनुसंधान और निर्माण के लिए उनके सफल विकास को सुनिश्चित करने के लिए विविध प्रकार के कच्चे माल की आवश्यकता होती है। आणविक एंजाइम उद्योग में एक अग्रणी शक्ति के रूप में, येसेन ने उन्नत आणविक एंजाइम जैव प्रौद्योगिकी और बड़े पैमाने पर प्रोटीन किण्वन और शुद्धिकरण तकनीकों के माध्यम से विभिन्न आणविक एंजाइम और अभिकर्मकों को बनाने में सफलता हासिल की है।
उत्पाद की गुणवत्ता और उत्पादन क्षमता दोनों की गारंटी देने के लिए, येसेन ने वुहान में एक GMP-स्तर की उत्पादन सुविधा स्थापित की है, जो 5 बिलियन यूनिट से अधिक वार्षिक क्षमता के साथ औद्योगिक पैमाने पर उत्पादन आवश्यकताओं को पूरी तरह से संतुष्ट करने में सक्षम है। इसके अतिरिक्त, येसेन आणविक एंजाइमों के अनुसंधान, विकास, विनिर्माण और वितरण के लिए ISO 13485 प्रमाणन प्राप्त करने वाली पहली चीनी कंपनी है। यह प्रमाणन उनके सभी अभिकर्मकों की गुणवत्ता, स्थिरता और पता लगाने की क्षमता को आश्वस्त करता है।
1. जीएमपी का लाभ
2. येसेन जीएमपी-ग्रेड उत्पाद प्रदान कर सकता है
3. येसेन ने कई उत्पादों के लिए डीएमएफ नंबर हासिल किए
4. येसेन उत्पादों के अनुप्रयोग परिदृश्य
5. येसेन द्वारा mRNA वैक्सीन तैयार करने के लिए कच्चा माल उपलब्ध कराया गया
6. ऑर्डरिंग जानकारी
1. जीएमपी का लाभ
"जीएमपी-ग्रेड" एक ब्रांडिंग शब्द है जिसका उपयोग येसन आईएसओ 13485 प्रमाणित सुविधाओं में निर्मित अभिकर्मकों का वर्णन करने के लिए करता है। येसन के जीएमपी-ग्रेड अभिकर्मकों का उत्पादन आईएसओ 13485 गुणवत्ता प्रबंधन प्रणाली मानकों के अनुपालन में और अधिक कठोर प्रक्रिया नियंत्रण और पूर्ण दस्तावेज़ीकरण रिकॉर्ड के साथ किया जाता है। येसन न केवल उच्च गुणवत्ता वाले अभिकर्मकों की पेशकश कर सकता है, बल्कि हमारे ग्राहकों को दस्तावेज़, साइट ऑडिट और अन्य सहायता भी प्रदान कर सकता है।
तालिका नंबर एक। जीएमपी का लाभ
| गुणवत्ता नियंत्रण | शोध स्तर | जीएमपी ग्रेड |
| पशु मुक्त | पशु-व्युत्पन्न सामग्री का उपयोग किया जा सकता है | यदि आवश्यक हो तो पशु-मुक्त प्रमाणपत्र प्रदान किया जा सकता है |
| सेल बैंक लक्षण वर्णन | कम कठोर | कठोर (जीएमपी विनियमों के अनुरूप) |
| कच्चे माल और तैयार उत्पाद के लिए पता लगाने की जानकारी | कम कठोर | कठोर (जीएमपी विनियमों के अनुरूप) |
| एंडोटॉक्सिन स्तर नियंत्रण | / | कठोर |
| बाँझ नियंत्रण | / | कठोर |
| विनिर्माण और परीक्षण के लिए बैच रिकॉर्ड | कम कठोर | कठोर (यदि आवश्यक हो तो बैच रिकॉर्ड उपलब्ध कराया जा सकता है) |
| प्रक्रिया सत्यापन रिपोर्ट | / | यदि आवश्यक हो तो रिपोर्ट उपलब्ध कराई जा सकती है |
| परिवर्तन नियंत्रण प्रणाली | आत्म मूल्यांकन | कठोर (जीएमपी विनियमों के अनुरूप) |
| गुणवत्ता प्रबंधन प्रणाली | आत्म मूल्यांकन | आईएसओ 13485 प्रमाणन |
| डीएमएफ संख्या | / | हां (रिपोर्टिंग) |
2. येसेन जीएमपी-ग्रेड उत्पाद प्रदान कर सकता है
