स्ट्रैंड-विशिष्ट आरएनए लाइब्रेरी की तैयारी में एक उल्लेखनीय सफलता

क्या आपको कभी RNA लाइब्रेरी बनाते समय संदेह का सामना करना पड़ा है? कुछ अभिकर्मकों की विषाक्तता और प्रकाश-मुक्त वातावरण में काम करने की आवश्यकता के बारे में चिंताएँ काफी उलझन भरी हो सकती हैं, खासकर जब कई नमूनों से निपटना हो। एक्टिनोमाइसिन डी अक्सर इन चिंताओं का स्रोत रहा है, क्योंकि यह अपनी विषाक्तता और प्रकाश संवेदनशीलता के लिए जाना जाता है। लेकिन एक्टिनोमाइसिन डी को लाइब्रेरी किट में क्यों शामिल किया जाता है?

हाल ही में हुए शोधों से पता चला है कि एक्टिनोमाइसिन डी में प्रतिलेखन को बाधित करने की क्षमता है। यह प्रतिलेखन आरंभिक परिसर में डीएनए से जुड़कर ऐसा करता है, जिससे आरएनए पॉलीमरेज़ द्वारा आरएनए श्रृंखलाओं के विस्तार को रोका जा सकता है। अनिवार्य रूप से, एक्टिनोमाइसिन डी पॉलीमरेज़ गतिविधि में हस्तक्षेप करता है, सीडीएनए संश्लेषण प्रक्रिया के दौरान दूसरे स्ट्रैंड के एक साथ संश्लेषण में बाधा डालता है। यह दो-स्ट्रैंड संश्लेषण में dTTP के बजाय dUTP के उपयोग की अनुमति देता है, जिससे RNA लाइब्रेरी निर्माण में श्रृंखला विशिष्टता में वृद्धि होती है।

आरएनए लाइब्रेरी निर्माण किट में एक्टिनोमाइसिन डी को शामिल करने से निस्संदेह स्ट्रैंड-विशिष्ट लाइब्रेरी के निर्माण में सुधार हुआ है, जिससे श्रृंखला विशिष्टता में उल्लेखनीय वृद्धि हुई है। इस नवाचार ने प्रयोगात्मक प्रक्रिया को सुव्यवस्थित किया है, जिससे शोधकर्ताओं के लिए यह सरल हो गया है। इसके अलावा, इसने श्रृंखला विशिष्टता में काफी सुधार किया है, जो आरएनए-संबंधित वैज्ञानिक जांच का एक महत्वपूर्ण पहलू है।

हालांकि, एक्टिनोमाइसिन डी की अपनी कमियां हैं: यह विषाक्तता प्रदर्शित करता है और इसे प्रकाश से सुरक्षा की आवश्यकता होती है। प्रीमिक्स और प्लेट लाइब्रेरी निर्माण किट की बढ़ती मांग के आज के परिदृश्य में, प्रकाश से बचाव की आवश्यकता प्लेट किट की प्रगति पर सीमाएं लगाती है।

सौभाग्य से, अब एक्टिनोमाइसिन डी के बारे में चिंतित होने की आवश्यकता नहीं है। येसेन ज़ाइमएडिटर प्लेटफ़ॉर्म ने एक अभूतपूर्व एमएमएलवी एंजाइम म्यूटेंट पेश किया है जो एक्टिनोमाइसिन डी के कार्य को प्रतिस्थापित करता है। यह नया किट गंधहीन, गैर विषैली और गैर विषैले हैओ से बचने की जरूरत है प्रकाश। यह बेहतर श्रृंखला विशिष्टता प्रदान करता है, स्वास्थ्य और प्रकाश संवेदनशीलता से संबंधित चिंताओं को दूर करता है।

तालिका नंबर एक: येसेन के आरएनए लिब प्रेप किट की विशिष्ट विशेषताएं

चित्र तीन। जब एक्टिनोमाइसिन डी युक्त किट को एक्टिनोमाइसिन डी रहित नई किट के साथ प्रयोग किया गया, तो 10 एनजी और 1 माइक्रोग्राम के आरएनए इनपुट पर दोनों किट के लिए पैदावार तुलनीय थी। हालांकि, 4 माइक्रोग्राम के आरएनए इनपुट पर, एक्टिनोमाइसिन डी रहित नई किट ने उच्च पैदावार प्रदर्शित की।

चित्र 4. एक्टिनोमाइसिन डी को शामिल किए बिना एमएमएलवी उत्परिवर्ती युक्त नई किट के उपयोग से, एक्टिनोमाइसिन डी को शामिल करने वाली किट की तुलना में बेहतर स्ट्रैंड विशिष्टता प्राप्त होती है। यह अंतर अधिक स्पष्ट हो जाता है, विशेष रूप से 10 एनजी के कम आरएनए इनपुट पर।

ग्राहक अनुभव को बेहतर बनाने के लिए समर्पित येसेन, आरएनए लाइब्रेरी किट के क्षेत्र में नई जमीन तोड़ना जारी रखता है।

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