LAMP에서 Bst DNA 중합효소의 역할은 무엇입니까?

등온 핵산 증폭 기술은 다양한 증폭 원리에 따라 여러 범주로 나눌 수 있습니다. 현재 가장 일반적이고 널리 사용되는 것은 2000년 일본 학자 Notomi 등이 개발한 루프 매개 등온 증폭 기술(LAMP)입니다. Bst DNA 중합효소는 등온 증폭 기술의 핵심 효소입니다. LAMP에서 Bst DNA 중합효소의 기능과 성능은 무엇입니까?

1. Bst DNA 중합효소는 LAMP에서 어떤 역할을 합니까?
2. 동결건조 Bst Plus DNA 중합효소란 무엇입니까?
3. Lyophilized Bst Plus DNA Polymerase(14405ES) 의 제품 특징은 무엇입니까?
4. Lyophilized Bst Plus DNA Polymerase(14405ES)의 제품 성능은 무엇입니까?
5. 관련상품
6. 독서에 관하여

1. Bst DNA 중합효소는 LAMP에서 어떤 역할을 합니까?

LAMP의 기술적 특징은 표적 유전자의 6개 영역에 대한 4개의 프라이머를 설계하고 60~65℃의 일정한 온도 조건에서 BST DNA 중합효소를 사용하여 증폭 반응을 수행하여 15~60분 이내에 109~1010배의 증폭을 달성하는 것입니다. Bst DNA 중합효소는 강력한 열 안정성, 스트랜드 변위 활성 및 중합효소 활성을 가지고 있습니다. PCR 열 변성 증폭 사이클 없이 일정한 온도 조건에서 빠르고 효율적이며 특정적인 증폭 템플릿이 될 수 있으며 1시간 이내에 전체 LAMP 실험을 완료할 수 있습니다.

2. 동결건조 Bst Plus DNA 중합효소란 무엇입니까?

동결건조된 Bst Plus DNA Polymerase는 글리세롤이 없는 Bst Plus DNA Polymerase를 동결시키는 데 사용되며, 이는 글리세롤이 없는 Bst 효소 불안정성 문제를 해결합니다. 동시에, 이 제품은 강력한 5'-3' DNA 중합효소 활성, 스트랜드 변위 활성 및 dUTP 내성을 가지고 있어 오염 방지 등온 증폭 반응에 더 적합하며, 고객이 동결건조 제품 생산에 사용하기 편리합니다.

그림1: 14405ES-동결건조 Bst Plus DNA 중합효소(60 U/μL,글리세롤 없음)

3. Lyophilized Bst Plus DNA Polymerase(14405ES)의 제품 특징은 무엇입니까?

  • 동결건조에 적합한 글리세롤이 없는 효소
  • 비용 절감을 위해 상온에서 운송
  • 강력한 스트랜드 변위 활동, 민감하고 안정적입니다.
  • 빠른 재용해 및 편리한 조작

4. Lyophilized Bst Plus DNA Polymerase(14405ES)의 제품 성능은 무엇입니까?

4.1 동결건조 분말 형태: T0 순간과 비교하여 45℃에서 15일간 동결건조한 후에도 분말 형태는 변화가 없습니다.

그림 2. 동결건조 분말 형태

4.2 안정성

열 가속 후 동결 건조 분말의 성능은 여전히 ​​액체 시약의 성능과 일치할 수 있으며 동결 건조 분말(14405ES)은
보편적이며 형광염료법 및 pH 지시약법에 모두 사용 가능합니다.

4.2.1 형광염료법——안정성

RT-LAMP 형광염료 증폭 시스템에서 글리세롤이 없는 Bst 동결건조분말의 T0, 45℃-7일 및 45℃-15일 열가속 후 성능은 글리세롤이 없는 Bst 효소 액상 버전과 일치하였으며 NTC는 피크에 도달하지 않았다.

실험 조건:

체계 RT-LAMP 형광염료법 기구 Q5, SLAN
주형 코로나19 RNA 집중 50부/T
절차 37℃, 2분. 65℃, 60분

참고사항: 대조군은 동일 농도의 글리세롤 Bst 효소가 없는 액체 버전입니다.

