Bối cảnh – ROS là gì
Các loài oxy phản ứng (ROS) là sản phẩm bình thường của quá trình chuyển hóa tế bào - một phân tử hoạt tính sinh học chứa oxy, bao gồm peroxide, superoxide, gốc hydroxyl, oxy đơn và α-oxygen, v.v., đóng vai trò điều hòa quan trọng trong các con đường truyền tín hiệu tế bào và phiên mã, chẳng hạn như apoptosis, autophagy, lão hóa, ung thư, v.v.
Ảnh hưởng của nồng độ ROS lên tế bào – tại sao phải phát hiện ROS?
Ở mức độ thấp của các loài oxy phản ứng, ROS tham gia vào quá trình truyền tín hiệu và điều hòa nội bào như "chất truyền tin oxy hóa khử". Tuy nhiên, dưới áp lực của môi trường (ví dụ, bức xạ ion hóa, tiếp xúc với nhiệt, tia cực tím, tình trạng thiếu oxy, v.v.), mức ROS tăng lên đáng kể, có thể gây tổn thương DNA, ức chế biểu hiện gen, dẫn đến protein gấp sai và thậm chí ảnh hưởng đến quá trình tổng hợp protein, gây tổn thương nghiêm trọng đến cấu trúc tế bào, được gọi là stress oxy hóa.
Khi nồng độ ROS vượt quá khả năng chống oxy hóa nội sinh, cân bằng oxy hóa khử bị phá vỡ, dẫn đến những thay đổi về cấu trúc hoặc hình thái trong DNA, lipid, protein và cuối cùng là chết tế bào.
Mức ROS là một tín hiệu quan trọng của tổn thương tế bào do các chức năng sinh lý bình thường và các yếu tố môi trường gây ra, và việc phát hiện mức ROS nội bào có ý nghĩa to lớn trong việc hiểu các con đường truyền tín hiệu và cơ chế tác dụng tiềm tàng của một số loại thuốc. Do đó, việc lựa chọn các đầu dò thích hợp để phát hiện ROS đóng vai trò quan trọng trong nghiên cứu cơ chế bệnh và sàng lọc thuốc.
Quá trình phát hiện ROS diễn ra như thế nào?
Các Bộ xét nghiệm loài oxy phản ứng (CAT# 50101ES01) là phương pháp được sử dụng phổ biến nhất để định lượng mức độ các loài oxy phản ứng nội bào dựa trên những thay đổi về cường độ huỳnh quang của thuốc nhuộm huỳnh quang DCFH-DA (2,7-Dichlorodi-hydrofluorescein diacetate).
Bản thân DCFH-DA không có huỳnh quang và có thể tự do đi qua màng tế bào, và sau khi vào tế bào, nó có thể bị thủy phân bởi các esterase nội bào để tạo ra DCFH. Tuy nhiên, DCFH không thể xuyên qua màng tế bào, khiến đầu dò dễ bị gắn nhãn và tập hợp bên trong tế bào. Các loài oxy phản ứng nội bào có thể oxy hóa DCFH không huỳnh quang để tạo thành DCF huỳnh quang. Cường độ huỳnh quang xanh DCF tỷ lệ thuận với mức độ các loài oxy phản ứng nội bào và mức độ các loài oxy phản ứng nội bào có thể được biết bằng cách phát hiện huỳnh quang của DCF.
Trong điều kiện bước sóng kích thích 488 nm và bước sóng phát xạ 525 nm, huỳnh quang DCF được phát hiện bằng kính hiển vi huỳnh quang, kính hiển vi cộng hưởng laser, máy quang phổ huỳnh quang, máy đọc vi mạch huỳnh quang, máy đo lưu lượng tế bào, v.v., để xác định mức độ các loài oxy phản ứng nội bào.
Tài liệu do khách hàng sử dụng sản phẩm này xuất bản (một số ví dụ)
Tính đến tháng 9 năm 2022, tổng cộng 164 bài báo đã được xuất bản trên bộ phát hiện loài oxy phản ứng ROS (50101ES01), với tổng hệ số tác động là 913,72.





