- 고효율 역전사효소를 이용한 RT-qPCR
역전사효소(RT 효소)는 RNA 템플릿을 보완 DNA(cDNA)로 전환할 수 있는 효소입니다. 분자생물학 연구에서 역전사효소는 널리 사용되며, 특히 분자 진단 분야에서 없어서는 안 될 역할을 합니다. 역전사 과정을 통해 바이러스의 RNA 게놈을 cDNA로 전환한 다음 qPCR과 같은 기술을 사용하여 증폭하고 검출할 수 있습니다. 이 특성은 HIV, 인플루엔자 A, 인플루엔자 B와 같은 RNA 바이러스를 정확하게 진단할 수 있게 합니다.
그림 1. 역전사 과정의 개략도
더 빠르고, 더 민감하고, 더 쉽게 조작할 수 있는 RT-qPCR 분자 진단 시약에 대한 추구는 현재 개발의 주요 추세가 되었습니다. RT-qPCR 공정의 핵심 원료 중 하나인 역전사효소는 더 빠른 역전사 속도, 더 높은 합성 수율, 더 나은 내열성을 가져야 합니다. RT-qPCR에 더 적합한 역전사효소를 얻기 위해
그림 2. 역전사 작용의 개략도
Hifair ™ 역전사효소
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제품명(제품번호 ) |
제품 특징 |
추천 응용 프로그램 |
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열적으로 안정적(최대 65°C), 복잡한 템플릿에 적합 |
RT-램프 |
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강력한 호환성, 빠른 속도, 높은 합성 수율 |
원스텝 RT-PCR/qPCR |
참고사항: 위에 언급된 모든 효소는 고농도 또는 비글리세롤 제형으로 제공됩니다.
이제 RT-qPCR 분자 진단 시약에 사용되는 역전사효소인 Hifair TM V 역전사효소를 강조합니다. 이 효소는 강력한 호환성, 빠른 속도, 높은 합성 수율로 구별되며 최대 58°C의 반응 온도를 견딜 수 있습니다. RT-qPCR 분자 진단 시약 개발에 특히 적합합니다.
Hifair™ V 역전사효소 의 성능 시연
1. 58°C의 반응 온도를 견딜 수 있어 복잡한 RNA 템플릿의 역전사에 적합합니다 .
그림 3. Hifair TM V 역전사효소와 브랜드 T*의 역전사효소를 각각 55℃와 58℃에서 30분간 배양하여 잔류 효소 활성을 검출했습니다. 결과에 따르면 Hifair TM V 역전사효소는 58℃에서 30분간 배양한 후에도 여전히 70%의 활성을 유지할 수 있었으며, 이는 브랜드 T*보다 훨씬 높았습니다.
2. RT-qPCR의 검출율은 다른 브랜드보다 우수했습니다 . 그리고 검출 범위는 1 pg-1 μg였습니다 .
그림 4. 293T 세포의 1 pg-1 μg(7단계 기울기) 총 RNA를 템플릿으로 사용하여 Hifair TM V one-step RT-gDNA digestion SuperMix for qPCR(Cat#11142), V*, T*를 사용하여 역전사를 수행했습니다. 얻은 cDNA는 qPCR로 정량 분석했습니다. 결과에 따르면 11142ES의 민감도는 1 pg에 도달할 수 있었으며 이는 다른 브랜드보다 우수했습니다.
역전사효소 돌연변이 Yeasen Library
표 2 .
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제품 분류 |
제품 이름 |
카탈로그 번호 |
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고성능 PCR 효소 시리즈 |
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