ترانسفکشن سلولی تکنیکی برای معرفی اسیدهای نوکلئیک اگزوژن (مانند DNA، mRNA، siRNA، miRNA و غیره) به سلول ها است و نقش مهمی در تحقیقات زیست پزشکی مدرن ایفا می کند. همانطور که تحقیقات علمی به کاوش عمیق تر ادامه می دهد، تقاضا برای انواع مختلف سلول نیز به طور فزاینده ای متنوع شده است، از سلول های معمولی HEK293 تا انواع خاصی از سلول های تومور و سلول های اولیه، که هر کدام دارای ویژگی ها و الزامات منحصر به فرد خود هستند. به طور مشابه، انواع مختلف اسیدهای نوکلئیک نیز به استراتژی‌های ترانسفکشن خاصی برای اطمینان از تحویل ژن کارآمد و ایمن نیاز دارند. بنابراین، انتخاب معرف ترانسفکشن مناسب برای موفقیت آزمایش ضروری است.

معرف‌های انتقال شیمیایی ابزارهای ضروری در تحقیقات زیست‌شناسی سلولی هستند که اسیدهای نوکلئیک مانند DNA، mRNA، siRNA، miRNA و غیره را از طریق مکانیسم‌های مختلف برای دستیابی به بیان ژن، خاموش کردن یا مطالعات عملکردی وارد سلول‌ها می‌کنند. در حال حاضر، معرف‌های ترانسفکشن شیمیایی رایج عمدتاً شامل معرف‌های ترانسفکشن لیپوزوم، معرف‌های ترانسفکشن PEI و معرف‌های ترانسفکشن فسفات کلسیم هستند که هر کدام دارای مزایای منحصر به فرد و سناریوهای قابل اجرا هستند.

جدول 1: چه تفاوت هایی بین معرف های انتقال شیمیایی مختلف وجود دارد

دسته بندی محصولات

اصل

مزایا

معایب

معرف ترانسفکشن لیپوزوم

1. معرفهای ترانسفکشن لیپوزوم دارای لیپیدهای با بار مثبت هستند که به اسیدهای نوکلئیک با بار منفی متصل می شوند و کمپلکس های لیپید-نوکلئیک اسید را تشکیل می دهند.

2. این کمپلکس ها به سمت غشای سلولی با بار منفی جذب می شوند.

3. سلول از طریق اندوسیتوز، کمپلکس ها را به درون اندوزوم ها فرو می برد.

4. اثر "اسفنج پروتون" لیپیدها در کمپلکس ها از اسیدی شدن آندوزوم جلوگیری می کند و منجر به بی ثباتی و پارگی غشاء می شود و کمپلکس ها را در سیتوپلاسم آزاد می کند.

5. اسیدهای نوکلئیک کوچک مانند siRNA، miRNA یا mRNA می توانند در سیتوپلاسم کار کنند، در حالی که DNA برای بیان باید وارد هسته شود.

6. DNA به محض ورود به هسته به mRNA رونویسی شده و به پروتئین ترجمه می شود و ژن خارجی را بیان می کند.

1. معرف های ترانسفکشن لیپوزوم با رده های سلولی مختلف، از جمله سلول های اولیه سخت ترانسفکشن، کارایی بالایی ارائه می دهند.

2. آنها همه کاره هستند، هم با سلول های چسبنده و هم با سلول های معلق و اسیدهای نوکلئیک مختلف مانند DNA، siRNA و miRNA سازگار هستند.

3. این معرف ها در محیط های حاوی سرم به خوبی عمل می کنند و از نیاز به حذف سرم جلوگیری می کنند و در نتیجه آسیب سلولی را به حداقل می رسانند.

1. معرف های ترانسفکشن لیپوزوم می توانند برای سلول ها سمی باشند، به ویژه در غلظت های بالا یا در دوره های طولانی، که به طور بالقوه بر بقا و عملکرد سلول تأثیر می گذارد.

