In den letzten Jahren, mit der rasanten Entwicklung von Biopharmazeutika und dem Aufkommen von Zell- und Gentherapien sowie mRNA-Impfstoffen während der Pandemie, ist die Gewährleistung der Sicherheit und Zuverlässigkeit biologischer Produkte zu einem zentralen Schwerpunkt und einer regulatorischen Priorität für Regierungen und Aufsichtsbehörden weltweit geworden. Mykoplasmen sind eine häufige, aber oft schwer zu beseitigende Art der Kontamination. Für Bioprozesse mit Zellkulturen verlangen die Vorschriften, dass „keine Mykoplasmen-Kontamination vorliegen darf“.
Von Aufsichtsbehörden geforderte Punkte für Mykoplasmentests
2.1 Kreuzreaktivität:
Es wurde DNA aus 14 Stämmen nicht-flexibakterieller Phyla und 6 in der Biomedizin häufig verwendeten technischen Zellen ausgewählt. Keiner der Zielkanäle erreichte einen Peak und die interne Referenz amplifizierte normal.
| Test SArten | |
| Staphylococcus epidermidis | Pseudohyphen |
| Clostridium perfringens | Salmonella enterica Enteritidis subsp. enterica |
| Clostridium acetobutylicum | Bacillus subtilis (Bacillus subtilis) |
| Acinetobacter baumannii (unbewegliche Bakterien) | Bacillus cereus |
| Lactobacillus acidophilus | HEK293 |
| Enterobacter aerogenes (taxonomische Klasse von Bakterien) | Vero |
| Mikrococcus garciniae | CHO |
| Streptococcus mutans | E.coli |
| Pseudomonas aeruginosa | HEK293T |
| Streptococcus pneumoniae | Sf9 |
2.2 Einige der Daten sind wie folgt:
- DErkennung Mimit
Die Nukleinsäureextraktion und -erkennung von 10 CFU/ml Mycoplasma-Standardstämmen wurden gemäß den Anweisungen der Standardstämme und der Extraktions- und Erkennungskits durchgeführt.
Die NCS- und NTC-Proben wurden in jedem Experiment gleichzeitig getestet und die Ergebnisse von 24 Replikationsvertiefungen mit 10 CFU/ml-Proben jedes Stamms erfüllten die Anforderung, dass ≥23 der 24 Tests positiv waren, wenn die NCS- und NTC-Ergebnisse zufriedenstellend waren.
Tabelle 1 Informationen zu validierten Stämmen
| Seriennr. | Mykoplasma-Name | Konzentration der Bakterienflüssigkeit |
| 1 | Mycoplasma arginini | 10 KBE/ml |
| 2 | Mycoplasma oral | 10 KBE/ml |
| 3 | Mycoplasma gallisepticum | 10 KBE/ml |
| 4 | Mycoplasma pneumoniae | 10 KBE/ml |
| 5 | Mycoplasma synoviae | 10 KBE/ml |
| 6 | Mycoplasma fermentans | 10 KBE/ml |
| 7 | Mycoplasma hyorhinis | 10 KBE/ml |
| 8 | Achillesferse Abonnieren | 10 KBE/ml |
| 9 | Spiroplasma citri | 10 KBE/ml |
| 10 | Mycoplasma salivarium | 10 KBE/ml |
Tabelle 2 Ergebnisse der Nachweisgrenze
| 10 KBE/ml | Versuch 1 | Versuch 2 | Versuch 3 |
| Erkennungsrate | 8/8 | 8/8 | 8/8 |
| Gesamt | 24/24 | ||
Produktinformationen
| Produkt | Katalognummer | Produktname | Produktspezifikation |
| Probenvorbehandlungskit | 18461ES | 25T/100T | |
| 18467ES | MolPure® Mag48 Probenvorbereitungskit FN | 3×16T/ 6×16T | |
| Nuklear Säureextraktionsgerät | 80511ES | 48-Kanal-Automatischer Nukleinsäureextraktor | 48 Kanal |
| Mykoplasmen-Nachweiskit | 40619ES | 25T/100T |