Reagentes de transfecção celular se tornaram reagentes de rotina para estudar e controlar a função genética em células eucarióticas. Reagentes de transfecção são amplamente usados ​​em pesquisa de função genética, regulação de expressão genética e análise de mutação, bem como terapia genética, terapia celular, produção de proteína e produção de vacina. Então, o que é transfecção? E como escolher um tipo de reagente de transfecção com base em seus experimentos?

Quais são os tipos de transfecção?

As características dos reagentes de transfecção de Yeasen

Como escolher um tipo de reagente de transfecção com base em seus experimentos?

Caso de aplicação

Referência para condições de transfecção

Perguntas frequentes

Considere a leitura

Quais são os tipos de transfecção?

De acordo com se o ácido nucleico é integrado ao cromossomo da célula hospedeira após a transfecção, ele é dividido em "transiente" (transfecção transitória) e "estável" (transfecção estável). A eficiência da transfecção, citotoxicidade, efeitos na fisiologia normal e níveis de expressão gênica de diferentes métodos de transfecção são diferentes. Os princípios, aplicações e características são comparados na tabela a seguir:

Tabela 1 Comparação de diferentes métodos de transfecção

As características de reagentes de transfecção de Yeasen

Para reagentes de transfecção de DNA e reagentes de transfecção de RNA, a Yeasen Biotechnology tem uma forte equipe de P&D e produção, otimiza continuamente fórmulas, melhora processos de produção e lançou uma variedade de produtos baseados em lipossomas catiônicos e polímeros catiônicos. Instituições de pesquisa científica e empresas fornecem uma gama completa de produtos, e a linha de produtos cobre todos os campos envolvidos em reagentes de transfecção.

• Alta eficiência: adequado para transfecção transitória ou transfecção estável de linhas celulares.
• Baixa toxicidade: as células transfectadas permanecem bem viáveis.
• Ampla adaptabilidade: cobertura abrangente de células comuns e células primárias difíceis de transfectar.
• Fácil de operar: adequado para meio na presença de soro, sem alterar o meio antes e depois da transfecção.
• Custo-benefício: econômico e prático, alta eficiência de transfecção, baixo preço.

Como escolher um tipo de reagente de transfecção com base em seus experimentos?

A seleção de reagentes de transfecção precisa ser feita de acordo com os diferentes propósitos e conteúdos experimentais, como substâncias transfectadas, células específicas, conveniência de operação e outros fatores.

Caso de aplicação

Reagente de transfecção lipossomal Hieff Trans™

Hieff Trans™ é fornecido em forma líquida estéril. Geralmente, para transfecção de placas de 24 poços, cerca de 1,5 μL de cada vez, 1 mL de Hieff Trans™ pode fazer cerca de 660 transfecções; para placa de 6 poços, cerca de 6 μL de cada vez, 1 mL de Hieff Trans™ pode fazer cerca de 660 transfecções. 160 transfecções;

Para mais detalhes, consulte Confiança na transfecção com o reagente Hieff Trans™ Lipofectamine

Polietilenimina Linear (PEI) MW40000 (lise rápida)

PEI 40000 é um polímero catiônico altamente carregado com um peso molecular de 40.000 que se liga a moléculas de ácido nucleico carregadas negativamente muito facilmente, formando um complexo e permitindo que o complexo entre nas células. PEI 40000 é um reagente de transfecção transitório com baixa citotoxicidade, alta eficiência de transfecção e alta eficiência de expressão gênica em células como HEK293 e CHO. Os reagentes de transfecção PEI linear foram validados para uma ampla gama de linhagens celulares, incluindo células HEK-293, HEK293T, CHO-K1, COS-1, COS-7, NIH/3T3, Sf9, HepG2 e Hela. A eficiência de transfecção é tão alta quanto 80%~90%.

Para mais detalhes, consulte Novo favorito para transfecção —— Linear PEI MW 40000, um reagente de transfecção mais eficiente

Hieff Trans™ em vitro Reagente de transfecção siRNA/miRNA

Este produto pode atingir mais de 90% de eficiência de expressão de 1 nM de siRNA em uma ampla gama de linhas celulares, evitando efeitos fora do alvo. Adequado para transfecção de uma variedade de células, incluindo Hela, MCF-7, HepG2, CHO e outras células aderentes; e linhas celulares de suspensão difíceis de transfectar, como células K562 ou THP-1, podem atingir 80% de eficiência de silenciamento; Incluindo algumas células primárias, fibroblastos humanos primários e hepatócitos humanos primários, etc., a eficiência de silenciamento de 80% pode ser alcançada.