2. در مقایسه با روش های سنتی مانند ترانسفکشن فسفات کلسیم گران تر هستند.

3. کاربرد آنها در داخل بدن به دلیل کلیرانس سرمی، تجمع در بافت ریه و پتانسیل ایجاد پاسخ های التهابی قوی و سمیت بالا محدود است.

PEI معرف ترانسفکشن

1. PEI، یک پلیمر با بار مثبت، به DNA با بار منفی متصل می شود تا از طریق برهمکنش های الکترواستاتیک، کمپلکس های PEI-DNA را تشکیل دهد.

2. این کمپلکس ها به غشای سلولی با بار منفی متصل می شوند.

3. سلول ها کمپلکس های PEI-DNA را از طریق اندوسیتوز می گیرند و اندوزوم ها را تشکیل می دهند.

4. اثر "اسفنج پروتون" PEI باعث تورم و ترکیدن اندوزوم ها در محیط اسیدی می شود و کمپلکس ها را در سیتوپلاسم آزاد می کند.

5.در سیتوپلاسم، پیوندهای PEI-DNA شکسته می شود و به DNA اجازه می دهد تا وارد هسته شود، جایی که رونویسی و به پروتئین ترجمه می شود.

1. معرف های ترانسفکشن PEI کمپلکس های پایداری را با DNA تشکیل می دهند و کارایی ترانسفکشن را افزایش می دهند.

2. در مقایسه با سایر پلیمرهای کاتیونی سمیت سلولی کمتری دارند و باعث حفظ حیات و عملکرد سلول می شوند.

3. معرف های PEI یک راه حل مقرون به صرفه، به ویژه برای ترانسفکشن های در مقیاس بزرگ مانند تولید ناقل ویروسی ارائه می دهند.

4. معرف های PEI در درجه GMP برای تولید بالینی و تجاری در دسترس هستند و کیفیت و انطباق را تضمین می کنند.

1. معرف‌های ترانسفکشن PEI تطبیق پذیری محدودی دارند، عمدتاً برای DNA استفاده می‌شوند و با سایر اسیدهای نوکلئیک مانند mRNA، siRNA و miRNA کمتر مؤثر هستند.

2. آنها کارایی بالایی در انواع سلول های خاص مانند سلول های HEK293 برای بسته بندی ویروس و بیان پروتئین نشان می دهند، اما عملکرد ضعیفی در سلول هایی دارند که انتقال آنها دشوار است.

معرف ترانسفکشن فسفات کلسیم

1. رسوب مشترک DNA/فسفات کلسیم در بافر HEPES با فسفات تشکیل می شود، جایی که بار منفی DNA به یون های کلسیم مثبت متصل می شود.

2. سلول‌ها این رسوبات مشترک را که به سطح خود می‌چسبند، از طریق اندوسیتوز، که گامی حیاتی برای کارایی ترانسفکشن است، می‌بلعد.

3. در داخل سلول ها، رسوب های مشترک DNA آزاد می کنند که می تواند منجر به بیان گذرا یا ادغام پایدار در ژنوم شود.

1. ترانسفکشن فسفات کلسیم مقرون به صرفه است و برای آزمایشگاه هایی با بودجه محدود مناسب است.

2. اجرای آن آسان است و به مراحل ساده و حداقل مهارت فنی نیاز دارد.

3. می توان از آن برای بیان پروتئین گذرا و ایجاد خطوط سلولی پایدار استفاده کرد.

1. راندمان انتقال فسفات کلسیم متغیر و حساس به عواملی مانند pH و خلوص DNA است که می تواند منجر به ترانسفکشن ناموفق، به ویژه با DNA ناخالص شود.

2. برای همه انواع سلولی مناسب نیست، عمدتاً برای سلول های HEK293 استفاده می شود، و برای سلول های اولیه و برخی از انواع سلول های دیگر موثر نیست.