एंजाइम विकास और औद्योगिक पैमाने पर उत्पादन में व्यापक विशेषज्ञता और तकनीकी उत्कृष्टता का लाभ उठाते हुए, येसेन ने "mRNAtools" के नाम से एक अत्याधुनिक सुविधा स्थापित की है। 50,000 वर्ग फीट में फैली यह सुविधा GMP विनियमों का पालन करती है और इसमें 2×1500L स्वचालित किण्वन इकाइयों, बड़े पैमाने पर शुद्धिकरण उपकरण और लाइओफिलाइज़ेशन क्षमताओं सहित अत्याधुनिक सुविधाएँ हैं। mRNAtools सख्त अभिकर्मकों को वितरित करने के लिए समर्पित है जो ग्राहक उत्पादन और नियामक आवश्यकताओं के साथ संरेखित हैं।
जीएमपी-ग्रेड उत्पादों के लिए निर्मित येसेन की आणविक एंजाइम उत्पादन सुविधा, हार्डवेयर और सॉफ्टवेयर दोनों स्तरों पर उत्पाद की गुणवत्ता की सुरक्षा करती है। इसमें 70 पेशेवरों की एक उच्च कुशल टीम शामिल है, जिनमें से प्रत्येक के पास व्यापक जीएमपी उत्पादन अनुभव है। वेयरहाउसिंग और लॉजिस्टिक्स संचालन मॉड्यूलर हैं, जो उत्पादों के सुरक्षित भंडारण और कुशल परिवहन को सुनिश्चित करते हैं। एक राष्ट्रव्यापी बहु-केंद्र वितरण नेटवर्क एक विश्वसनीय आपूर्ति चक्र की गारंटी देता है।
3. येसेन ने कई उत्पादों के लिए डीएमएफ नंबर हासिल किए
ड्रग मास्टर फ़ाइलें (DMF) गोपनीय दस्तावेज़ हैं जो स्वेच्छा से अमेरिकी खाद्य एवं औषधि प्रशासन (FDA) को प्रस्तुत किए जाते हैं। इनमें मानव दवा उत्पादों के उत्पादन, प्रसंस्करण, पैकेजिंग और भंडारण में उपयोग की जाने वाली सुविधाओं, प्रक्रियाओं या लेखों के बारे में विस्तृत जानकारी होती है।
FDA DMF की तकनीकी सामग्री की जांच करता है जब कोई सक्रिय दवा घटक (API) निर्माता अपने जांचात्मक नई दवा आवेदन (IND), नई दवा आवेदन (NDA), संक्षिप्त नई दवा आवेदन (ANDA), या निर्यात आवेदन का समर्थन करने के लिए इसका संदर्भ देता है। DMF इन आवेदनों में महत्वपूर्ण भूमिका निभाते हैं।जब निर्माता विशिष्ट सामग्रियों के लिए डीएमएफ दाखिल करते हैं, तो एफडीए अनुमोदन प्रक्रिया में काफी तेजी आ सकती है।
येसेन के पास DMF फ़ाइलें हैं जो परियोजना की समयसीमा को सुव्यवस्थित कर सकती हैं। यदि आप चाहें, तो आप अपने FDA आवेदन का समर्थन करने के लिए हमारे DMFs को संदर्भ प्राधिकरण का अनुरोध कर सकते हैं। हमारे DMFs के संदर्भ प्राधिकरण को आरंभ करने के लिए, कृपया येसेन को प्राधिकरण पत्र का अनुरोध प्रस्तुत करें, जिसमें अनुरोध किया गया हो कि हम FDA केंद्र-विशिष्ट DMF प्राधिकरण पत्र प्रदान करें।
4. येसेन उत्पादों के अनुप्रयोग परिदृश्य
4.1 टेम्पलेट जनरेशन
प्लास्मिड रैखिकीकरण टेम्पलेट निर्माण के दौरान एक अपरिहार्य चरण है जब प्लास्मिड वेक्टर का उपयोग प्रतिलेखन टेम्पलेट के रूप में किया जाता है। जैसे-जैसे प्रतिलेखन डीएनए टेम्पलेट के अंत तक आगे बढ़ता है, प्लास्मिड रैखिकीकरण सुनिश्चित करता है कि एक निर्धारित लंबाई और अनुक्रम के आरएनए प्रतिलेख उत्पन्न होते हैं। येसेन आपकी ज़रूरतों को पूरा करने के लिए विभिन्न प्रतिबंध एंजाइम प्रदान करता है। हम ऐसे प्रतिबंध एंजाइम चुनने की सलाह देते हैं जो कुंद सिरे या 5´-ओवरहैंग उत्पन्न करते हैं।
4.2 कृत्रिम परिवेशीय प्रतिलेखन ( आईवीटी )
इन विट्रो प्रतिलेखन विभिन्न कारकों से प्रभावित होता है। एंजाइम, बफर्स और संशोधित सबस्ट्रेट्स सभी का प्रतिलेखन दक्षता पर बहुत प्रभाव पड़ता है।
