تعد عملية نقل الخلايا إحدى التقنيات المستخدمة لإدخال الأحماض النووية الخارجية (مثل الحمض النووي، والحمض النووي الريبي المرسال، والحمض النووي الريبي المتداخل، والحمض النووي الريبي الميكروي، وما إلى ذلك) إلى الخلايا، وتلعب دورًا حاسمًا في البحث الطبي الحيوي الحديث. ومع استمرار البحث العلمي في التعمق، أصبح الطلب على مجموعة متنوعة من أنواع الخلايا متنوعًا بشكل متزايد، بدءًا من خلايا HEK293 الشائعة إلى أنواع خاصة من الخلايا السرطانية والخلايا الأولية، ولكل منها خصائصها ومتطلباتها الفريدة. وبالمثل، تتطلب الأنواع المختلفة من الأحماض النووية أيضًا استراتيجيات نقل محددة لضمان توصيل الجينات بكفاءة وأمان. لذلك، يعد اختيار كاشف النقل المناسب أمرًا ضروريًا لنجاح التجربة.
تعتبر كواشف التحويل الكيميائي أدوات لا غنى عنها في أبحاث علم الأحياء الخلوية، والتي تُدخل الأحماض النووية مثل DNA وmRNA وsiRNA وmiRNA وما إلى ذلك إلى الخلايا من خلال آليات مختلفة لتحقيق التعبير الجيني أو إسكاته أو الدراسات الوظيفية. حاليًا، تشمل كواشف التحويل الكيميائي المستخدمة بشكل شائع بشكل أساسي كواشف تحويل الليبوزوم وكواشف تحويل PEI وكواشف تحويل فوسفات الكالسيوم، ولكل منها مزاياها الفريدة وسيناريوهاتها القابلة للتطبيق.
الجدول 1: ما هي الاختلافات بين الكواشف الكيميائية المختلفة المستخدمة في النقل الجيني؟
| فئة المنتج | مبدأ | المزايا | العيوب |
| كاشف نقل الليبوزوم | 1. تحتوي كواشف نقل الليبوزوم على دهون مشحونة إيجابيا ترتبط بالأحماض النووية المشحونة سلبًا لتكوين معقدات دهنية-حمض نووي. 2. تنجذب هذه المجمعات إلى غشاء الخلية المشحونة سلبًا. 3. تقوم الخلية بتغليف المجمعات في حويصلات من خلال عملية البلعمة الخلوية. 4. يمنع تأثير "إسفنجة البروتون" للدهون في المجمعات تحمض الجسم الداخلي، مما يؤدي إلى زعزعة استقرار الغشاء وتمزقه، وإطلاق المجمعات في السيتوبلازم. 5. يمكن للأحماض النووية الصغيرة مثل siRNA، أو miRNA، أو mRNA أن تعمل في السيتوبلازم، بينما يحتاج الحمض النووي إلى دخول النواة للتعبير عنه. 6. بمجرد دخوله إلى النواة، يتم نسخ الحمض النووي إلى mRNA وترجمته إلى بروتينات، معبرًا عن الجين الغريب. | 1. توفر كواشف نقل الليبوزوم كفاءة عالية مع خطوط الخلايا المختلفة، بما في ذلك الخلايا الأولية التي يصعب نقلها. 2. فهي متعددة الاستخدامات، ومتوافقة مع كل من الخلايا الملتصقة والمعلقة، والأحماض النووية المختلفة مثل الحمض النووي، وsiRNA، وmiRNA. 3. تعمل هذه الكواشف بشكل جيد في البيئات التي تحتوي على المصل، مما يتجنب الحاجة إلى إزالة المصل وبالتالي يقلل من تلف الخلايا. | 1. يمكن أن تكون كواشف نقل الليبوزوم سامة للخلايا، وخاصة في التركيزات العالية أو على مدى فترات طويلة، مما قد يؤثر على بقاء الخلايا ووظيفتها. 2. إنها أكثر تكلفة مقارنة بالطرق التقليدية مثل نقل فوسفات الكالسيوم. 3. إن استخدامها داخل الجسم محدود بسبب تطهيرها من المصل، وتراكمها في أنسجة الرئة، وإمكانية التسبب في استجابات التهابية قوية وسمية عالية. |