Yeasen Biotech با استفاده از توانایی های R&D قوی خود و تیم فناوری تولید، به طور مداوم فرمولاسیون معرف های انتقال DNA و RNA را بهینه می کند و فرآیندهای تولید را بهبود می بخشد. این شرکت خط تولید متنوعی را بر اساس لیپوزوم های کاتیونی و پلیمرهای کاتیونی راه اندازی کرده است تا نیازهای گسترده موسسات تحقیقاتی و شرکت ها در زمینه معرف های ترانسفکشن را برآورده کند. این محصولات کاربردهای مختلفی از معرف های ترانسفکشن را پوشش می دهند و دارای مزایای زیر هستند:

کاربرد گسترده: قادر به انتقال موثر DNA پلاسمید، siRNA، miRNA و mRNA است.

راندمان انتقال بالا: راندمان ترانسفکشن سلولی بیش از 90 درصد است، نیاز به انتقال همزمان پلاسمیدهای متعدد را برآورده می کند.

تأیید شده در میان خطوط سلولی چندگانه: راندمان انتقال خوب در بیش از 40 رده سلولی مختلف نشان داده شده است.

طیف وسیعی از کاربردها: برای ساخت خط سلولی پایدار، بیان پروتئین گذرا و بسته بندی ویروسی AAV و LV استفاده می شود.

فراوانی استناد در ادبیات: ذکر شده در بیش از 400 نشریه پر تاثیر، با ضریب تاثیر کل بیش از 3000.

نحوه انتخاب یک معرف ترانسفکشن متناسب با نیاز شما

با توجه به الزامات ویژه برای کارایی ترانسفکشن و شرایط در انواع مختلف سلول و اسیدهای نوکلئیک (مانند DNA، mRNA، siRNA و غیره)، انتخاب معرف ترانسفکشن مناسب برای موفقیت آزمایش بسیار مهم است.بر اساس نیازهای خاص آزمایش، یک معرف ترانسفکشن انتخاب کنید که بتواند کارایی ترانسفکشن را بهینه کند و سمیت سلولی را به حداقل برساند تا از صحت داده های تجربی و استحکام نتایج تجربی اطمینان حاصل شود. YEASEN Biotech طیف وسیعی از محصولات بهینه‌سازی شده برای سناریوهای کاربردی مختلف را ارائه می‌دهد و تضمین می‌کند که می‌توانید مناسب‌ترین معرف ترانسفکشن را برای اهداف تحقیقاتی خود بیابید و نیازهای آزمایشی خاص خود را برآورده کنید.

ارائه پرونده

در یک سیستم صفحه 6 چاهی، پلاسمیدهای بیان کننده GFP با استفاده از معرف ترانسفکشن YEASEN 40802ES و یک معرف ترانسفکشن رقیب به سلول های HEK293 ترانسفکت شدند. بیان GFP در سلول های ترانسفکت شده زیر میکروسکوپ 48 ساعت پس از ترانسفکشن مشاهده شد. عملکرد معرف ترانسفکشن YEASEN برتر بود.

در یک صفحه 12 چاهی، سلول های HEK293 با مجموع 1 میکروگرم DNA پلاسمید ترانسفکت شدند. با استفاده از 3 میکرولیتر از معرف ترانسفکشن، می توان با موفقیت دو پلاسمید را با هم ترانسفکشن کرد.

پرونده مشتری

اعتبار در خطوط سلولی متعدد، با طیف وسیع تری از کاربردها.

سلول ها	سلول ها	سلول ها	سلول ها	سلول ها
293F	Caco2	HEK 293T	LM3	NIH-3T3
293T	CHO-K1	HEK293	MCF10A	PC12
3t3	COS-7	HeLa	MCF-7	Raw264.7
5-8F	DF-1	هپ 3 بی	MDA-MB-231	RKO
A549	H520	Hepa1-6	MEF	SGC-7901
BV-2	H9	HepG2	MKN-28	SMCC7721
C2C12	H9c2	HUVEC	N2A	ورو
C6	HaCaT	لنتی X-293T	NCI-H1975	HCT116
WRL-68	THP-1	MDCK	Hep2C	بیشتر…

