Kịch bản ứng dụng sản phẩm

1. Loại bỏ axit nucleic còn sót lại trong các sản phẩm sinh học: Trong quá trình sản xuất các sản phẩm sinh học như virus, vắc-xin và protein, UltraNuclease có thể được thêm vào để phân hủy axit nucleic còn sót lại. Bước này không chỉ làm tăng sản lượng virus mà còn làm giảm đáng kể hàm lượng axit nucleic còn sót lại, do đó đảm bảo tính an toàn và hiệu quả của thuốc.
2. Giảm độ nhớt: Bằng cách phân hủy axit nucleic, độ nhớt của dịch phân hủy tế bào bị giảm, tạo điều kiện thuận lợi cho các quá trình lọc/siêu lọc trong quá trình tinh chế các hạt có nguồn gốc từ tế bào như vi-rút, vectơ AAV và thể vùi.
3. Độ phân giải và khả năng phục hồi được cải thiện: Trong phân tích ELISA, điện di hai chiều và miễn dịch, phương pháp này cải thiện độ phân giải và khả năng phục hồi.
4. Ngăn ngừa sự kết tụ tế bào: UltraNuclease có thể ngăn ngừa hiệu quả sự kết tụ của các tế bào đơn nhân máu ngoại vi của con người (PBMC).

Tác động của các điều kiện phản ứng khác nhau lên hoạt động của enzim

Để khám phá các điều kiện hoạt động tối ưu cho UltraNuclease, chúng tôi đã nghiên cứu tác động của nhiều hệ thống đệm khác nhau lên hoạt động của enzyme.

Phân tích so sánh các sản phẩm cạnh tranh (từ công ty A)

Hiệu suất của UltraNuclease phù hợp với Công ty A và có thể đạt được hiệu quả thay thế.

Tiêu chuẩn kiểm tra chất lượng phù hợp với tiêu chuẩn sản xuất GMP

Các mục phát hiện	Tiêu chuẩn chất lượng	Phương pháp phát hiện
Hoạt động của enzim	250-300 đơn vị/uL	Phương pháp nền phổ quát
Hoạt động cụ thể	≥1.5×106 U/mg	Phương pháp nền phổ quát
Độ tinh khiết của protein	≥99%	TRANG SDS
Protease	Đáp ứng các yêu cầu	Phương pháp nền phổ quát
Nội độc tố vi khuẩn	Đáp ứng các yêu cầu	Phương pháp gel
Protein chủ	Tiêu cực	Phương pháp ELISA
DNA của vật chủ	Tiêu cực	phương pháp qPCR
Kiểm tra vô trùng	Sự phát triển vô trùng	Quy tắc chung 1101
Phát hiện mầm bệnh	Tiêu cực (không phát hiện)	Tham khảo phương pháp nội bộ
Xét nghiệm Mycoplasma	Tiêu cực (không phát hiện)	Tham khảo phương pháp nội bộ
Kiểm tra kim loại nặng	Đáp ứng các yêu cầu	Quy tắc chung 0821

Để phù hợp với việc sử dụng UltraNuclease, Yeasen cũng đã độc lập phát triển một bộ phát hiện cụ thể cho UltraNuclease, có thể phát hiện hiệu quả enzyme còn sót lại và giảm thiểu rủi ro. Yeasen Bộ phát hiện dư lượng UltraNuclease được phát triển dựa trên Hướng dẫn xác nhận phương pháp phân tích <9101> của Dược điển Trung Quốc năm 2020 và tuân thủ chặt chẽ các yêu cầu chính đối với thử nghiệm đa thông số (phạm vi tuyến tính, độ đặc hiệu, độ chính xác, độ nhạy, độ ổn định tăng tốc, v.v.).

Phát hiện UltraNuclease còn sót lại

Trong các bước tinh chế thông thường, UltraNuclease dễ dàng bị loại bỏ như tạp chất. Để phát hiện lượng dư cụ thể của UltraNuclease toàn năng, nó thường được sử dụng như một sản phẩm tiêu chuẩn trong ngành và một bộ ELISA phù hợp được phát triển.

UCF.ME® Siêu Nuclease Bộ xét nghiệm ELISA được phát triển độc lập bởi Yeasen áp dụng nguyên lý xét nghiệm miễn dịch liên kết enzyme sandwich kháng thể kép (sandwich ELISA), có thể phát hiện chính xác lượng UltraNuclease còn lại trong mẫu. Bộ dụng cụ ổn định về tính tuyến tính, khả năng lặp lại, tỷ lệ phục hồi và độ đặc hiệu.

