Nukleinsäure dient als Grundlage aller molekularbiologischen Forschung. Darüber hinaus ist die Qualität der extrahierten Nukleinsäure auch einer der Schlüsselfaktoren, die über den Erfolg oder Misserfolg nachfolgender Experimente entscheiden. Bei der Entwicklung von Reagenzien zur Nukleinsäureextraktion können neben herkömmlichen chemischen Komponenten einige niedermolekulare Nukleinsäuren oder Enzyme die Extraktionseffizienz erheblich verbessern oder die Interferenz von Nichtzielsubstanzen beseitigen und zu wichtigen Komponenten bei der Nukleinsäureextraktion werden.
Über Hilfsstoffe zur Nukleinsäurefällung
Träger-RNA
- Konzept und Funktion Träger-RNA
Träger-RNA, auf Chinesisch auch als Nukleinsäurefällungshilfe bekannt. Beim Nukleinsäureextraktionsprozess bestehen die zur Extraktion verwendeten Zentrifugenröhrchen meist aus Polypropylen. An der Röhrchenwand befindet sich statische Elektrizität, die Nukleinsäuren adsorbiert. Die Verwendung von Träger-RNA im Extraktions- und Reinigungsprozess kann dazu beitragen, den elektrostatischen Effekt von Nukleinsäuren zu beseitigen, sicherzustellen, dass Nukleinsäuren gut auf der Reinigungssäule adsorbiert werden können, die Elutionseffizienz zu verbessern und so eine möglichst hohe Rückgewinnung von Nukleinsäuren in der Probe zu erreichen.
- Häufige Arten von Träger-RNA
Als Hilfssubstanz für die Nukleinsäurefällung gibt es Träger-RNA in verschiedenen Arten, beispielsweise als PolyA-Kaliumsalz, Gesamt-E. coli-RNA, Gesamt-Hefe-RNA, tRNA usw.
- Häufige Probleme bei der Verwendung von Träger-RNA
Kann Carrier-RNA nach einer gewissen Lagerung bei Raumtemperatur noch verwendet werden? Beeinträchtigt der Abbau von Carrier-RNA deren Verwendung? Beeinträchtigt Carrier-RNA nachfolgende Experimente?
Träger-RNA wird in einem RNA-Schutzmittel gelöst. Die flüssige Träger-RNA hat nur geringe Auswirkungen, wenn sie für einen kurzen Zeitraum (innerhalb von 7 Tagen) bei 37 °C oder Raumtemperatur aufbewahrt wird. Im Wesentlichen ist Träger-RNA ein Fragment im Bereich von 500 nt bis 1000 nt. Leichter Abbau beeinträchtigt die normale Verwendung nicht. Bei nachgelagerten Anwendungen wie der fluoreszierenden quantitativen PCR hat Träger-RNA keinen Einfluss auf den Ct-Wert. Bei nachgelagerten Anwendungen wie NGS kann sie je nach tatsächlichem Bedarf hinzugefügt werden.
- Produkteinführung von Träger-RNA
Produktname | Produkt Nummer | Spezifikation | Lagerbedingungen und Haltbarkeit |
Träger-RNA, 6 μg/μL | 19701ES | 1 ml / 5 ml / 100 ml | Bei einer Lagerung von -25 bis -15 °C beträgt die Haltbarkeit 2 Jahre. |
Träger-RNA-Pulver, 216 μg/Röhrchen | 19703ES | 1 Tube / 100 Tube / 1000 Tube | Bei Raumtemperatur lagern. Die Haltbarkeit beträgt 2 Jahre. |
19704ES | 1 Tube / 100 Tube / 1000 Tube | Bei Raumtemperatur lagern. Die Haltbarkeit beträgt 2 Jahre. |
Lineare Acrylamidlösung
- Konzept und Funktion der linearen Acrylamidlösung
Lineares Acrylamid, mit der englischen Bezeichnung Linear Acrylamide (Linear Polyacrylamide, abgekürzt LPA), ist ein Kopräzipitationsmittel, das beim Nukleinsäurereinigungsprozess zur Ausfällung von Nukleinsäuren beiträgt.
- Eigenschaften der linearen Acrylamidlösung
Es handelt sich um einen neutralen Träger nicht-biologischen Ursprungs. Daher enthält es keine potentielle Kontamination durch Nukleinsäure oder Nuklease.
Es beeinträchtigt die A260/A280-Messwerte nicht und hemmt die Aktivität von Polymerasen und Restriktionsendonukleasen nicht.
Es ist mit anderen nachfolgenden molekularbiologischen Anwendungen wie PCR und enzymatischer Verdauung kompatibel.
