La transcriptasa inversa del virus de la leucemia murina de Moloney (M-MLV) es una de las transcriptasas inversas más utilizadas en los procedimientos de laboratorio de biología molecular. Para lograr una mayor eficiencia de transcripción inversa, una mejor estabilidad térmica y una mayor tasa de síntesis de ADNc, la transcriptasa inversa original suele modificarse genéticamente. En la actualidad, los reactivos de transcripción inversa disponibles en el mercado suelen requerir tiempos de reacción que oscilan entre 15 y 30 minutos, lo que es relativamente largo. Cuando la cantidad de muestras de reacción es grande, el tiempo total empleado puede aumentar drásticamente. Los productos de la serie de transcripción inversa de 5 minutos existentes de YESSEN pueden completar el proceso de transcripción inversa en solo 5 minutos, lo que ahorra tiempo y es muy eficiente.

PAGproducto PAGPosicionamiento	Nombre del producto	Gato#
Premezcla de transcripción inversa rápida, eficiente y de alto rendimiento	Hifair™ SuperMix de síntesis de ADNc de primera hebra AdvanceFast para qPCR	11156ES
Premezcla de transcripción inversa rápida, eficiente y de alto rendimiento (con eliminación de ADN genómico)	Hifair™ SuperMix de síntesis de ADNc de primera hebra AdvanceFast para qPCR (digestor de ADN plus)	11155ES
Premezcla para la eliminación rápida en un solo paso de ADN genómico y transcripción inversa	Hifair™ SuperMix de digestión RT-gDNA de un solo paso AdvanceFast para qPCR	11151ES
Kit de transcripción inversa rápida con selección de cebadores flexibles (con eliminación de ADN genómico)	Hifair™ Kit de síntesis de ADNc de primera hebra AdvanceFast (sin colorante)	11150ES
Kit de transcripción inversa rápida con selección de cebadores flexibles (con eliminación de ADN genómico y colorante de seguimiento)	Hifair™ Kit de síntesis de ADNc de primera cadena AdvanceFast	11149ES

Recomendación de Boutique Uno

Premezcla de transcripción inversa rápida, eficiente y de alto rendimiento (con eliminación de ADN genómico) (n.° de cat. 11155ES)

Alto rendimiento de transcripción inversa a partir de diferentes plantillas

Muestra	293T Celúla	Arabidopsis thaliana	Ratón	Hígado de pescado
11155ES	23.4↓	19.6↓	24,9↓	21.1↓
Marca A	24.9	21.3	27.5	21.3
Marca B	26.1	20.5	27.1	23.1
Marca C	25.7	19.8	27.3	21.9
Marca D	24.3	21.3	28.1	24.5

Figura. La transcripción inversa se realizó utilizando plantillas de ARN de células 293T humanas, Arabidopsis thaliana, hígado de ratón e hígado de pescado. Las marcas A, B, C y D son reactivos de transcripción inversa de digestión en dos pasos con tiempos de transcripción inversa que varían de 15 a 20 minutos. Los resultados de la prueba muestran que el kit de transcripción inversa de 5 minutos Hifair 11155ES se destaca con rendimientos más altos en comparación con otras marcas y los valores de Ct son más bajos.

Recomendación de Boutique Dos

Premezcla de transcripción inversa y digestión en un solo paso de 5 minutos (n.° de cat. 11151ES)

Alto rendimiento de transcripción inversa

Figura. Utilizando el ARN de células 293T humanas como plantilla, se probaron tres genes respectivamente. Las marcas A, B y C son reactivos de transcripción inversa y eliminación de ADN genómico en un solo paso. Los resultados de la prueba muestran que con un aporte de 1 μg y 10 ng de ARN total, el rendimiento de la transcripción inversa con el kit 11151ES es superior al de otras marcas, con valores de Ct más bajos.

