Kịch bản ứng dụng sản phẩm

1. Loại bỏ axit nucleic còn sót lại trong các sản phẩm sinh học: Trong quá trình sản xuất các sản phẩm sinh học như virus, vắc-xin và protein, UltraNuclease có thể được thêm vào để phân hủy axit nucleic còn sót lại. Bước này không chỉ làm tăng sản lượng virus mà còn làm giảm đáng kể hàm lượng axit nucleic còn sót lại, do đó đảm bảo tính an toàn và hiệu quả của thuốc.
2. Giảm độ nhớt: Bằng cách phân hủy axit nucleic, độ nhớt của dịch phân hủy tế bào bị giảm, tạo điều kiện thuận lợi cho các quá trình lọc/siêu lọc trong quá trình tinh chế các hạt có nguồn gốc từ tế bào như vi-rút, vectơ AAV và thể vùi.
3. Độ phân giải và khả năng phục hồi được cải thiện: Trong phân tích ELISA, điện di hai chiều và miễn dịch, phương pháp này cải thiện độ phân giải và khả năng phục hồi.
4. Ngăn ngừa sự kết tụ tế bào: UltraNuclease có thể ngăn ngừa hiệu quả sự kết tụ của các tế bào đơn nhân máu ngoại vi của con người (PBMC).

Kiểm tra hiệu suất sản phẩm

Ảnh hưởng của môi trường muối cao đến hoạt động của enzim (Na+)

Để phù hợp với việc sử dụng Salt Active UltraNuclease, Yeasen cũng đã độc lập phát triển một bộ phát hiện cụ thể cho Muối hoạt động UltraNuclease, có thể phát hiện hiệu quả các dư lượng enzyme và giảm thiểu rủi ro. Bộ xét nghiệm ELISA Salt Active UltraNuclease được phát triển và sản xuất theo hướng dẫn xác nhận phương pháp phân tích <9101> của Dược điển Trung Quốc năm 2020, tuân thủ nghiêm ngặt các yêu cầu chính đối với xét nghiệm đa thông số (phạm vi tuyến tính, độ đặc hiệu, độ chính xác, độ chính xác, độ nhạy, độ ổn định tăng tốc, v.v.).

Vì mục đích này, Yeasen Biotech đã phát triển một bộ ELISA để phát hiện Salt Active UltraNuclease. Bộ này sử dụng nguyên lý của xét nghiệm miễn dịch hấp thụ liên kết với enzyme sandwich kháng thể kép (ELISA) để phát hiện lượng dư của Salt Active UltraNuclease. Các mẫu chuẩn và mẫu thử của Salt Active UltraNuclease được thêm vào đĩa phủ enzyme được phủ trước bằng kháng thể chống Salt Active UltraNuclease (36703-A). Sau đó, kháng thể phát hiện nuclease được đánh dấu biotin pha loãng (36703-C) được thêm vào, tiếp theo là Streptavidin-HRP (SA-HRP) (36703-D). Điều này tạo thành phức hợp kháng thể + kháng nguyên + kháng thể-biotin + SA-HRP. Sau khi rửa đĩa, dung dịch cơ chất TMB (36703-H) được thêm vào để tạo màu. Dưới sự xúc tác của enzyme HRP, TMB chuyển từ không màu sang xanh lam và cuối cùng chuyển sang màu vàng dưới tác động của dung dịch dừng (36703-I). Cường độ màu vàng tỷ lệ thuận với lượng nuclease phổ quát chịu muối cao được phát hiện trong mẫu.

Quy trình thử nghiệm phát hiện Salt Active UltraNuclease còn sót lại bằng bộ xét nghiệm ELISA Salt Active UltraNuclease.

Đặc điểm của bộ xét nghiệm ELISA UltraNuclease và Salt Active UltraNuclease:

Tuân thủ quy định: Đã được xác nhận đầy đủ theo yêu cầu của quy định, có sẵn báo cáo xác nhận;

Đảm bảo chất lượng: Tất cả nguyên liệu thô cho bộ sản phẩm đều được phát triển độc lập, đảm bảo chất lượng có thể kiểm soát được;

Độ nhạy cao: Giới hạn định lượng thấp tới 23 pg/mL;

Độ chính xác cao: Độ lặp lại trong lô cao và độ biến thiên giữa các lô thấp;

Độ đặc hiệu cao: Không có phản ứng chéo với các protein tế bào được thiết kế khác