Tác động của sản xuất ROS lên phân cực đại thực bào và tiêu diệt tế bào khối u (PMID: 35665496; PMID: 35301299; Mã số PMC: PMC8931093Mã số PMC: PMC9353410.

Câu hỏi thường gặp
Câu hỏi 1: Mẫu nào phù hợp để thử nghiệm ROS?
A1: Phương pháp này thường được sử dụng để phát hiện tế bào động vật có vú và chỉ phù hợp để phát hiện các loại oxy phản ứng trong tế bào sống hoặc trong cơ thể sống.
Câu hỏi 2: Bộ xét nghiệm ROS có phù hợp để phát hiện trong huyết thanh hoặc huyết tương không?
A2: Không phù hợp để phát hiện ROS trong huyết thanh hoặc dịch đồng nhất mô. Có thể thử huyền phù tế bào đơn được chuẩn bị từ mô tươi.
Câu 3: Có thể phát hiện được thực vật hoặc vi khuẩn không?
A3: Chỉ phù hợp để phát hiện các loài oxy phản ứng trong tế bào sống hoặc trong cơ thể sống, vì thời gian bán hủy của các gốc hydroxyl và các gốc superoxide của oxy rất ngắn, chỉ phù hợp để phát hiện các tế bào sống. Thực vật hoặc vi khuẩn, có thể được sử dụng để phát hiện sau khi chuẩn bị nguyên sinh chất, bộ dụng cụ này không thể phát hiện ROS trong cơ thể sống.
Câu hỏi 4: Làm thế nào để tránh nền huỳnh quang quá mức?
A4: Sau khi ủ đầu dò, hãy đảm bảo rửa sạch bất kỳ đầu dò nào còn sót lại chưa đi vào tế bào.
Câu hỏi 5: Tôi có thể phát hiện lượng ROS trong tế bào bình thường không?
A5: Hàm lượng các loại oxy phản ứng trong tế bào bình thường rất thấp và hiệu quả phát hiện có thể không tốt lắm.
Câu 6: Giá trị huỳnh quang âm và dương giống nhau, vậy điều gì đang xảy ra?
A6: Có thể do nồng độ của đầu dò thêm vào quá lớn, khuyến cáo nên giảm nồng độ đầu dò xuống 5-7,5 μM và thời gian ủ: 15-20 phút.
Câu 7: Huỳnh quang của đối chứng dương yếu, chuyện gì đang xảy ra?
A7: Rosup đối chứng dương thường được cô đặc ở nồng độ 100 μM, và sự gia tăng đáng kể các loài oxy phản ứng được quan sát thấy sau 30 phút-4 giờ sau khi kích thích. Hiệu ứng của đối chứng dương các loài oxy phản ứng có thể thay đổi rất nhiều giữa các tế bào khác nhau. Nếu không quan sát thấy sự gia tăng ROS trong vòng 30 phút sau khi kích thích, thời gian cảm ứng có thể được kéo dài hoặc nồng độ Rosup có thể được tăng lên một cách thích hợp.
A8: Cùng một đầu dò, không phân chia, 5 lần đầu hiệu quả rất tốt, lần này không nhuộm màu, có vấn đề gì không?
Câu hỏi 8: 1. Trạng thái tế bào không tốt, dẫn đến hiệu quả nhuộm thấp; 2. Thời gian cảm ứng thuốc dương tính quá ngắn và mức độ các loài oxy phản ứng có thể tăng đáng kể bằng cách ủ ở 37°C trong bóng tối trong 30 phút-4 giờ; 3. Đầu dò đã được đông lạnh và rã đông hơn 4 lần, hiệu quả nhuộm bị giảm và tín hiệu huỳnh quang không ổn định (đôi khi mạnh, đôi khi yếu và dễ dập tắt). Nên chia nhỏ đầu dò và bảo quản trong tủ đông -20°C tránh ánh sáng để tránh các chu kỳ đông lạnh-rã đông lặp lại.
Câu 9: Có thể sử dụng những dụng cụ nào để thử nghiệm?