Nguyên tắc của Yeasen Bộ xét nghiệm ELISA UltraNuclease (Xét nghiệm miễn dịch enzym hai vị trí)

Tính năng sản phẩm:

Tuân thủ quy định: Được xác nhận đầy đủ theo yêu cầu của quy định, có sẵn báo cáo xác nhận; Đảm bảo chất lượng: Tất cả nguyên liệu thô cho bộ dụng cụ đều được phát triển độc lập, đảm bảo kiểm soát chất lượng;

Độ nhạy cao: Giới hạn định lượng thấp tới 23.5 pg/mL;

Độ chính xác cao: Độ lặp lại trong từng lô cao và độ biến thiên giữa các lô thấp;

Tính đặc hiệu mạnh: Không có phản ứng chéo với các protein tế bào được thiết kế khác

Thông số hiệu suất:

Thông số sản phẩm	nội dung
Thời gian thử nghiệm	3,5 giờ
Nguyên lý thử nghiệm	Xét nghiệm miễn dịch enzym hai vị trí
khuếch đại tín hiệu	Hệ thống biotin-streptavidin
Bước sóng phát hiện	450nm và 630nm
Độ nhạy	23,5pg/mL
Phạm vi phát hiện	0,047~3 ng/mL
Đối tượng phát hiện	Siêu Nuclease
Công cụ áp dụng	Thiết bị phân tử: Dòng M và i
Ứng dụng	Phát hiện UltraNuclease còn sót lại trong quá trình tinh chế liệu pháp tế bào và gen và vắc-xin virus liên kết adeno tái tổ hợp

Dữ liệu sản phẩm:

Đường cong chuẩn của bộ thuốc thử:

Thí nghiệm thu hồi mẫu thực tế:

UltraNuclease được tăng đột biến trong dung dịch ly giải tế bào 5 μg/mL (HEK293, E.coli, CHO và Vero) độc lập với nồng độ tăng đột biến cuối cùng là 1,5 ng/mL. Độ chính xác trong các mẫu tế bào khác nhau cho thấy tuyệt vời hơn so với các nhà cung cấp khác.

Biểu hiện tính đặc hiệu

Kết luận: Bộ xét nghiệm có độ đặc hiệu cao, không có phản ứng chéo; so sánh từng cặp, “*” Sự khác biệt đáng kể so với mẫu âm tính; “NS” Không có sự khác biệt đáng kể so với mẫu Âm tính.

Độ chính xác:

Khả năng lặp lại:

Nồng độ ng/mL	6 ngày trùng lặp trong cùng một tấm						Giá trị CV
3	2.412	2.390	2.323	2.367	2.476	2.291	2,53%
1,5	1.780	1.883	1.884	1.908	1.876	1.883	2,19%
0,75	1.123	1.215	1.166	1.183	1.140	1.109	3,12%
0,375	0,691	0,706	0,708	0,722	0.722	0,679	2,21%
0,1875	0,449	0,462	0,453	0,460	0,447	0,433	2,13%
0,094	0,306	0,308	0,304	0,311	0,295	0,302	1,65%
0,047	0,242	0,241	0,240	0,241	0,256	0,240	2,37%
0	0,183	0,192	0,189	0,187	0,189	0,189	1,43%

Kết luận: Tiến hành thử nghiệm 6 mẫu lặp lại ở mỗi nồng độ trên đường chuẩn, tất cả các giá trị CV% đều thấp hơn 5%.

Độ chính xác trung gian:

Độ chính xác trung gian
Nồng độ mẫu	1,5 ng/mL	0,375 ng/mL	0,094 ng/mL
Nhà phân tích 1	1.388	0,382	0,079
Nhà phân tích 2	1.458	0,363	0,068
Nhà phân tích 3	1.318	0,37	0,063
Trung bình	1.388	0,372	0,07
Thẻ: SD	0,070	0,010	0,008
Giá trị CV	5,04%	2,59%	11,69%

3 nhà phân tích tiến hành thí nghiệm ELISA UCF.ME™ UltraNuclease và CV% thấp hơn 15%

Thông tin sản phẩm:

Tên sản phẩm	Sản phẩm con số	Thông số kỹ thuật sản phẩm
UCF.ME®UltraNuclease đạt chuẩn GMP (Benzonase)	20157ES25/50/60/80/90	25KU/50KU/100KU/1MU/5MU
Trường Đại học California, BerkeleyBộ xét nghiệm ELISA ME® UltraNuclease	36701ES59	96T

Các sản phẩm liên quan khác

Tên sản phẩm	Sản phẩm con số	Thông số kỹ thuật sản phẩm
Muối hoạt tính UltraNuclease đạt chuẩn GMP	20159ES25/50/60/80/90	25KU/50KU/100KU/1MU/5MU
Bộ xét nghiệm ELISA Salt Active UltraNuclease	36703ES96	96T