| جزيرة الأمير إدوارد كاشف النقل الجيني | 1. يرتبط PEI، وهو بوليمر مشحون إيجابيا، بالحمض النووي المشحون سلبًا لتشكيل مجمعات PEI-DNA من خلال التفاعلات الكهروستاتيكية. 2. ترتبط هذه المركبات بغشاء الخلية المشحون سلبًا. 3. تقوم الخلايا بتغليف مجمعات PEI-DNA من خلال عملية البلعمة الخلوية، مكونة حويصلات داخلية. 4. يؤدي تأثير "إسفنجة البروتون" لـ PEI إلى انتفاخ الحويصلات وانفجارها في البيئة الحمضية، مما يؤدي إلى إطلاق المركبات في السيتوبلازم. 5.في السيتوبلازم، تنكسر روابط PEI-DNA، مما يسمح للحمض النووي بالدخول إلى النواة، حيث يتم نسخه وترجمته إلى بروتينات. | 1. تشكل كواشف نقل PEI مجمعات مستقرة مع الحمض النووي، مما يعزز كفاءة النقل. 2. لها سمية خلوية أقل مقارنة بالبوليمرات الكاتيونية الأخرى، مما يحافظ على حيوية الخلايا ووظيفتها. 3. توفر كواشف PEI حلاً فعالاً من حيث التكلفة، وخاصةً بالنسبة للتحولات واسعة النطاق مثل إنتاج النواقل الفيروسية. 4. تتوفر كواشف PEI بجودة GMP للإنتاج السريري والتجاري، مما يضمن الجودة والامتثال. | 1. تتمتع كواشف تحويل البروتين PEI بتنوع محدود، وتُستخدم في المقام الأول للحمض النووي وتكون أقل فعالية مع الأحماض النووية الأخرى مثل mRNA وsiRNA وmiRNA. 2. تظهر كفاءة عالية في أنواع معينة من الخلايا، مثل خلايا HEK293، لتغليف الفيروسات والتعبير عن البروتين، ولكنها تعمل بشكل ضعيف مع الخلايا التي يصعب نقلها. |
| كاشف نقل فوسفات الكالسيوم | 1. تتشكل رواسب مشتركة من الحمض النووي وفوسفات الكالسيوم في محلول HEPES مع الفوسفات، حيث ترتبط الشحنة السالبة للحمض النووي بأيونات الكالسيوم الموجبة. 2. تقوم الخلايا باحتواء هذه الرواسب المصاحبة، والتي تلتصق بسطحها، من خلال عملية البلعمة الخلوية، وهي خطوة مهمة لكفاءة النقل الجيني. 3. داخل الخلايا، تطلق الرواسب المشتركة الحمض النووي، والذي يمكن أن يؤدي إلى التعبير المؤقت أو التكامل المستقر في الجينوم. | 1. تعتبر عملية نقل فوسفات الكالسيوم فعالة من حيث التكلفة، ومناسبة للمختبرات ذات الميزانيات المحدودة. 2. من السهل القيام بذلك، ويتطلب خطوات بسيطة ومهارة تقنية بسيطة. 3. يمكن استخدامه للتعبير البروتيني المؤقت وإنشاء خطوط خلوية مستقرة. | 1. كفاءة نقل فوسفات الكالسيوم متغيرة وحساسة لعوامل مثل الرقم الهيدروجيني ونقاء الحمض النووي، مما قد يؤدي إلى فشل النقل، وخاصة مع الحمض النووي غير النقي. 2. غير مناسب لجميع أنواع الخلايا، ويستخدم بشكل أساسي لخلايا HEK293، وأقل فعالية للخلايا الأولية وبعض أنواع الخلايا الأخرى. |
تستفيد شركة Yeasen Biotech من قدراتها القوية في مجال البحث والتطوير وفريق تكنولوجيا الإنتاج، وتعمل باستمرار على تحسين تركيبات كواشف نقل الحمض النووي الريبي DNA وRNA وتحسين عمليات الإنتاج. أطلقت الشركة خط إنتاج متنوع يعتمد على الليبوزومات الكاتيونية والبوليمرات الكاتيونية لتلبية الاحتياجات الواسعة للمؤسسات البحثية والشركات في مجال كواشف النقل. تغطي هذه المنتجات تطبيقات مختلفة لكواشف النقل ولها المزايا التالية:
تطبيق واسع النطاق: قادرة على تحويل الحمض النووي البلازميدي، وsiRNA، وmiRNA، وmRNA بكفاءة.
