طور Yeasen و molefuture الحار الحراري ، عالي الدقة T4 DNA ligase لمكافحة الربط الخاطئ

Yeasen وMolefuture يقدمان إنزيم T4 DNA Ligase المتقدم للتغلب على تحديات البيولوجيا الجزيئية

لقد طورت شركة Yeasen وشركة Molefuture بشكل مشترك رباط DNA T4 المتطور باستخدام منصة ZymeEditor الخاصة بهما، وذلك لمعالجة القضايا الرئيسية في علم الأحياء الجزيئي وبناء مكتبة DNA للتسلسل الجيني للجيل القادم (NGS). يواجه رباط DNA T4 التقليدي تحديات مثل ضعف الاستقرار وتكوين ثنائيات المحول العالية وربط شظايا DNA ذاتيًا بشكل كبير. يهدف هذا الإنزيم الجديد إلى التغلب على هذه القيود.

يتميز إنزيم T4 DNA ligase، وهو إنزيم يعتمد على ATP، بمجال ربط DNA حلزوني مضغوط (DBD)، ومجال نيوكليوتيديل ترانسفيراز (NTase)، ومجال OB-fold. من خلال تحليل بنية البروتين، حدد الباحثون بقايا رئيسية في نطاق 5 إلى 20Å من ركيزة DNA. باستخدام أدوات حسابية متقدمة، وفحص حاسوبي، وتحليل البنية والوظيفة، صمموا طفرات من خلال محاذاة تسلسل الإجماع، مع دمج رؤى بنيوية وظيفية.

بالإضافة إلى التصميم العقلاني، استخدم الفريق طريقة MTPS للتطور الموجه، حيث فحص أكثر من 10000 طفرة من أجل تحديد الاستقرار والنشاط والنشاط المتبقي. وخضع المرشحون الواعدون لتنقية واختبارات صارمة. ثم تبع ذلك توصيف مفصل، وتقييم النشاط والاستقرار وربط المحول الذاتي وربط شظايا الحمض النووي الذاتي وإنتاج الحمض النووي.

قام الباحثون بالجمع بين التصميم العقلاني للحمض النووي والطفرة الموجهة على الطفرات G1 لتطوير متغيرات استثنائية مناسبة لتطبيقات متنوعة. وقد أدى هذا النهج الشامل إلى إنتاج رباط الحمض النووي T4 عالي الكفاءة والموثوقية، وهو جاهز لتعزيز أبحاث البيولوجيا الجزيئية وبناء مكتبة الحمض النووي في الجيل التالي من التسلسل.

الشكل 1. يوضح تطور إنزيم ربط الحمض النووي Versatility T4. (أ) التصميم العقلاني (ب) فحص طفرات رباط الحمض النووي T4 المقاومة للحرارة عند 45 درجة مئوية، مما يؤدي إلى تحديد الطفرات ذات النشاط النوعي المعزز بشكل كبير. (ج) فحص طفرات رباط الحمض النووي T4 بهدف تقليل تكوين ثنائي المحول أثناء تحضير مكتبة الحمض النووي. (د) تقييم احتباس عائدات المكتبة بعد المعالجة الحرارية عند 42 درجة مئوية لمدة ساعة باستخدام طريقة تحضير مكتبة الحمض النووي.
الجدول 1. إن إنزيم Yeasen Versatile T4 DNA ligase مستقر حراريًا. تمت معالجة الإنزيم عند 30 درجة مئوية لمدة 5 أيام وتم تحليله باستخدام طريقة DNA Lib Prep.
الشكل 2. إن إنزيم ربط الحمض النووي Yeasen Versatile T4 يتمتع بدقة أعلى بالمقارنة مع رباط الحمض النووي من النوع البري (WT) T4، تم الإشارة إلى تكوين ثنائي المحول بشكل أقل بسبب الربط الذاتي الخاطئ (أ) و (ب) التي تم تحليلها بواسطة طريقة DNA Lib Prep.
الشكل 3. يظهر رباط الحمض النووي T4 من Yeasen Versatile أدنى تكوين ثنائي المحول مقارنة برباطات الحمض النووي T4 التجارية بما في ذلك الرباطات المقاومة للحرارة التي تم تحليلها بواسطة طريقة DNA Lib Prep.
ويوضح هذا الاختراق التزام Yeasen وMolefuture بالابتكار والتميز في هندسة الإنزيمات.