ज़ाइमएडिटर प्लेटफ़ॉर्म के आधार पर, येसेन बायोटेक ने नए टी7 आरएनए पॉलीमरेज़ विकसित किए हैं जो इन विट्रो ट्रांसक्रिप्शन (आईवीटी) प्रक्रिया के दौरान डीएसआरएनए की उत्पत्ति को काफी कम कर देते हैं (टी7 आरएनए पॉलीमरेज़, कम डीएस आरएनए, 250 यू/μL)। यह mRNA की प्रतिरक्षा क्षमता को बहुत कम कर देता है और एक हद तक mRNA की अखंडता को बढ़ाता है। इस विकास से mRNA टीकों और कैंसर दवाओं के विकास को आगे बढ़ाने में महत्वपूर्ण भूमिका निभाने की उम्मीद है।
बफर को अनुकूलित करके और न्यूक्लियोटाइड सब्सट्रेट के नमक प्रकार को समायोजित करके, हमने प्रतिलेखन की दक्षता में काफी सुधार किया और डीएसआरएनए के उत्पादन को कम किया।
चित्र 2. ट्रिस एनटीपी lVT दक्षता को काफी हद तक बढ़ा सकता है और dsRNA उत्पादन को कम कर सकता है
4.3 mRNA कैपिंग
चूंकि 5' कैप संरचना प्रतिरक्षाजनकता को कम करती है और mRNA के कुशल अनुवाद के लिए आवश्यक है, इसलिए प्रतिलेखन द्वारा उत्पन्न mRNA के 5' छोर पर कैप संरचना जोड़ना आवश्यक है।
चित्र 3. कैप दर पहचान परिणाम (एलसी-एमएस पहचान)
4.4 mRNA शुद्धिकरण
उच्च शुद्धता वाले mRNAs प्राप्त करने के लिए शुद्धिकरण एक अपरिहार्य कदम है।
5. येसेन द्वारा mRNA वैक्सीन तैयार करने के लिए कच्चा माल उपलब्ध कराया गया
वर्तमान में, येसेन mRNA स्टॉक समाधान की उत्पादन प्रक्रिया में उत्पादों का एक पूरा सेट प्रदान कर सकता है। उत्पादों को GMP उत्पादन द्वारा सख्ती से नियंत्रित किया जाता है और mRNA वैक्सीन उत्पादन की आवश्यकताओं को पूरी तरह से पूरा करता है।
तालिका 2.येसेन द्वारा mRNA वैक्सीन तैयार करने के लिए कच्चा माल उपलब्ध कराया गया
| टेम्पलेट तैयार करना | इन विट्रो प्रतिलेखन | ||
| 2× हाईफ़ कैनेस एडवांसफ़ास्ट हाई-फ़िडेलिटी पीसीआर मास्टर मिक्स | 10164ईएस | 10623ईएस | |
| 10122ईएस | 10625ईएस | ||
| 10922ईएस | 10672ईएस | ||
| 10300ईएस | 10621ईएस | ||
|
| 10611ईएस | ||
| 10661ईएस | 10133ईएस | ||
| आरएनएएस आर (20यू/यूएल) | 14615ईएस | 10650ईएस | |
| Xba मैं | 10662ईएस | 10651ईएस | |
| कैपिंग |
| शुद्धिकरण |
|
| 10614ईएस | 12602ईएस | ||
| 10612ईएस | चुंबकीय पृथक्करण रैक | 80460ईएस | |
| 10619ईएस | 36717ईएस | ||
| 10681ईएस |
| ||
6. ऑर्डरिंग जानकारी
येसेन द्वारा प्रस्तुत प्रतिनिधि उत्पाद निम्नलिखित हैं। अतिरिक्त आकार भी उपलब्ध हैं।हमारे उत्पाद बेहतरीन प्रदर्शन और पुनरुत्पादन सुनिश्चित करने में मदद करने के लिए मिलकर काम करने के लिए अत्यधिक अनुकूलित हैं। हम अनुकूलित सेवाएँ भी प्रदान कर सकते हैं। यदि आप किसी ऐसे उत्पाद में रुचि रखते हैं जो दिखाया नहीं गया है, तो हमसे संपर्क करें और हम आपकी ज़रूरतों को पूरा करने के लिए आपके साथ काम करेंगे।
तालिका 3. ऑर्डरिंग जानकारी
पढ़ने के संबंध में:
इन विट्रो संश्लेषण में mRNA के लिए GMP-ग्रेड अभिकर्मक
डीएनएसे I और बायोमेडिसिन में उनके अनुप्रयोग
संदर्भ:
[1] चौधरी, एन., वीसमैन, डी., और व्हाइटहेड, के.ए. (2021)। संक्रामक रोगों के लिए mRNA टीके: सिद्धांत, वितरण और नैदानिक अनुवाद। प्रकृति समीक्षा. दवा खोज, 20(11), 817–838.