كفاءة نقل عالية: تتجاوز كفاءة نقل الخلايا 90%، مما يلبي احتياجات النقل المشترك للعديد من البلازميدات.
تم التحقق من ذلك عبر خطوط خلايا متعددة: أثبت كفاءة جيدة في النقل الجيني في أكثر من 40 سلالة خلوية مختلفة.
مجموعة واسعة من التطبيقات: يستخدم لبناء خط خلية مستقر، والتعبير البروتيني المؤقت، والتغليف الفيروسي لـ AAV وLV.
ارتفاع معدل الاستشهاد في الأدبيات: تم الاستشهاد به في أكثر من 400 منشور عالي التأثير، مع عامل تأثير إجمالي يتجاوز 3000+.
كيفية اختيار كاشف التحويل الذي يناسب احتياجاتك
نظرًا للمتطلبات الخاصة لكفاءة النقل والظروف في أنواع الخلايا المختلفة والأحماض النووية (مثل DNA، mRNA، siRNA، وما إلى ذلك)، فإن اختيار كاشف النقل المناسب أمر بالغ الأهمية لنجاح التجربة.بناءً على الاحتياجات المحددة للتجربة، اختر كاشف التحويل الذي يمكنه تحسين كفاءة التحويل وتقليل السمية الخلوية لضمان دقة البيانات التجريبية ومتانة النتائج التجريبية. تقدم YEASEN Biotech مجموعة من المنتجات المحسّنة لسيناريوهات التطبيق المختلفة، مما يضمن لك إمكانية العثور على كاشف التحويل الأكثر ملاءمة لأغراض البحث الخاصة بك وتلبية احتياجاتك التجريبية المحددة.
عرض الحالة
في نظام صفيحة مكون من 6 آبار، تم تحويل البلازميدات المعبرة عن GFP إلى خلايا HEK293 باستخدام كاشف التحويل YEASEN 40802ES وكاشف التحويل الخاص بمنافس. تمت ملاحظة تعبير GFP في الخلايا المحولة تحت المجهر بعد 48 ساعة من التحويل. كان أداء كاشف التحويل الخاص بـ YEASEN متفوقًا.
في لوحة مكونة من 12 بئرًا، تم تحويل خلايا HEK293 بإجمالي 1 ميكروجرام من الحمض النووي البلازميدي؛ باستخدام 3 ميكرولتر من كاشف التحويل، كان من الممكن تحويل اثنين من البلازميدات بنجاح.
حالة العميل
تم التحقق من صحتها عبر خطوط خلايا متعددة، مع مجموعة أوسع من التطبيقات.