معلومات الطلب

اسم قطة# ملحوظات
إنزيم إنزيم Hieff™ Versatile T4 DNA Ligase (600 وحدة/ميكرولتر) 12996ES مقاومة للحرارة ودقة عالية للكشف عن جينات الورم
الحمض النووي مجموعة تحضير مكتبة الحمض النووي Hieff NGS® 13577ES طريقة الورم/الميكانيكا
مجموعة تحضير مكتبة الحمض النووي Hieff NGS® OnePot Pro الإصدار 2 12194ES طريقة الورم/الإنزيم
هييف NGS® OnePot مجموعة أدوات تحضير مكتبة الحمض النووي II لـ Illumina 13490ES الممرض/ الإنزيمي/ الوقت العادي (140 دقيقة)
مجموعة تحضير مكتبة Hieff NGS® OnePot Flash DNA 12316ES مسببات الأمراض/ الإنزيمية/ فائقة السرعة (100 دقيقة)
مجموعة الإعداد المشترك لمكتبة Hieff NGS® DNA&RNA V2 12305ES تحضير مشترك للمسببات المرضية/الإنزيمات/الحمض النووي الريبوزي DNA والحمض النووي الريبوزي RNA
الحمض النووي الريبوزي مجموعة تحضير مكتبة mRNA ثنائية الوضع Hieff NGS® Ultima 12308ES بدون خرزات مغناطيسية من نوع oligo dT، 11 أنبوبًا
مجموعة تحضير مكتبة mRNA ثنائية الوضع Hieff NGS® Ultima 12309ES خرزات مغناطيسية من نوع oligo dT plus، 14 أنبوبًا
مجموعة تحضير مكتبة RNA ثنائية الوضع Hieff NGS® Ultima 12310ES نسخة ممزوجة مسبقًا، 5 أنابيب
مجموعة تحضير مكتبة Hieff NGS ® EvoMax RNA (الإصدار المختلط مسبقًا) (أكتينوميسين د) حر) 12340ES النسخة المختلطة مسبقًا (أكتينوميسين د حر)
مجموعة استنفاد rRNA من Hieff NGS® MaxUp (نبات) 12254ES نبات
مجموعة Hieff NGS® MaxUp Human rRNA Depletion Kit (rRNA & ITS/ETS) 12257ES بشر

يرجى ترك رسالة للاستفسار عن بيانات مقارنة الأداء بين هذا الإنزيم وغيره من ربيطات الحمض النووي T4 التقليدية والمقاومة للحرارة.

نبذة عن شركة موليفيوتشر للتكنولوجيا الحيوية

شركة Molefuture Biotechnology هي شركة تابعة لشركة Yeasen شركة التكنولوجيا الحيوية (شنغهاي) المحدودة، متخصصة في توفير حلول تعديل الإنزيمات المخصصة التي تعتمد على تكنولوجيا تطور الإنزيمات. الاستفادة من موارد شركة Yeasen تعمل شركة Molefuture في مجال التكنولوجيا الحيوية على ست منصات تكنولوجية رئيسية: منصة ZymeEditor المبتكرة لتطوير الإنزيم، ومنصة التعبير عالية الكفاءة متعددة المضيفات، ومنصة تطوير عملية التخمير، ومنصة تطوير عملية التنقية، ومنصة إنتاج الإنزيم فائق النظافة، ومنصة تحليل الإنزيم ومراقبة الجودة. ومن خلال هذه المنصات التكنولوجية الست، يمكن لشركة Molefuture تقديم مجموعة كاملة من الحلول المخصصة بما في ذلك التطور الموجه بالإنزيمات، وتطوير الإنزيم الجديد، وتطوير عملية الإنزيم، والإنتاج على مستوى GMP لتلبية متطلبات تطبيق الإنزيمات في مجالات مثل التشخيص المختبري، والطب الحيوي، وعلم الأحياء الاصطناعي، والجماليات الطبية، والوسائط الصيدلانية، وما إلى ذلك.

سؤال