De nuværende retningslinjer fra WHO og US FDA anbefaler, at rest-DNA i færdige produkter ikke bør være højere end 10 ng/dosis, og US FDA påpeger også, at rest-DNA i værtsceller af biologiske produkter ikke bør være højere end 100 pg/dosis. Den europæiske farmakopés generelle principper foreskriver, at grænsen for rest-DNA i biologiske produkter ikke bør være højere end 10 ng/dosis, men rest-DNA-grænsen for individuelle vacciner er strengere, f.eks. bør rest-DNA i den inaktiverede vaccine mod hepatitis A ikke være højere end 100 pg/dosis, og at rest-DNA-grænsen i den inaktiverede vaccine mod hepatitis A ikke bør være højere end 100 pg/dosis, og at den i patitis B10-vaccinen ikke bør være højere. 2020-udgaven af den kinesiske farmakopé, del III, foreskriver, at DNA-resten i biologiske præparater produceret på en cellulær matrix ikke må overstige 100 pg/dosis, og DNA-resten i vacciner produceret på en bakterie- eller svampematrix må ikke overstige 10 ng/dosis.
Derudover giver nationale farmakopéer også vejledende anbefalinger for metoderne til bestemmelse af eksogene DNA-rester. US Pharmacopoeia 2017-udgaven af USP40-NF35 General Provision 1130 beskriver tre metoder til bestemmelse af eksogene DNA-rester, som er DNA-probehybridisering, tærskelmetode og realtids kvantitativ PCR-metode. Den europæiske farmakopé foreslår kvantitativ PCR i realtid og immunoenzymatisk metode, to følsomme analytiske metoder til kvantificering af værtscellers resterende DNA. Den kinesiske farmakopé 2020-udgave af de tre generelle regler 3407 bestemmer også, at værtscelle-DNA-restdetektionsmetoderne er DNA-probehybridisering, fluorescensfarvning og kvantitativ PCR.
Blandt dem har qPCR-metoden meget høj sensitivitet, sekvensspecificitet og nøjagtighed, som kan give et pålideligt detektionsmiddel til den biofarmaceutiske industri i procesforskning og kvalitetskontrol af færdige produkter, og er nu blevet den foretrukne detektionsmetode for hver biologisk produktproducent.
Yeasen Bioteknologi har selvstændigt udviklet 4 qPCR-kits til CHO&HEK293&Vero&E.coli, som hurtigt og effektivt kan detektere værts-DNA-rester i biofarmaceutika.
Produktegenskaber
Høj følsomhed:Den nedre grænse for detektion kan være så lav som 0,5 fg/μL.
Høj præcision: Repeterbarhed CV <10%, Mellempræcision <15%.
Strong Pproprietær:Ingen krydsreaktivitet mellem forskellige cellelinjer.
Quantitativ ENnøjagtighed: Eksklusivt prøveforberedelseskit til magnetisk perleanalyse.
Kort driftstid: Fuldfør testproces inden for 3 timer.
Produktparametre
| Produktnr. | 41332ES | 41331ES | 41307ES | 41308 |
| Produktnavn | ||||
| Produktkomponent
| CHO DNA Kontrollere CHO qPCR blande DNA Fortynding Buffer | HEK293 DNA Kontrollere HEK293 qPCR blande (UDG plus) HEK293 Primer og sonde blande DNA Fortynding Buffer | Vero DNA Kontrollere Vero qPCR blande Vero Primer og sonde blande DNA Fortynding Buffer | E. coli DNA Kontrollere E. coli qPCR blande E. coli Primer og sonde blande DNA Fortynding Buffer |
| Produktspecifikation | 100T | 100T | 100T | 100T |
| Apparat | Kvantitativ analyse af værtscelle-DNA-rester i mellem-, halv- og færdigprodukter af forskellige biologiske produkter | |||
| kvantificeringsgrænse | 0,5 fg/μL | 10fg/μL | 0,5fg/μL | 30 fg/μL |
| Forbehandlingssæt | Magnetic Bead DNA Residue Pre-treatment Kit: Manuel ekstraktion, Cat#18461ES, tilpasser sig alle restsæt | |||
| Gældende modeller | Termo: ABI 7500,- ABI QuantStudio 5；ABI StepOnePlus； Bio-Rad: CFX96 Optik modul. | |||
Arbejdsgang
Yeasen Biotechnology R&D og produktionsplatform til kvalitetskontrol assay reagenser
Produktdata
Residual DNA Detection Kit
Figur 1 Standardkurve genereret ud fra en 10-folds fortyndingsserie af CHO-standard-DNA. Resultaterne viser, at værtscellens resterende DNA-kvantificeringssæt udviser et bredt dynamisk område og høj følsomhed.
Magnetisk perlemetode prøveforbehandlingssæt
Tabel 1 DNA-gendannelse ved hjælp af MolPure® Magnetic Residual DNA Sample Preparation Kit ydeevnedata fra uafhængig valideringsundersøgelse med E.coli genomisk DNA-spids pr. prøve.
| Prøve | Koncentration | Gennemsnitlig bedring | CV |
| 300 pg/uL | 288,49 pg/uL | 96,16 % | 7,66 % |
| 150 pg/uL | 162,51 pg/uL | 108,34 % | 10,02 % |
| 10 pg/uL | 10,48 pg/uL | 104,89 % | 8,15 % |
| 5 pg/uL | 4,66 pg/uL | 93,20 % | 9,67 % |
| 60fg/uL | 56,97fg/uL | 94,95 % | 12,82 % |
| 30fg/uL | 31,76fg/uL | 104,91 % | 12,49 % |
R&D platform
Baseret på platformen for tovejs molekylært enzymdesign og rettet evolution og platformen for proteinhøjdensitetsfermentering og ultra-ren oprensning har vi oprettet R&D-platformen for nøgleråmaterialer til molekylære diagnostiske reagenser og et uafhængigt molekylært og immunoassay-produktudviklingslaboratorium, som er udstyret med avancerede F&U-instrumenter og -udstyr.
Produktionsplatforme
Konstrueret og styret i nøje overensstemmelse med ISO13485 kvalitetssystemstandarder, har vi uafhængige rene produktionsværksteder for at opfylde de kvantitative og kvalitative krav til forskellige produkter. Lag for lag har hvert trin i udgivelsen gennemgået en række strenge kvalitetsaccepter af høj standard.
Yeasen Biotechnology R&D og produktionsværksted for kvalitetskontrol assay reagenser
Produktinformation
| Beskrivelse | Rapport | Kat# |
| Validering | 41332ES | |
| Validering | 41331ES | |
| MycAway™ Mycoplasma qPCR Detection Kit (2G) | Validering | 40619ES |
| Validering | 41307ES | |
| Validering | 41308ES | |
| 18461ES |