Taq DNA polymerase, với tư cách là thuốc thử enzyme cốt lõi trong chẩn đoán phân tử, đóng vai trò thiết yếu. Tuy nhiên, với sự mở rộng của các lĩnh vực ứng dụng và nhu cầu thị trường tăng lên, những hạn chế của Taq DNA polymerase kiểu hoang dã đã dần trở nên rõ ràng, chẳng hạn như hiệu quả khuếch đại thấp, tính đặc hiệu kém và độ ổn định kém.
Yeasen DNA Polymerase Hotstart E-Taq
Sự miêu tả
Hieff UNICONTM Hotstart E-Taq DNA Polymerase (Cat#10726ES) là một DNA polymerase khởi động nóng sử dụng kháng thể đơn dòng kép do công ty phát triển độc lập để đóng kép. Sản phẩm này không chỉ đóng kín hoạt động polymerase 5'→3' của Taq DNA polymerase mà còn đóng kín hoạt động exonuclease 5'→3'. Làm nóng ở nhiệt độ tiền biến tính trong 30 giây có thể vô hiệu hóa hoàn toàn các kháng thể đóng, giải phóng hoạt động của DNA polymerase và hoạt động exonuclease. Tính năng đóng kép không chỉ ngăn ngừa hiệu quả sự khuếch đại không đặc hiệu do ghép đôi sai hoặc các dimer mồi mà còn ức chế hiệu quả sự giảm tín hiệu huỳnh quang do sự thoái hóa của đầu dò, cung cấp khả năng bảo vệ kép để làm cho thuốc thử chẩn đoán in vitro ổn định hơn trong quá trình vận chuyển hoặc sử dụng ở nhiệt độ phòng. Enzym Taq này hỗ trợ sự phát triển của hệ thống trộn sẵn mồi-đầu dò và cung cấp độ nhạy, độ đặc hiệu cao hơn và khả năng khuếch đại trình tự GC cao so với các thuốc thử qPCR truyền thống.
Ưu điểm của sản phẩm
- Độ đặc hiệu cao: Có khả năng đóng gói kép, nó đồng thời ức chế hoạt động của DNA polymerase 5'-3' Taq và hoạt động của exonuclease 5'-3' ở nhiệt độ phòng, tăng cường tính đặc hiệu của phản ứng.
- Không có sự nhiễm bẩn Nuclease:Không bị nhiễm exonuclease, endonuclease và RNase.
- Phù hợp cho các thí nghiệm PCR độ nhạy cao:Thể hiện mối quan hệ tuyến tính tốt khi nồng độ mẫu dao động từ 5×10^6 bản sao/T đến 5×10^1 bản sao/T, với giới hạn phát hiện thấp nhất đạt 5 bản sao/T.
- Độ ổn định vượt trội:Khi được pha chế thành hỗn hợp hoàn chỉnh có chứa mồi và đầu dò, hỗn hợp này vẫn ổn định sau khi để ở nhiệt độ 37°C trong 14 ngày và sau 50 chu kỳ đông lạnh-rã đông.
- Tương thích với các giao thức khuếch đại nhanh: 45 chu kỳ, có kết quả trong vòng 30 phút.
Hiệu suất sản phẩm
（1)Độ nhạy tốt và phạm vi tuyến tính
Hình minh họa hỗn hợp qPCR được chuẩn bị với 10726 thể hiện tính tuyến tính tốt khi nồng độ khuôn mẫu nằm trong khoảng từ 5×10^6 bản sao/T đến 5×10^1 bản sao/T，R2=0,9997.
（2)Độ ổn định tăng tốc nhiệt tuyệt vời
Hình 3 minh họa hiệu suất ổn định của hỗn hợp qPCR master được chuẩn bị với 10726ES, sử dụng DNA plasmid ASFV làm khuôn mẫu trong các điều kiện nhiệt độ và thời gian khác nhau. Kết quả cho thấy hỗn hợp qPCR master được xây dựng với 10726ES duy trì hiệu suất ổn định.
（3)Tương thích với các chương trình đạp xe nhanh
Hình minh họa hỗn hợp qPCR được chuẩn bị với 10726ES, sử dụng DNA plasmid ASFV làm khuôn mẫu, có thể khuếch đại ổn định và phát hiện nồng độ giới hạn của DNA khuôn mẫu (5 bản sao/T) theo cả hai tiêu chuẩn (80 phút) và nhanh chóng（30 phút） chương trình khuếch đại.
Khuyến nghị sản phẩm
| loại sản phẩm | tên sản phẩm | Mã sản phẩm |
| Chuỗi enzyme PCR | 10726ES | |
| 11300ES | ||
| 14455ES | ||
| 10603ES | ||
| 10125ES | ||
| Chuỗi enzyme đơn PCR siêu sạch với lượng dư thừa vật chủ cực thấp | Hieff UCF.ME Hotstart Nhạy Cảm Taq DNA Polymerase (5 U/μL) | 14314ES |
| Hifair UCF.ME V Phiên mã ngược (200 U/μL) | 14608ES | |
| UCF.ME Uracil DNA Glycosylase (UDG/UNG), không bền với nhiệt, 1 U/μL | 14466ES | |
| Trường Đại học California, BerkeleyChất ức chế RNase ở chuột ME (40 U/µL) | 14672ES | |
| Dòng monoenzyme PCR Lyo-Ready | Hieff UNICON HotStart E-Taq DNA Polymerase, không chứa Glycerol (5U/μL) | 14316ES |
| Hifair V Reverse Transcriptase, không chứa Glycerol (600 U/μL) | 11301ES | |
| Uracil DNA Glycosylase (UDG), không phân hủy nhiệt (1 U/μL, không chứa Glycerol) | 10707ES | |
| 10703ES |