Referência para condições de transfecção

Além das instruções para cada produto, os clientes operam de acordo com seu conteúdo experimental específico, e haverá diferenças diferentes na quantidade de uso. De acordo com as condições de transfecção de células in vitro relatadas pelos clientes após o uso do produto, elas foram classificadas para sua referência.

Perguntas frequentes

1 Hieff Trans™ Reagente de Transfecção Lipossomal

1.1 P: O soro pode estar presente ao preparar complexos de reagentes de transfecção de ácido nucleico?

A: A presença de soro afetará a formação de lipossomas. É recomendado usar um meio sem soro (geralmente meio MEM) ao preparar complexos de reagentes de transfecção de ácido nucleico.

1.2 P: O que devo prestar atenção ao usar o reagente de transfecção de ácido nucleico lipossomal Hieff Trans™?

UM:

1) Quando as células são transfetadas, a densidade celular é preferencialmente de 80%-95%, e a densidade de revestimento específica é determinada de acordo com a situação das células;

2) O uso de DNA de alta pureza ajuda a obter maior eficiência de transfecção;

3) Os reagentes de DNA e transfecção devem ser diluídos com o meio isento de soro ao preparar os complexos de transfecção;

4) Não podem ser adicionados antibióticos ao meio durante a transfecção;

5) Os reagentes devem ser armazenados entre 2 e 8°C, e deve-se tomar cuidado para não abrir a tampa repetidamente por muito tempo;

6) A concentração de DNA e o número de reagentes de lipossomas catiônicos devem ser otimizados para o primeiro uso para obter a máxima eficiência de transfecção. A proporção de DNA para reagente de transfecção é geralmente recomendada como 1:2-1:3.

1.3 P: É necessário interromper a vacinação após a transfecção?

R: Não precisa. Os complexos de lipossomas são estáveis ​​por 6 horas. Se o meio celular não for trocado antes da transfecção, para garantir os nutrientes necessários para o crescimento normal das células, é necessário trocar para um novo meio após 4-6 horas. No entanto, se o meio tiver sido trocado antes da transfecção, não é necessário trocar o meio após a transfecção do lipossomo.

1.4 P: A co-transfecção de DNA e siRNA pode ser realizada? Como é o efeito?

R: Sim, quando DNA e siRNA são cotransfetados, a eficiência de transfecção do siRNA será um pouco pior.

1.5 P: O reagente de transfecção pode ser usado para transfecção de embalagens lentivirais?

R: A embalagem lentiviral é possível.

1.6 P: As células em suspensão podem ser transfeitas com o reagente de transfecção de ácido nucleico lipossomal Hieff Trans™?

A: O Hieff Trans™ Liposome Nucleic Acid Transfection Reagent pode ser usado para transfecção de células em suspensão, veja o Protocolo para detalhes. Além disso, também introduzimos um reagente de transfecção especificamente para células em suspensão (Cat No.40805, Hieff Trans™ Suspensão Lipossomal Livre de Células Reagente de Transfecção)

2 Hieff Trans™ em vitro Reagente de transfecção siRNA/miRNA

2.1 P: O reagente de transfecção precisa ser trocado após a transfecção?

R: Este problema pode ser dividido em dois casos: 1. Se não houver troca de meio antes da transfecção, o meio deve ser trocado cerca de 6 horas após a transfecção para garantir os nutrientes necessários para o crescimento celular; 2. Se houver troca de meio antes da transfecção, pode ser operado de acordo com a operação normal das células cultivadas? ? Após a operação de troca de líquido?

2.2 P: Os reagentes de transfecção podem ser congelados?

R: Não pode ser congelado, porque o reagente de transfecção é um reagente de transfecção catiônico PEI. O congelamento em baixas temperaturas destruirá a atividade do reagente de transfecção PEI. Portanto, é melhor armazená-lo a 2-8 °C para manter a melhor eficácia de transfecção.