لیست محصولات

شماره گربه	نام محصول	اسید نوکلئیک	برنامه
40802ES	معرف ترانسفکشن لیپوزومی Hieff Trans®	DNA	معرف ترانسفکشن لیپوزوم با کارایی بالا
40804ES	Hieff Trans®Polybrene (هگزادیمترین بروماید) (10 میلی گرم در میلی لیتر)	LV	افزایش قابلیت عفونت عدسی ویروسی
40806ES	معرف انتقال in vitro siRNA/miRNA Hieff Trans®	siRNA، miRNA، ASO	معرف‌های ترانسفکشن اختصاصی siRNA و miRNA با راندمان شکست بالا.
40808ES	معرف ترانسفکشن جهانی Hieff Trans®	DNA، siRNA، miRNA	معرف ترانسفکشن لیپوزوم ارتقا یافته که می تواند ترانسفکشن های DNA و RNA را در انواع مختلف سلول انجام دهد و هنوز هم اثرات خوبی بر روی سلول های ترانسفکشن دشوار نشان می دهد.
40809ES	معرف انتقال mRNA Hieff Trans®	mRNA	معرف ترانسفکشن اختصاصی mRNA با راندمان انتقال بالا در انواع مختلف سلول.
40815ES	Hieff Trans®Polyethylenimine Linear (PEI) MW25000	DNA	به طور گسترده برای بیان پروتئین و بسته بندی ویروسی (شکل پودر) قابل استفاده است.
40816ES	Hieff Trans®Polyethylenimine Linear (PEI) MW40000(لیز سریع)	DNA
40820ES	معرف ترانسفکشن PEI	DNA	معرف های انتقال اختصاصی برای بسته بندی ویروسی، قادر به دستیابی به بازده بالاتر برای بسته بندی ویروسی AAV و LV
40821ES	معرف انتقال PEI -GMP	DNA
40823ES	معرف ترانسفکشن Ultra PEI-AAV	DNA	بالاترین راندمان انتقال مخصوصاً برای تولید AAV در کشت سوسپانسیون مناسب است که خروجی های بالاتری را به همراه دارد.

ذکر شده در چندین نشریه با تاثیر بالا، تضمین کیفیت (فهرست جزئی از مراجع ذکر شده)