Figura. Utilizando el ARN de Arabidopsis thaliana como plantilla, las marcas A, B y C son reactivos de transcripción inversa y eliminación de ADN genómico en un solo paso. Los resultados de la prueba muestran que con un aporte de 1 μg y 10 ng de ARN total, el rendimiento de la transcripción inversa con el kit 11151ES es superior al de otras marcas, con valores de Ct más bajos.

Excelente sensibilidad

Figura. Utilizando el ARN de células 293T humanas como plantilla, se amplificaron genes con un contenido de GC del 30 %, 50 %, 60 % y 70 %. Se utilizaron entradas de ARN totales de 100 pg, 1 ng, 10 ng, 100 ng y 1 μg para la transcripción inversa seguida de una detección cuantitativa fluorescente. Los resultados muestran que 11151ES puede realizar la transcripción inversa para entradas de ARN que van desde 100 pg hasta 1 μg.

Recomendación de Boutique Ttres

Kit de transcripción inversa rápida de 5 minutos (Número de catálogo 11149/11150ES)

Alta sensibilidad, con un límite de detección mínimo de hasta 10 pg

Figura. Utilizando el ARN total de las células 293T como plantilla, se realizó la transcripción inversa con 11149ES y el ADNc resultante se sometió a un análisis cuantitativo por qPCR. Los resultados muestran que 11149ES puede transcribir de forma inversa con éxito entradas de ARN que van desde 10 pg a 1 μg, lo que garantiza resultados cuantitativos precisos.

Buen rendimiento de amplificación, con la amplificación más larga de un fragmento de 14 kb

Cifra.Utilizando el ARN total de las células 293T como plantilla, se realizó la transcripción inversa con 11149ES y el ADNc resultante se sometió a detección por PCR. Los resultados indican que 11149ES es capaz de sintetizar fragmentos de ADNc de entre 1 kb y 14 kb de longitud, y que la PCR posterior tiene ciertos escenarios aplicables. Si se requiere la transcripción inversa directa de fragmentos de más de 10 kb, se recomienda extender el tiempo de transcripción inversa a 20-30 minutos para garantizar la adquisición de los fragmentos finales.

Comparación de la eficiencia de la transcripción inversa

Cantidad de entrada de ARN	Valor Ct
	11149ES	Marca A
1 μg	15.2	15.5
100 ng	18.0	18.5
10 ng	21	21.7
1 ng	24.5	25.1
100 páginas	29.1	29.7
10 páginas	32.7	34.3

Figura. Utilizando el ARN total de las células 293T como plantilla, se realizó la transcripción inversa con 11149ES y Brand A, sin que 11149ES sufriera el paso de eliminación del ADN genómico. El ADNc resultante se sometió a un análisis cuantitativo por qPCR. Los resultados muestran que el tiempo de transcripción inversa para Brand A fue de 13 minutos, mientras que para 11149ES fue de 5 minutos. El análisis cuantitativo de los diferentes productos revela que los valores de Ct para 11149ES son menores o similares a los de la marca competitiva, lo que indica que la eficiencia de transcripción inversa de 5 minutos de 11149ES es superior o aproximadamente equivalente a la de Brand A.

Cantidad de entrada de ARN	Valor Ct
	11149ES	Marca B
1 μg	16.2	17.4
100 ng	19.0	20.5
10 ng	22	23.8
1 ng	26	27.9
100 páginas	31.4	33.2
10 páginas	32.9	35.6

Cifra.Utilizando el ARN total de las células 293T como plantilla, se realizó la transcripción inversa con 11149ES y Brand B, sin que 11149ES sufriera el paso de eliminación del ADN genómico. El ADNc resultante se sometió a un análisis cuantitativo por qPCR. Los resultados muestran que el tiempo de transcripción inversa para Brand B fue de 20 minutos, mientras que para 11149ES fue de 5 minutos. El análisis cuantitativo de diferentes cantidades de sustrato revela que los valores de Ct para 11149ES son menores o similares a los de Brand B, lo que indica que la eficiencia de transcripción inversa de 5 minutos de 11149ES es superior o aproximadamente equivalente a la de Brand B.

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