A9: Kính hiển vi huỳnh quang, kính hiển vi cộng hưởng laser, máy quang phổ huỳnh quang, máy đọc vi mảng huỳnh quang, máy đo lưu lượng tế bào, v.v. có thể phát hiện giá trị huỳnh quang.
Các ấn phẩm nghiên cứu khoa học do khách hàng sử dụng sản phẩm này công bố (một phần)
[1] Zhong D, Jin K, Wang R, Chen B, Zhang J, Ren C, Chen X, Lu J, Zhou M. Hydrogel gốc vi tảo cho bệnh viêm ruột và lo âu, trầm cảm liên quan. Adv Mater. 26 tháng 1 năm 2024: e2312275. doi: 10.1002/adma.202312275. Epub trước khi in. PMID: 38277492. NẾU: 29,4
[2] Zhang M, et al. Bắt buộc các tế bào miễn dịch bằng cách làm im lặng Exosome có nguồn gốc từ NK có thể kích hoạt bằng ánh sáng (LASNEO) để tiêu diệt khối u hiệp đồng. Adv Sci (Weinh). 2022 tháng 8; 9 (22): e2201135. doi: 10.1002/advs.202201135. Epub 2022 tháng 6 4. NẾU: 16.806
[3] Zhang D, et al. Các chất mang vi khuẩn đường miệng dựa trên tảo nhỏ để cân bằng hệ vi khuẩn đường ruột và bảo vệ đường ruột trong bệnh ung thư xạ trị. Nat Commun. 2022 Tháng 3 17;13(1):1413. doi: 10.1038/s41467-022-28744-4. PMID: 35301299. NẾU: 14.919
[4] Jiao D và cộng sựBMSCs kích thích oxit graphene khử tương thích sinh học thúc đẩy quá trình tái tạo xương và chuyển động răng chỉnh nha thông qua việc thúc đẩy quá trình tạo tế bào hủy xương và hình thành mạch máu. Bioact Mater. 2022 ngày 6 tháng 2; 15:409-425. doi: 10.1016/j.bioactmat.2022.01.021. PMID: 35386350; PMCID: PMC8958387. NẾU: 14.593
[5] Guo G, et al. Liệu pháp hóa động lực học chọn lọc không gian của khối nano CuFe5O8 cho nhiễm trùng liên quan đến cấy ghép. ACS Nano. 27 tháng 10 năm 2020;14(10):13391-13405. doi: 10.1021/acsnano.0c05255. Epub 22 tháng 9 năm 2020. PMID: 32931252. NẾU: 14.588
[6] Yang C, et al. Liệu pháp quang động và quang nhiệt có trung gian bằng thanh nano TiO2 trang trí bằng phốt pho đỏ cho ung thư biểu mô tế bào thận. Nhỏ. 2021 tháng 7; 17 (30): e2101837. doi: 10.1002/smll.202101837. Epub 2021 tháng 6 19. PMID: 34145768. NẾU: 13.281
[7] Xiaolu Chen, et al. Các hạt nano phân phối khuếch đại chuỗi được bao bọc bằng mạng lưới kim loại-phenolic khắc phục tình trạng kháng thuốc điều trị ung thư thông qua liệu pháp kết hợp giữa đói/hóa động lực học/hóa trị liệu. Tạp chí Kỹ thuật Hóa học. Tháng 8 năm 2022; 442:136221. NẾU: 13.273
[8] Hao Ding, et al. Tế bào gốc trung mô được bao bọc trong hydrogel tiêm có khả năng loại bỏ các loài oxy phản ứng và tạo ra O2 để điều trị nhồi máu cơ tim. Tạp chí Kỹ thuật Hóa học. 2022.133511:1385-8947. NẾU: 13.273
[9] Yu H, et al. Chất xúc tác nano ba tầng với nguồn cung cấp O2 có thể kích hoạt bằng laser và tăng cường quang nhiệt để điều trị xúc tác hiệu quả chống lại khối u thiếu oxy. Vật liệu sinh học. 2022 tháng 1; 280:121308. PMID: 34896860. NẾU: 12.479