لیانگ ایکس، گونگ ام، وانگ زی، و همکاران. کمپلکس LncRNA TubAR با TUBB4A و TUBA1A برای ترویج مونتاژ میکروتوبول و حفظ میلیناسیون. Cell Discov. 2024؛ 10 (1): 54. منتشر شده در 21 مه 2024. doi:10.1038/s41421-024-00667-y. IF=33.5 (40808ES)
وانگ آ، چن سی، می سی، و همکاران. حس ایمنی ذاتی اختلال عملکرد لیزوزومی باعث ایجاد اختلالات متعدد ذخیره سازی لیزوزومی می شود. Nat Cell Biol. 2024؛ 26 (2): 219-234. doi:10.1038/s41556-023-01339-x.IF=21.3 (40802ES)
لیو اچ، ژن سی، زی جی، و همکاران. TFAM یک گیرنده اتوفاژی است که با اتصال به DNA میتوکندری سیتوپلاسمی، التهاب را محدود می کند. Nat Cell Biol. 2024؛ 26 (6): 878-891. doi:10.1038/s41556-024-01419-6.IF=21.3 (40802ES)
Wang WW، Ji SY، Zhang W، و همکاران. طراحی مبتنی بر ساختار تعدیل کننده گیرنده آپلین غیر هیپرتروفیک. سلول 2024؛ 187 (6): 1460-1475.e20. doi:10.1016/j.cell.2024.02.004.IF=64.5 (40802ES)
Ke J، Pan J، Lin H، و همکاران. هدف قرار دادن میکرولیپوفاژی با واسطه Rab7-Rilp، سمیت لیپیدی را در کاردیومیوپاتی دیابتی کاهش می دهد. Adv Sci (Weinh). منتشر شده آنلاین 5 ژوئن 2024. doi:10.1002/advs.202401676.IF=15.1 (40806ES)
جیانگ L، Xie X، Su N، و همکاران. استوکس های بزرگ RNA های فلورسنت را برای تصویربرداری فلورسانس و بیولومینسانس با انتشار دوگانه در سلول های زنده جابجا می کنند. روش‌های Nat 2023؛ 20 (10): 1563-1572. doi: 10.1038/s41592-023-01997-7.IF=48(40802)
لو ام، هوانگ دی، ژو زی، و همکاران. انکوپروتئین HPV18 E7 ویروس DNA به طور انتخابی با فعال سازی ایمنی ذاتی ناشی از cGAS-STING مخالفت می کند. جی مد ویرول. 2023؛ 95 (1): e28310. doi:10.1002/jmv.28310.IF=20.69(40802ES)
Su J، Shen S، Hu Y، و همکاران. SARS-CoV-2 ORF3a شار اتوفاژی با واسطه cGAS-STING و عملکرد ضد ویروسی را مهار می کند. جی مد ویرول. 2023؛ 95 (1): e28175. doi:10.1002/jmv.28175IF=20.69(40802ES)
Lu YY، Zhu CY، Ding YX، و همکاران. سفارانتین، تنظیم کننده keap1-Nrf2، رشد سرطان معده را از طریق استرس اکسیداتیو و مسیر متابولیسم انرژی مهار می کند. کشف مرگ سلولی. 2023؛ 9 (1): 450. منتشر شده در 12 دسامبر 2023. doi:10.1038/s41420-023-01752-z.IF=7(40806ES)
Li X، Zhang Y، Xu L، و همکاران. حسگرهای فوق حساس، چشم انداز مکانی و زمانی متابولیسم لاکتات را در فیزیولوژی و بیماری نشان می دهند. سلول متاب. 2023؛ 35 (1): 200-211.e9. doi:10.1016/j.cmet.2022.10.002.IF=31.373(40802ES)
Li X، Zhang Y، Xu L، و همکاران. حسگرهای فوق حساس، چشم انداز مکانی و زمانی متابولیسم لاکتات را در فیزیولوژی و بیماری نشان می دهند. سلول متاب. 2023؛ 35 (1): 200-211.e9. doi:10.1016/j.cmet.2022.10.002IF=31.373(40804ES)
Huang Y، Motta E، Nanvuma C، و همکاران. CCL18 انسانی مشتق از میکروگلیا/ماکروفاژ پیشرفت گلیوم را از طریق محور CCR8-ACP5 که در مدل برش انسانی آنالیز شده است، ترویج می‌کند. Cell Rep. 2022; 39(2):110670. doi:10.1016/j.celrep.2022.110670.IF=8.8 (40804ES)
Chai Q، Yu S، Zhong Y، و همکاران. یک فسفولیپید فسفاتاز باکتریایی با ربودن یوبیکوئیتین، پیروپتوز میزبان را مهار می کند. علم. 2022;378(6616):eabq0132. doi:10.1126/science.abq0132.IF=63.714(40802ES)
لیو آر، یانگ جی، یائو جی، و همکاران. کنترل اپتوژنتیک عملکرد و متابولیسم RNA با استفاده از پروتئین های مهندسی شده با قابلیت تعویض نور RNA Nat Biotechnol. 2022؛ 40 (5): 779-786. doi:10.1038/s41587-021-01112-1.IF=54.908(40802ES)
چن اس، چن جی، زو اف، و همکاران. درمان آسم ائوزینوفیلیک آلرژیک از طریق سلول‌های T گیرنده آنتی‌ژن کایمریک مهندسی‌شده با IL-5. Cell Discov. 2022؛ 8 (1): 80. منتشر شده در 16 اوت 2022. doi:10.1038/s41421-022-00433-y.IF=38.079(40804ES)

مقاله قبلی مقاله بعدی