Français En outre, pour les méthodes de détermination des résidus d'ADN exogène, les pharmacopées nationales donnent également des recommandations d'orientation. L'édition 2017 de la disposition générale 1130 de l'USP40-NF35 de la pharmacopée américaine décrit 3 méthodes de détermination des résidus d'ADN exogènes, à savoir l'hybridation par sonde d'ADN, la méthode du seuil et la méthode de PCR quantitative en temps réel. La Pharmacopée européenne propose la PCR quantitative en temps réel et les méthodes immunoenzymatiques, qui sont 2 méthodes analytiques sensibles pour quantifier l'ADN résiduel dans les cellules hôtes. La version 2020 de la Pharmacopée chinoise des trois règles générales 3407 stipule également que les méthodes de détection des résidus d'ADN des cellules hôtes sont l'hybridation par sonde d'ADN, la coloration par fluorescence et la PCR quantitative.

Parmi elles, la méthode qPCR présente une sensibilité, une spécificité de séquence et une précision très élevées, ce qui peut fournir un moyen de détection fiable pour l'industrie biopharmaceutique dans la recherche de processus et le contrôle qualité des produits finis, et est désormais devenue la méthode de détection préférée de chaque fabricant de produits biologiques.

Biotechnologie Yeasen Kits de détection d'ADN résiduel

En se basant sur le principe de la qPCR à sonde fluorescente, Yeasen a développé une série de kits de détection d'ADN résiduel de cellules hôtes rapides et spécialisés, notamment CHO, HEK293, E.coli, Vero, Human, MDCK, Hansenula polymorpha, Pichia pastoris, etc. Ces kits permettent une détection spécialisée et rapide des résidus d'ADN dans les produits intermédiaires, semi-finis et finis lors du développement et de la production de produits biologiques tels que les anticorps, les produits de thérapie cellulaire et génique, les médicaments à base de protéines recombinantes et les vaccins.

Fonctionnalité

Haute sensibilité : développé sur la base de la méthode qPCR par sonde fluorescente avec une LLOD aussi faible que 0.0,5 fg/µL;

Haute précision : récupérations d'échantillons de pointe dans la plage de 70 % à 130 % ;

Haute spécificité : aucune réactivité croisée avec l’ADN non pertinent, réduisant ainsi les faux positifs lors de la détection ;

Conformité à la réglementation : entièrement validé conformément aux exigences Chp, USP, ICHQ2(R1) et autres, performances conformes aux normes réglementaires chinoises et étrangères ;

Coopérer avec l’audit : la production des produits est conforme aux normes du système qualité ISO13485, avec des documents d'audit parfaits.

Garantie de qualité : les matières premières des kits sont toutes développées indépendamment, et le qPCR Mix et les autres produits enzymatiques sont fabriqués dans une usine d'enzymes ultra-propre.

Application

Médicaments à base d'anticorpsDétection des impuretés résiduelles dans les cellules hôtes
VaccinsDétection des impuretés résiduelles dans les cellules hôtes
Médicaments à base de protéines recombinantesDétection des impuretés résiduelles dans les cellules hôtes

Médicaments pour thérapie génique cellulaire Détection des impuretés résiduelles dans les cellules hôtes

3. Détecter l'ADN de CHO (3G) à des concentrations de 0,3 fg/μL et moins à la limite de quantification (LOQ) de 20 réplicats par concentration. Les résultats ont montré que le taux de détection de 20 puits répliqués à des concentrations de 0,05 fg/μL et plus était ≥ 19 (c'est-à-dire que le taux de détection était ≥ 95 %), c'est-à-dire que la limite de détection du kit de détection des résidus d'ADN de cellules hôtes CHO (3G) pouvait atteindre 0,05 fg/μL.

Figure 3. Résultats du test qPCR 0,05fg/μL d'ADN CHO (3G)

Haute spécificité : aucune réactivité croisée avec l’ADN d’autres cellules hôtes.

En évaluant l'interférence de l'ADN génomique des espèces de souris ayant une forte affinité pour l'ADN CHO (3G) ainsi que l'ADN génomique des cellules couramment utilisées dans la production de produits biologiques avec le réactif de détection de l'ADN CHO, les courbes d'amplification du groupe d'interférence et du groupe témoin se sont chevauchées et aucune interférence n'a été observée (les graphiques suivants montrent, dans l'ordre, les données d'interférence de l'ADN génomique de la souris, de HEK293 et ​​d'E.coli avec le réactif de détection de l'ADN CHO).

Figure. 4.Résultats des expériences d'interférence avec le kit CHO DNA (3G)

Informations sur le produit

Catégorisation	Numéro d'article	Nom du produit	Spécification
Prétraitement d'échantillons	18461ES	Kit de préparation d'échantillons d'ADN résiduel magnétique MolPure®	25T/100T
	18467ES	Kit de préparation d'échantillons MolPure® Mag48 FN	3×16T/6×16T
Instrument d'extraction d'acide nucléique	80511ES	Extracteur d'acide nucléique automatisé à 48 canaux	48 Flux
Détection d'ADN résiduel	41307ES	Kit de détection de résidus d'ADN de cellules hôtes Vero (2G)	50T/100T
	41308ES	Kit de détection des résidus d'ADN des cellules hôtes d'E.coli (2G)	50T/100T
	41310ES	Kit de détection d'ADN résiduel SV40LTA&E1A	50T/100T
	41317ES	Kit de détection des résidus d'ADN des cellules hôtes de Hansenula polymorpha	50T/100T
	41319ES	Kit de détection des résidus d'ADN des cellules hôtes MDCK	50T/100T
	41323ES	Kit de détection de résidus d'ADN plasmidique	50T/100T
	41324ES	Kit de détection des résidus d'ADN des cellules hôtes de S. cerevisiae	50T/100T
	41325ES	Kit de détection de résidus d'ADN de cellules hôtes humaines	50T/100T
	41328ES	Kit de détection des résidus d'ADN des cellules hôtes de Pichia pastoris	50T/100T
	41330ES	Kit de détection des résidus d'ADN de Sf9 et de Baculovirus	50T/100T
	41331ES	Kit de détection des résidus d'ADN des cellules hôtes HEK293 (3G)	50T/100T
	41332ES	Kit de détection des résidus d'ADN des cellules hôtes CHO (3G)	50T/100T