Mykoplasmen-Erkennung, -Prävention und -Entfernung – alles in einem Schritt!

Mykoplasmen

Mykoplasmen, auch Mykoplasmen genannt, sind die kleinsten und einfachsten bisher entdeckten Prokaryoten mit einem Durchmesser von 0,1 bis 0,3 μm. Sie sind filtergängig und weisen eine hohe Pleomorphie auf. Sie können in verschiedenen Formen auftreten, z. B. kugelförmig, stäbchenförmig, filamentös und verzweigt. In Laboren und der biopharmazeutischen Produktion sind Zellkulturen anfällig für Mykoplasmenkontaminationen. Laut Literatur liegt die Häufigkeit einer Mykoplasmenkontamination in gelagerten Zelllinien bei etwa 15–35 %, in der biopharmazeutischen Industrie bei 0,44–6,70 %. ^[1].

Abbildung 1: Morphologie von Mycoplasma

Auswirkungen einer Mykoplasmen-Kontamination

Bakterien- und Pilzkontaminationen lassen sich relativ leicht erkennen, verhindern und entfernen, Mykoplasmenkontaminationen hingegen sind schwer zu erkennen. Selbst bei Wachstumsdichten von bis zu 10^7–10^9 KBE/ml sind möglicherweise keine offensichtlichen Anzeichen einer Kontamination (wie Trübung oder pH-Veränderungen) erkennbar. Mykoplasmenkontaminationen können zu verschiedenen Zellveränderungen führen (siehe Abbildung 2).

Abbildung 2: Veränderungen des Zellzustands nach Mykoplasmenkontamination

Anwendungsszenarien für den Mykoplasmennachweis

Typische Quellen einer Mykoplasmen-Kontamination

• Kreuzkontamination zwischen Zellen;
• Kontamination der Arbeitsumgebung oder der Versuchsausrüstung;
• Schlechte aseptische Technik des Experimentators;
• Kontamination von Kulturmedien oder anderen Reagenzien;
• Kontamination des ursprünglichen Gewebes oder Organs, das für die Zellpräparation verwendet wurde.

Was tun bei einer Mykoplasmen-Kontamination in Zellkulturen?

Abbildung 3: Gesamtlösung für Mykoplasmenkontamination

Drei-in-Eins-Lösung gegen Mykoplasmen-Kontamination in Zellen

1. Mykoplasmen-Nachweis

Isothermischer Mykoplasmennachweis in einem Schritt:

YeasenDas einstufige isotherme Mykoplasmen-Nachweisreagenz von nutzt eine einzigartige isotherme Verstärkungstechnologie und bietet eine stärkere Farbunterscheidung – von blau-violett (negativ) bis himmelblau (positiv) – und erleichtert so die visuelle Identifizierung. Es enthält Antikontaminationskomponenten zur Vermeidung falsch positiver Ergebnisse.

Abbildung 4: Ablauf der einstufigen Mykoplasmenerkennung

PCR-basierter Mykoplasmennachweis:

YeasenDie PCR-Mykoplasmen-Nachweismethode von unterscheidet sich von der herkömmlichen einstufigen PCR durch die Verwendung von drei Primerpaaren anstelle von einem und zielt auf die konservierten 16S- und 23S-Regionen des Mykoplasmas für die verschachtelte PCR-Amplifikation ab. Dies verbessert die Sensitivität deutlich und reduziert gleichzeitig die Unspezifität, sodass bereits eine einzige Mykoplasmenkopie nachgewiesen werden kann.

Abbildung 5: Gelelektrophorese-Bild der PCR-Amplifikation von Proben mit unterschiedlichen Mykoplasmenkonzentrationen

Abbildung 6: Gelelektrophorese-Bild der PCR-Amplifikation von Proben mit unterschiedlichen Mykoplasmenkonzentrationen

Tabelle 1: Arten von Mykoplasmen, die nachweisbar sind durch YeasenIsothermisches Mykoplasmen-Nachweisreagenz in einem Schritt

Hinweis: Der blaue Abschnitt zeigt Mykoplasmentypen an, die sowohl durch einstufige isotherme Detektion als auch durch PCR-Methoden nachweisbar sind.

2. MycAway Mycoplasma-Eliminierungsreagenz (1000×)

MycAway Mykoplasmen-Eliminationsreagenz (1000×) ist eine gemischte Formulierung, die Mykoplasmen effektiv eliminiert, indem sie die für das Mykoplasmenwachstum erforderliche DNA- und Proteinsynthese hemmt, ohne die Zellen zu schädigen. Es schützt Ihre Zellen maximal und reduziert Verluste durch Mykoplasmenkontamination.

Abbildung 7: Demonstration des Zelleliminierungseffekts

Eigenschaften des Mycoplasma-Eliminierungsreagenz:

• Geringe Toxizität: Minimale Zytotoxizität, beeinträchtigt nachfolgende Zellexperimente nicht wie Zelllebensfähigkeitstests und Transfektion;
• Hohe Stabilität: Kann über längere Zeiträume bei -20 °C gelagert werden, wobei die Wirksamkeit erhalten bleibt;
• Einfach zu verwenden: Einfach das Produkt zum mykoplasmenkontaminierten Kulturmedium geben und inkubieren;
• Schnell wirkend: Sichtbare Ergebnisse bereits nach 3 Tagen;
• Breites Spektrum: Wirksam gegen die meisten Labor-Mykoplasmenarten.

Abbildung 8: Diagramm des Zytotoxizitätstests des Mykoplasmen-Eliminierungsreagenzes

3. Mykoplasmen-Prävention

Produkt Information

Kategorie	Produktname	Kat.-Nr.	Technische Daten
Erkennung	MycAway™ -Farbiges Ein-Schritt-Mykoplasmen-Nachweiskit Hot	40612ES25/60	25/100 T
	MycAway™ Mycoplasma Echtzeit-qPCR-Erkennungskit Hot	40618ES25/60	25/100 T
	GMyc-PCR Mykoplasmen-Testkit	40601ES10/20	10/20 Tests
Entfernung	MycAway™ Spray (gebrauchsfertig)	40605ES02/03	1/2×500 ml
	MycAway™-Behandlung (1000×) – Mycoplasma-Eliminierungsreagenz	40607ES03/08	1/5×1 ml
Verhütung	MycAway™Prophylactic (2000×)-Mykoplasmen-Präventionsreagenz	40608ES03/08	1/5×1 ml
	MycGuard™ -1 Lösung (100×)	40609ES60	100 ml
	MycGuard™-2-Lösung (500×)	40610ES60	100 ml