[2] वोगेल, एबी एट अल. स्व-प्रवर्धित आरएनए टीके इन्फ्लूएंजा के खिलाफ mRNA टीकों के बराबर सुरक्षा देते हैं लेकिन
बहुत कम मात्रा में। आणविक चिकित्सा: अमेरिकन सोसायटी ऑफ जीन थेरेपी की पत्रिका 26, 446-455,
[3] फुच्स, ए.एल., न्यू, ए. और स्प्रैंगर्स, आर. 5' के तेजी से और लागत-कुशल बड़े पैमाने पर उत्पादन के लिए एक सामान्य विधि
कैप्ड आरएनए. आरएनए (न्यूयॉर्क, एनवाई) 22, 1454-1466, doi:10.1261/rna.056614.116 (2016)।
[4] श्मिड, ए.क्लिनिकल ट्रायल के लिए mRNA वैक्सीन के उत्पादन के लिए विचार। आणविक जीव विज्ञान में विधियाँ (क्लिफ्टन, एनजे) 1499, 237-251,
[5] बनर्जी, ए. एट अल. कोविड-19 बीमारी और रिपोर्ट की गई एलर्जी प्रतिक्रियाओं को रोकने के लिए mRNA वैक्सीन: वर्तमान साक्ष्य और सुझाया गया दृष्टिकोण। एलर्जी और क्लिनिकल इम्यूनोलॉजी का जर्नल। अभ्यास में 9, 1423-1437,
[6] रिचनर, जेएम एट अल. संशोधित mRNA टीके जीका वायरस संक्रमण से बचाते हैं। सेल 168, 1114-1125.e1110,
[7] कॉर्बेट, के.एस. एट अल. SARS-CoV-2 mRNA वैक्सीन डिज़ाइन प्रोटोटाइप रोगज़नक़ तैयारी द्वारा सक्षम है। प्रकृति 586,567-571,
[8] कॉर्बेट, के.एस. एट अल. mRNA-1273 गैर-मानव प्राइमेट्स में SARS-CoV-2 बीटा संक्रमण से बचाता है। नेचर इम्यूनोलॉजी 22, 1306-1315,
[9] कीच, सी. एट अल. SARS-CoV-2 रिकॉम्बिनेंट स्पाइक प्रोटीन नैनोपार्टिकल वैक्सीन का चरण 1-2 परीक्षण। न्यू इंग्लैंड जर्नल ऑफ मेडिसिन 383, 2320-2332,
[10] क्रैम्प्स, टी. और एल्बर्स, के. आरएनए वैक्सीन का परिचय। आणविक जीव विज्ञान में विधियाँ (क्लिफ्टन, एनजे) 1499, 1-11,
[11] लिनारेस-फर्नांडीज, एस., लैक्रोइक्स, सी., एक्सपोसिटो, जे.वाई. और वेरियर, बी. जन्मजात/अनुकूली प्रतिरक्षा प्रतिक्रिया को संतुलित करने के लिए mRNA वैक्सीन को तैयार करना। आणविक चिकित्सा में रुझान 26, 311-323,