Es kann bei der Präzipitation von DNA und RNA (einschließlich Oligo) im Picogramm-Bereich oder darüber helfen. Die wiederherstellbare Fragmentlänge liegt über 20 Nukleotide und sowohl einzelsträngige als auch doppelsträngige Nukleinsäuren sind anwendbar.
- Produkteinführung
Produktname | Produkt Nummer | Spezifikation | Lagerbedingungen und Haltbarkeit |
Lineare Acrylamidlösung (5 mg/ml) | 10408ES | 1 ml | Gespeichert bei 4 °C. Haltbarkeit beträgt 3 Jahre. |
Hilfsenzym zur Nukleinsäureextraktion
RNase A
- Konzept und Funktion der RNase A
Ribonuklease A (RNase A) baut als Endoribonuklease spezifisch Cytosin- (C) oder Uracil- (U)-Reste auf einzelsträngiger RNA ab. Die häufigste Anwendung von Ribonuklease A (RNase A) ist die Entfernung von RNA während der Herstellung von Plasmid-DNA oder genomischer DNA. Darüber hinaus kann dieses Produkt auch in molekularbiologischen Experimenten wie RNase-Schutzassays und RNA-Sequenzanalysen verwendet werden.
- Eigenschaften von RNase A
RNase A wird aus Rinderpankreas gewonnen. Es gibt keine Kontamination mit Endo- und Exonuklease-Desoxyribonuklease. Es kann direkt ohne Vorwärmen verwendet werden und ist beständig gegenüber hohen Temperaturen.
- Produkteinführung
Produktname | Produkt Nummer | Spezifikation | Lagerbedingungen und Haltbarkeit |
RNase A (100 mg/ml) | 10406ES | 1 ml | Bei -20°C gelagert. Die Haltbarkeit beträgt 2 Jahre. |
RNase A (10 mg/ml) | 10405ES | 1 ml | Bei Raumtemperatur gelagert.Haltbarkeit ist 1 Jahre. |
10407ES | 100mg/1g | Bei Raumtemperatur lagern. Die Haltbarkeit beträgt 2 Jahre. |
Desoxyribonuklease I (DNase I)
Desoxyribonuklease I (DNase I), eine Endonuklease, die in verschiedenen Zellen und Geweben vorkommt, zielt auf die Phosphodiesterbindung neben Pyrimidinen und spaltet diese, wodurch Polynukleotide mit einer Phosphatgruppe am 5'-Ende und einer Hydroxylgruppe am 3'-Ende entstehen. Das durchschnittliche minimale Verdauungsprodukt ist ein Tetranukleotidpolymer. DNase kann verschiedene Formen von DNA katalysieren, wie einzelsträngige DNA, doppelsträngige DNA und sogar Chromatin (dessen Spaltungsrate von Histonen beeinflusst wird). In molekularbiologischen Experimenten wird sie häufig verwendet, um DNA aus Proteinen zu entfernen oder Einschnitte in DNA einzuführen, um markierte Basen in die DNA einzufügen.
2. Eigenschaften von DNase I
Der optimale Arbeitsbereich von DNase I liegt bei pH 7-8 und ihre Aktivität hängt von Ca ab.2+ und kann durch zweiwertige Metallionen wie Co aktiviert werden.2+, Mn2+, Zn2+, usw. 5 mM Ca2+ kann das Enzym vor Hydrolyse schützen. In Gegenwart von Mg2+kann dieses Enzym jede beliebige Stelle auf beiden DNA-Strängen erkennen und schneiden; in Gegenwart von Mn2+, kann es beide DNA-Stränge gleichzeitig erkennen und an fast derselben Stelle schneiden.
3.Produkteinführung
Produktname | Produkt Nummer | Spezifikation | Lagerbedingungen und Haltbarkeit |
Desoxyribonuklease I (DNase I) aus Rinderpankreas | 10607ES | 15 KU/10×15KU | Bei -20°C gelagert. Die Haltbarkeit beträgt 2 Jahre. |
Desoxyribonuklease I (DNase I) aus Rinderpankreas | 10608ES | 25 mg/100mg/1g | Bei -20°C gelagert. Die Haltbarkeit beträgt 2 Jahre. |
Proteinase K
1.Konzept und Funktion der Proteinase K
Proteinase K (Proteinase K) ist eine Serinprotease mit einem breiten Spektrum an Spaltungsaktivitäten. Ihr relatives Molekulargewicht beträgt etwa 29,3 kDa und sie kann die carboxylterminalen Peptidbindungen von aliphatischen Aminosäuren und aromatischen Aminosäuren spalten. Proteinase K hat ein breites Anwendungsspektrum und kann in Experimenten wie der Vorbereitung chromosomaler DNA für die Pulsfeldgelelektrophorese, Western Blotting und der Entfernung von Nukleasen in DNA- und RNA-Präparationen verwendet werden. Denaturierungsmittel wie SDS (1 %) können ihre Aktivität erhöhen.