[10] Sun D, et al. Một công thức nano dựa trên cyclodextrin đạt được sự đồng vận chuyển ginsenoside Rg3 và quercetin cho liệu pháp miễn dịch hóa học trong ung thư đại trực tràng. Acta Pharm Sin B. 2022 tháng 1; 12 (1): 378-393. PMID: 35127393. NẾU: 11.614
[11] Xiong Y, et al. Các hạt nano biopolymer có thể hoạt hóa đặc hiệu khối u được ổn định bằng tiền chất tinh bột hydroxyethyl để điều trị ung thư hợp tác tự khuếch đại. Theranostics. 2022 1 tháng 1;12(2):944-962. PMID: 34976222. NẾU: 11.556
[12] Gao J, et al. "Thuyền nano" siêu phân tử nhắm vào ty thể đồng thời ức chế quá trình chuyển hóa năng lượng kép để chọn lọc khối u và hóa trị-xạ trị hiệp đồng. Theranostics. 2022 1 tháng 1;12(3):1286-1302. PMID: 35154487. NẾU: 11.556
[13] Zhong D, et al. Vi tảo quang hợp được thiết kế bằng canxi phosphat để chống lại khối u thiếu oxy bằng cách điều chỉnh tình trạng thiếu oxy tại chỗ và liệu pháp quang xạ theo tầng. Theranostics. 22 tháng 1 năm 2021;11(8):3580-3594. PMID: 33664849. NẾU: 11.556
[14] Sun J, et al. Độc tính tế bào của tro bay đốt rác thải rắn đô thị đã ổn định/đông đặc. J Hazard Mater. 2022 ngày 15 tháng 2; 424 (Phần A): 127369. doi: 10.1016/j.jhazmat.2021.127369. Epub 2021 ngày 29 tháng 9. PMID: 34879564. NẾU: 10.588
[15] Zhu C, et al. Hydrogel đa chức năng nhạy nhiệt để điều chỉnh vi môi trường trong bệnh thoái hóa khớp bằng cách phân cực đại thực bào và dọn sạch RONS. J Nanobiotechnology. Ngày 7 tháng 5 năm 2022;20(1):221. NẾU: 10.435
[16] Pan X, et al. Kẽm oxit nanoosphere để loại bỏ hydro sunfua và ferroptosis của ung thư đại tràng. J Nanobiotechnology. 27 tháng 11 năm 2021; 19 (1): 392. doi: 10.1186 / s12951-021-01069-y. PMID: 34838036; PMCID: PMC8626909. NẾU: 10.435
[17] He J, et al. Vỏ nano vàng-bạc thúc đẩy quá trình chữa lành vết thương do nhiễm trùng vi khuẩn kháng thuốc và cho phép theo dõi thông qua hình ảnh tán xạ Raman tăng cường bề mặt. Vật liệu sinh học. 2020 tháng 3; 234:119763. PMID: 31978871. NẾU: 10.317
[18] Cheng Q, et al. Nanotherapeutics can thiệp vào cân bằng oxy hóa khử của tế bào để cải thiện đáng kể liệu pháp quang động. Biomaterials. Tháng 12 năm 2019; 224:119500. doi: 10.1016/j.biomaterials.2019.119500. Epub 2019 ngày 17 tháng 9. PMID: 31557591. NẾU: 10.273
[19] Zhong D, et al. Khối α tổng hợp được kích hoạt bằng laser-Fe2O3@Au nanovật liệu tổng hợp cho chụp cộng hưởng từ và liệu pháp hiệp đồng bức xạ quang nhiệt/tăng cường. Vật liệu sinh học. Tháng 10 năm 2019; 219:119369. PMID: 31351244. NẾU: 10.273
[20] Sun C, et al. Loại bỏ selenoxide thao túng stress oxy hóa để cải thiện hiệu quả chống khối u. Biomaterials. Tháng 12 năm 2019; 225:119514. doi: 10.1016/j.biomaterials.2019.119514. Epub 24 tháng 9 năm 2019. PMID: 31569018. NẾU: 10.273
Sản phẩm được đề xuất
Tên sản phẩm | Số danh mục | Kích cỡ |
50101ES01 | 1 Bộ (1000 xét nghiệm) |