Thông số hiệu suất

Thông số sản phẩm	nội dung
Thời gian thử nghiệm	3,5 giờ
Nguyên lý thử nghiệm	Xét nghiệm miễn dịch enzym hai vị trí
khuếch đại tín hiệu	Hệ thống biotin-streptavidin
Bước sóng phát hiện	450nm và 630nm
Độ nhạy	0,024ng/mL
Phạm vi phát hiện	0.047 ng/mL~3 ng/mL
Đối tượng phát hiện	Muối hoạt động UltraNuclease
Công cụ áp dụng	Thiết bị phân tử: Dòng M và i
Ứng dụng	Phát hiện Nuclease còn sót lại trong quá trình tinh chế liệu pháp tế bào và gen và vắc-xin virus liên kết adeno tái tổ hợp

Dữ liệu sản phẩm:

Đường cong chuẩn của bộ thuốc thử:

Tính đặc hiệu

Phản ứng chéo giữa kháng thể Salt Active UltraNuclease và bảy protein trong bộ dụng cụ đã được đánh giá bằng cách sử dụng bộ dụng cụ này để phát hiện các protein được thêm vào trong bảy quy trình. Một đối chứng dương tính (PC-0,047 ng/mL) và một đối chứng âm tính (NC-0 ng/mL) đã được thiết lập.

Kết quả cho thấy protein bổ sung ở 7 quy trình gần với đối chứng âm tính (NC-0 ng/mL), nồng độ phát hiện thấp hơn giới hạn định lượng của bộ kit này (0,047 ng/mL) và không có phản ứng chéo. được quan sát.

STỷ lệ phục hồi của cá chó:

Thêm ba chuẩn nồng độ (tức là Std1 3 ng/mL, Std3 0,75 ng/mL và Std5 0,188 ng/mL) theo tỷ lệ bằng nhau vào hai mẫu do khách hàng cung cấp cho thí nghiệm phục hồi đột biến. Kết quả cho thấy tỷ lệ phục hồi đột biến đều nằm trong khoảng từ 80% đến 120%. Tỷ lệ phục hồi đột biến % = (giá trị đo được của mẫu đã thêm đột biến - giá trị đo được của mẫu chưa thêm đột biến) / giá trị lý thuyết (lượng chuẩn được thêm vào) * 100%.

Tên mẫu	Kiểm tra nồng độ Salt Active UltraNuclease（ng/mL）	Số lượng chuẩn (ng/mL)	Kết quả xét nghiệm (ng/mL)	Tỷ lệ phục hồi đột biến (%)
TS1	0,04	3	1,71	114,00%
		0,75	0,347	92,53%
		0,188	0,085	90,43%
TS2	0,08	3	1.772	118,13%
		0,75	0,405	108,00%
		0,188	0,104	110,64%

Sự chính xác

1) Khả năng lặp lại

Ba sản phẩm chuẩn Salt Active UltraNuclease có nồng độ cao, trung bình và thấp được chọn để tiến hành thí nghiệm lặp lại. Trong cùng một thí nghiệm, các mẫu của mỗi nồng độ được thử nghiệm 10 lần và CV%< 10%.

Chênh lệch trong lô
Nồng độ lý thuyết (ng/mL)	Số lần lặp lại	Trung bình (ng/mL)	Hệ số biến thiên CV (%)
1,5	10	1.444	2,97%
0,188	10	0,196	2,27%
0,047	10	0,051	2,56%

2) Độ chính xác trung gian

Các lô bộ dụng cụ khác nhau được sử dụng cho 3 thí nghiệm, mỗi thí nghiệm được thực hiện với 3 nồng độ cao, trung bình và thấp, và mỗi nồng độ được lặp lại 10 lần. Tổng cộng có 30 dữ liệu được thu thập từ mỗi điểm nồng độ và CV% của mỗi nồng độ nhỏ hơn 15%.

Chênh lệch lô hàng
Nồng độ lý thuyết (ng/mL)	Số lượng thí nghiệm	Trung bình (ng/mL)	Hệ số biến thiên CV (%)
1,5	3	1.423	5,70%
0,188	3	0,212	5,59%
0,047	3	0,059	6,82%

Thông tin sản phẩm

Tên sản phẩm	Sản phẩm con số	Thông số kỹ thuật sản phẩm
Muối hoạt tính UltraNuclease đạt chuẩn GMP	20159ES25/50/60/80/90	25KU/50KU/100KU/1MU/5MU
Bộ xét nghiệm ELISA Salt Active UltraNuclease	36703ES96	96T

Các sản phẩm liên quan khác

Tên sản phẩm	Số sản phẩm	Thông số kỹ thuật sản phẩm
UCF.ME®UltraNuclease đạt chuẩn GMP (Benzonase)	20157ES25/50/60/80/90	25KU/50KU/100KU/1MU/5MU
Bộ xét nghiệm ELISA UCF.ME® UltraNuclease	36701ES59	96T