2. Eigenschaften der Proteinase K
Abgeleitet aus einem genetisch rekombinanten Hefestamm.
Frei von RNase und DNase.
Aktiv und stabil in Harnstoff und SDS.
Aktiv in einem breiten pH-Bereich (pH 4,0 – 12,0), und der optimale pH-Bereich liegt bei pH 7,5 – 9,0.
Produktname | Produkt Nummer | Spezifikation | Lagerbedingungen und Haltbarkeit |
10401ES | 100mg/1g/5 g/100g | Bei 4°C lagern. Haltbarkeit beträgt 3 Jahre. | |
Proteinase-K-Lösung (20 mg/ml) | 10412ES | 1 ml/10 ml/25 ml/500 ml | Bei 4°C lagern. Haltbarkeit 2 Jahre. |
Proteinase K-Lösung (20 mg/ml) | 10410ES | 1 ml/10 ml/25 ml/500 ml | Bei 4°C lagern. Haltbarkeit 2 Jahre. |
RNA-Stabilisator
RNA-Stabilisatorlösung für tierische und pflanzliche Gewebe
1.Funktion der RNA-Stabilisatorlösung für tierische und pflanzliche Gewebe
RNasen sind in der Umwelt weit verbreitet und können die RNA in frisch entnommenen Proben von tierischen und pflanzlichen Geweben, Blut, Körperflüssigkeiten usw. sehr wahrscheinlich abbauen. Der RNAsafe-Gewebestabilisator für tierische und pflanzliche Gewebe (RNAsafe Tissue Stabilizer) wurde speziell zur Stabilisierung und zum Schutz der RNA in entnommenen Proben entwickelt. Als ungiftige Lösung kann er schnell in Gewebe eindringen und endogene RNasen inaktivieren.
2. Eigenschaften der RNA-Stabilisatorlösung für tierische und pflanzliche Gewebe
Extrem einfache Handhabung: Schneiden Sie einfach frisches Gewebe in Gewebeblöcke der entsprechenden Größe (≤ 0,5 cm) und tauchen Sie sie in das 5- bis 10-fache Volumen von RNAsafe.
Lange Stabilisierungsphase: Mit RNAsafe infiltrierte Gewebe/Zellen können 1 Tag bei 37 °C, 1 Woche bei Raumtemperatur, 4 Wochen bei 4 °C und zur Langzeitlagerung bei -20 °C/-80 °C gelagert werden.
Breite Downstream-Kompatibilität: Es ist mit fast allen RNA-Isolierungsmethoden kompatibel, wie etwa dem HieffTM Total RNA Extraction Reagent (Katalognummer: 10606ES60), und fast allen kommerziellen RNA-Extraktionskits, einschließlich der Zentrifugensäulenextraktionsmethode und der Magnetkügelchen-Reinigungsmethode.
Breite Anwendung der Materialien: Es kann zur Konservierung verschiedener tierischer und pflanzlicher Gewebe (wie Gehirn, Herz, Leber, Bauchspeicheldrüse, Niere, Milz, Hoden, Muskeln, Stängel und Blätter von Pflanzen usw.) und auch für Hefe, Gewebekulturzellen usw. verwendet werden.
3.Produkteinführung
Produktname | Produkt Nummer | Spezifikation | Lagerbedingungen und Haltbarkeit |
RNAsafe Gewebestabilisator RNAsafe | 10604ES60 | 100 ml | Bei Raumtemperatur gelagert. Die Haltbarkeit beträgt 5 Jahre. |
Ähnliche Produkte
Produktname | Produkt Nummer | Spezifikation | Lagerbedingungen und Haltbarkeit |
Lysozym | 10402ES | 5/50 G | Bei -20°C gelagert. Haltbarkeit 3 Jahre. |
Lyticase (10 U/μL) | 10403ES | 1500/3000/10000 Einheiten | Gespeichert bei -20°C. |
Schneckenase | 10404ES | 5/10 G | Bei 2-8°C lagern. Haltbarkeit beträgt 2 Jahre. |
RNAsafe-ICE | 10605ES | 100 ml | Bei Raumtemperatur gelagert. Haltbarkeit 2 Jahre. |