| الخلايا | الخلايا | الخلايا | الخلايا | الخلايا |
| 293 فهرنهايت | كاك 2 | هيك 293T | LM3 | المعهد الوطني للصحة-3T3 |
| 293T | تشو-ك1 | هيك293 | إم سي إف 10 أ | كمبيوتر رقم 12 |
| 3ت3 | كوس-7 | هيلا | إم سي إف-7 | راw264.7 |
| 5-8ف | دي اف-1 | التهاب الكبد الوبائي 3 ب | إم دي إيه-إم بي-231 | ركو |
| أ549 | ح520 | هيبا 1-6 | ميف | إس جي سي-7901 |
| بي في-2 | ح9 | التهاب الكبد G2 | إم كي إن-28 | رقم SMCC7721 |
| سي2سي12 | اتش 9 سي 2 | هيوفك | ن2أ | فيرو |
| سي6 | هاكات | عدسة X-293T | المعهد الوطني للسرطان-H1975 | اتش سي تي 116 |
| دبليو ار ال-68 | تي اتش بي-1 | إم دي سي كيه | التهاب الكبد الوبائي 2 سي | أكثر… |
قائمة المنتجات
| رقم القطة | اسم المنتج | حمض نووي | طلب |
| 40802ES | الحمض النووي | كاشف نقل الليبوزوم عالي الأداء | |
| 40804ES | LV | تعزيز قدرة العدوى الفيروسية العدسية. | |
| 40806ES | siRNA، miRNA، ASO | كواشف النقل الخاصة بـ siRNA وmiRNA ذات كفاءة إسكات عالية. | |
| 40808ES | DNA، siRNA، miRNA | كاشف نقل الليبوزوم المتطور الذي يمكنه إجراء عمليات نقل الحمض النووي DNA والحمض النووي الريبوزي RNA في أنواع مختلفة من الخلايا، مع إظهار تأثيرات جيدة على الخلايا التي يصعب نقلها. | |
| 40809ES | الرنا المرسال | كاشف انتقال خاص بـ mRNA يتمتع بكفاءة انتقال عالية في مجموعة متنوعة من أنواع الخلايا. | |
| 40815ES | الحمض النووي | قابلة للتطبيق على نطاق واسع للتعبير عن البروتين والتعبئة الفيروسية (شكل مسحوق). | |
| 40816ES | هييف ترانس®بولي إيثيلين إيمين خطي (PEI) MW40000(التحلل السريع) | الحمض النووي | |
| 40820ES | الحمض النووي | كواشف نقل مخصصة للتغليف الفيروسي، قادرة على تحقيق عائدات أعلى للتغليف الفيروسي لـ AAV وLV | |
| 40821ES | الحمض النووي | ||
| 40823ES | الحمض النووي | أعلى كفاءة في التحويل. مناسب بشكل خاص لإنتاج AAV في ثقافة التعليق، مما يعطي نتائج أعلى. |
تم الاستشهاد به في العديد من المنشورات ذات التأثير العالي، مما يضمن الجودة (قائمة جزئية للمراجع المذكورة)
- ليانغ إكس، وجونج إم، ووانج زد، وآخرون. مجمعات TubAR من LncRNA مع TUBB4A وTUBA1A لتعزيز تجميع الأنابيب الدقيقة والحفاظ على التغمييد. Cell Discov. 2024؛10(1):54. نُشر في 21 مايو 2024. doi:10.1038/s41421-024-00667-y. إذا = 33.5 (40808ES)
- وانج أ، تشين سي، مي سي، وآخرون. الاستشعار المناعي الفطري لخلل الليسوسومات يؤدي إلى اضطرابات تخزين متعددة في الليسوسومات. نات سيل بيول. 2024؛ 26(2): 219-234. doi:10.1038/s41556-023-01339-x.إذا = 21.3 (40802ES)
- Liu H, Zhen C, Xie J, et al. TFAM هو مستقبل الالتهام الذاتي الذي يحد من الالتهاب عن طريق الارتباط بالحمض النووي للميتوكوندريا السيتوبلازمية. Nat Cell Biol. 2024؛26(6):878-891. doi:10.1038/s41556-024-01419-6.إذا = 21.3 (40802ES)
- وانج دبليو دبليو، جي إس واي، تشانغ دبليو، وآخرون. تصميم قائم على البنية لمعدل مستقبلات الأبلين غير المتضخم. سيل. 2024؛ 187(6): 1460-1475.e20. doi:10.1016/j.cell.2024.02.004.إذا = 64.5 (40802ES)