Informações do produto

Alguns dos artigos publicados usando nossos produtos

[1] Liu R, Yang J, et al. Controle optogenético da função e metabolismo do RNA usando proteínas de ligação ao RNA comutáveis ​​por luz projetadas. Nat Biotechnol. 2022 3 de janeiro. (IF:55)

[2] Luo J, Yang Q, et al. TFPI é um receptor de cripta colônica para TcdB do clado hipervirulento 2 C. difficile. Célula. 17 de março de 2022. (IF: 41.582)

[3] Zhou J, Chen P, et al. Variantes Cas12a projetadas para menor efeito off-target em todo o genoma por meio do reconhecimento rigoroso de PAM. Mol Ther. 2022 Jan 5.(IF:11.454)

[4] Chen S, Cao X, et al. circVAMP3 impulsiona a separação de fases do CAPRIN1 e inibe o carcinoma hepatocelular suprimindo a tradução de c-Myc. Adv Sci (Weinh). 24 de janeiro de 2022. (IF:16.808)

[5] Gu C, Wang Y, et al. AHSA1 é um alvo terapêutico promissor para proliferação celular e resistência ao inibidor de proteassoma em mieloma múltiplo. J Exp Clin Cancer Res. 2022 6 de janeiro. (IF:11.161)

[6] Zhang Y, Yu X, et al. O fator de splicing rico em arginina/serina 8 promove malignidade de mieloma múltiplo e lesão óssea por meio do splicing alternativo de CACYBP e comunicação celular baseada em exossomo. Clin Transl Med. 2022 fev.(IF:11.492)

[7] Qin J, Cai Y, et al. Mecanismo molecular de agonismo e agonismo inverso no receptor de grelina. Nat Commun. 2022 13 de janeiro.(IF:14.9)

[8] Tang X, Deng Z, e outros.Uma nova proteína codificada por circHNRNPU promove a progressão do mieloma múltiplo regulando o microambiente da medula óssea e o splicing alternativo. J Exp Clin Cancer Res. 2022 Mar 8.(IF:11.161)

[9] Xie F, Su P, et al. Engenharia de vesículas extracelulares enriquecidas com ACE2 palmitoilado como terapia para COVID-19. Adv Mater. 19 de outubro de 2021. (IF:30.849)

[10] Liang Y, Lu Q, et al. Reativação do supressor tumoral no câncer de mama por troca de intensificador por meio da rede NamiRNA. Nucleic Acids Res. 2021 7 de setembro. (IF:16.9)

[11] Fan Y, Wang J, et al. CircNR3C2 promove efeito supressor de tumor mediado por HRD1 por meio da esponja miR-513a-3p em câncer de mama triplo-negativo. Mol Cancer. 2 de fevereiro de 2021. (IF:27.403)

[12] Dai L, Dai Y, et al. Visão estrutural do recrutamento do complexo BRCA1-BARD1 para cromatina danificada. Mol Cell. 2021 Jul 1.(IF:17.97)

[13] Zhang K, Wang A, et al. O eixo UBQLN2-HSP70 reduz agregados de poli-Gly-Ala e alivia defeitos comportamentais no modelo animal C9ORF72. Neuron. 16 de junho de 2021. (IF:17.17)

[14] Li T, Chen X, et al. Um dispositivo optogenético sintético baseado em BRET para expressão transgênica pulsátil permitindo a homeostase da glicose em camundongos. Nat Commun. 2021 27 de janeiro.(IF:14.92)

[15] Yan F, Huang C, et al. ADP-ribosilação de treonina da ubiquitina por uma família de efetores bacterianos bloqueia a ubiquitinação do hospedeiro. Mol Cell. 21 de maio de 2020. (IF:17,97)

[16] Sun X, Peng X, et al. ADNP promove diferenciação neural modulando a sinalização Wnt/β-catenina. Nat Commun. 2020 Jun 12.(IF:14.911)

[17] Yang X, Wang H, et al. A reconfiguração da sinalização ERBB3 e ERK confere resistência à inibição de FGFR1 em câncer gastrointestinal que abrigava uma mutação ERBB3-E928G. Protein Cell. 2020 Dez. (IF:14.872)

[18] Zou Y, Wang A, et al. Análise de paisagens redox e dinâmica em células vivas e in vivo usando sensores fluorescentes codificados geneticamente. Nat Protoc. 2018 Out.(IF:13.490)

[19] Hao H, Hu S, et al. Perda de CXCR7 endotelial prejudica a homeostase vascular e a remodelação cardíaca após infarto do miocárdio: implicações para a descoberta de medicamentos cardiovasculares. Circulação. 28 de março de 2017. (IF:29,69)

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