그림 3. 안정성 결과

4.2.2 형광염료법—RT-LAMP계 동결건조 후 Bst효소의 성능

RT-LAMP 형광염료 증폭 시스템에서, RT-LAMP 시스템에서 45℃-15일 후 동결건조한 글리세롤이 없는 Bst 동결건조 분말의 제품 성능은 글리세롤이 없는 Bst 효소의 액상 버전과 일치했습니다. 동결건조 후 대조군과 RT-LAMP 시스템에서 제품의 검출률은 각각 100%(16/16)과 94%(15/16)였습니다.

실험 조건:

체계 RT-LAMP 형광염료법 기구 Q5, SLAN
주형 코로나19 RNA 집중 50부/T
절차 37℃, 2분. 65℃, 60분

참고사항: 대조군은 동일 농도의 글리세롤 Bst 효소가 없는 액체 버전입니다.

그림 4. RT-LAMP 시스템의 동결건조 후 Bst 효소의 성능

4.2.3 PH 지시약법 ——안정성

RT-LAMP pH 지시약 증폭 시스템에서 T0시간과 비교하여 45℃~15일 열가속 후 Bst 동결건조분말의 검출률은 88%(7/8)이었다.

실험 조건:

체계 RT-LAMP PH 지시약법 주형 코로나19 RNA
절차 37℃, 2분. 65℃, 60분 집중 50부/T

참고사항: 대조군은 동일 농도의 글리세롤 Bst 효소가 없는 액체 버전입니다.

그림 5. 안정성 결과

4.2.4 PH 지시약 방법—재동결 안정성

RT-LAMP pH 지시약 증폭 시스템에서 45℃~7일 재냉동 후 성능이 안정적입니다. 대조군은 액상 Bst 효소입니다. 대조군과 비교했을 때 열 가속 후 14405ES의 검출률은 94%(30/32)입니다.

실험 조건:

체계 RT-LAMP PH 지시약법 주형 코로나19 RNA
절차 37℃, 2분. 65℃, 60분 집중 50부/T

참고사항: 대조군은 동일 농도의 글리세롤 Bst 효소가 없는 액체 버전입니다.

그림 6. 재냉동 안정성 결과

4.3 특이성

RT-LAMP 형광염료 증폭 시스템에서는 48웰 NTC에서 피크가 나타나지 않았고, 14405ES의 특이도는 100%였다.

실험 조건:

체계 RT-LAMP 형광염료법 기구 Q5, SLAN
주형 코로나19 RNA 집중 50부/T
절차 37℃, 2분. 65℃, 60분

참고사항: 대조군은 동일 농도의 글리세롤 Bst 효소가 없는 액체 버전입니다.

그림 7. 구체적인 결과

5. 관련상품

Yeasen이 제공할 수 있는 관련 제품은 표 1에 나와 있습니다.

표 1. 관련 제품

제품 포지셔닝 제품 이름 고양이#
고감도 Bst 효소 Hieff™ Bst Plus DNA 중합효소(40 U/μL) 14402ES
Hieff™ Bst Plus DNA 중합효소(2000 U/μL) ( 문의 ) 14403ES
동결건조 Bst Plus DNA 중합효소(60 U/μL, 글리세롤 무첨가) 14405ES
형광염료법 RT-LAMP 염색 분석 키트(UDG plus) 13762ES
PH 지시약법 RT-LAMP pH 민감 염료 크로모제닉 버전 동결 건조 가능 시약 ( 문의 ) 13920ES
코로나 19 RT-LAMP COVID 19 (pH 지시약법) 동결건조 비드 ( 문의 ) 13919ES
RT-LAMP COVID-19 프라이머 마스터 믹스 (N) ( 문의 ) 13995ES
RT-Lamp에 적합한 역전사효소 Hifair™ III 역전사효소 ( 문의 ) 11111ES
Hifair™ III 역전사효소, 글리세롤 무첨가 ( 문의 ) 11297ES
쥐 RNase 억제제 쥐 RNase 억제제(40 U/μL) 10603ES
쥐 RNase 억제제(200 U/μL, 글리세롤 없음) 10703ES
열에 불안정한 UDG 우라실 DNA 글리코실라제(UDG/UNG), 열불안정, 1 U/μL( 문의 ) 10303ES
고순도 dUTP dUTP(100mM 용액) 10128ES

6. 독서에 관하여

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역전사효소 선택 지침

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