- Ke J، Pan J، Lin H، وآخرون. Targeting Rab7-Rilp Mediated Microlipophagy Alleviates Lipid Toxicity in Diabetic Cardiomyopathy. Adv Sci (Weinh). نُشر على الإنترنت في 5 يونيو 2024. doi:10.1002/advs.202401676.إذا = 15.1 (40806ES)
- جيانج إل، وشي إكس، وسو إن، وآخرون. الحمض النووي الريبوزي الفلوري ذو التحول الكبير من ستوكس لتصوير الفلورة ثنائية الانبعاث والتلألؤ الحيوي في الخلايا الحية. طرق نات. 2023؛ 20(10): 1563-1572. doi:10.1038/s41592-023-01997-7.إذا=48(40802)
- لو م، هوانج د، تشو زد، وآخرون. فيروس الحمض النووي البروتيني HPV18 E7 يعادي بشكل انتقائي تنشيط المناعة الفطرية المحفز بواسطة cGAS-STING. مجلة ميد فيرول. 2023؛ 95(1):e28310. doi:10.1002/jmv.28310.إذا = 20.69(40802ES)
- Su J, Shen S, Hu Y, et al. SARS-CoV-2 ORF3a يثبط تدفق الالتهام الذاتي بوساطة cGAS-STING والوظيفة المضادة للفيروسات. J Med Virol. 2023؛ 95(1):e28175. doi:10.1002/jmv.28175.إذا=20.69(40802ES)
- لو واي واي، تشو سي واي، دينج واي اكس، وآخرون. سيفارانثين، وهو منظم لـ keap1-Nrf2، يثبط نمو سرطان المعدة من خلال الإجهاد التأكسدي ومسار استقلاب الطاقة. Cell Death Discov. 2023؛9(1):450. نُشر في 12 ديسمبر 2023. doi:10.1038/s41420-023-01752-z.إذا = 7 (40806ES)
- لي إكس، تشانغ واي، شو إل، وآخرون. أجهزة الاستشعار فائقة الحساسية تكشف عن المشهد المكاني الزمني لاستقلاب اللاكتات في الفسيولوجيا والمرض. Cell Metab. 2023؛35(1):200-211.e9. doi:10.1016/j.cmet.2022.10.002.إذا = 31.373 (40802ES)
- Li X, Zhang Y, Xu L, et al. Ultrasensitive sensors reveals the spatiotemporal landscape of lactate metabolism in physiology and disease. Cell Metab. 2023;35(1):200-211.e9. doi:10.1016/j.cmet.2022.10.002.إذا=31.373(40804ES)
- هوانج واي، موتا إي، نانفوما سي، وآخرون. يعزز CCL18 البشري المشتق من الخلايا الدبقية الصغيرة/الخلايا البلعمية تطور الورم الدبقي عبر محور CCR8-ACP5 الذي تم تحليله في نموذج شريحة بشرية. Cell Rep. 2022؛39(2):110670. doi:10.1016/j.celrep.2022.110670.إذا = 8.8 (40804ES)
- تشاي كيو، يو إس، تشونج واي، وآخرون. فوسفاتاز الفسفوليبيد البكتيري يثبط موت الخلية المبرمج لدى المضيف عن طريق اختطاف اليوبيكويتين. ساينس. 2022؛ 378 (6616): eabq0132. doi: 10.1126/science.abq0132.إذا = 63.714 (40802ES)
- Liu R، Yang J، Yao J، وآخرون. التحكم البصري الوراثي في وظيفة الحمض النووي الريبي واستقلابه باستخدام بروتينات ربط الحمض النووي الريبي القابلة للتبديل بالضوء. Nat Biotechnol. 2022؛40(5):779-786. doi:10.1038/s41587-021-01112-1.إذا = 54.908 (40802ES)
- تشن إس، تشن جي، شو إف، وآخرون. علاج الربو التحسسي الحمضي من خلال الخلايا التائية المستقبلة للمستضد الكيمري المرتبط بـ IL-5. Cell Discov. 2022؛8(1):80. نُشر في 16 أغسطس 2022. doi:10.1038/s41421-022-00433-y.إذا = 38.079 (40804ES)