Panoramica

La celenterazina è una fluoresceina naturale che è abbondante in natura ed è la molecola di accumulo di energia luminosa della maggior parte degli organismi marini luminescenti (oltre il 75%). La celenterazina può essere utilizzata come substrato per molti enzimi luciferasi, come la luciferasi del rene di mare (Rluc), la luciferasi secreta da Gaussia (Gluc) e le fotoproteine ​​tra cui aequorina e Obelia. A differenza del sistema luciferina/luciferasi della lucciola, il sistema celenterazina/luciferasi non richiede adenosina trifosfato (ATP), rendendo più facile studiare la biofluorescenza in vivo. Pertanto, la celenterazina è comunemente utilizzata come substrato luminescente per saggi di fluorescenza basati su saggi di geni reporter e saggi su animali vivi.

La principale Coelenterazina commerciale attualmente utilizzata è la Coelenterazina nativa. Esistono anche molti derivati ​​della coelenterina come Coelenterazina h, Coelenterazina 400a, Coelenterazina cp, Coelenterazina f, Coelenterazina hcp, Coelenterazina n equals sintetizzati. Teoricamente, queste coelenterine possono essere utilizzate negli stessi esperimenti, ma a causa delle loro differenze di lunghezza d'onda luminosa, permeabilità della membrana cellulare ed efficienza quantica della luce, mostrano diversi effetti sperimentali nella stessa applicazione.

Specie di Celenterazina

Celenterazina nativa

Noto anche come acido libero di Coelenterazina. È il substrato di molti enzimi luciferasi come Renilla luciferasi (Rluc) e Gaussia luciferasi (Gluc), ed è anche il cofattore della proteina luminescente di medusa.

Scenari applicativi: Rilevamento della concentrazione di ioni calcio nelle cellule viventi, analisi del rapporto genetico, studio BRET (trasferimento energetico tramite risonanza bioluminescente), rilevamento tramite ELISA, HTS e chemiluminescenza dei livelli di ROS nei tessuti o nelle cellule, ecc.

Celenterazina h

È il substrato di molti enzimi luciferasi come la luciferasi Renilla (Rluc) e la luciferasi Gaussia (Gluc), ed è anche il cofattore della proteina luminescente delle meduse.

Scenario applicativo: L'intensità luminosa è oltre 10 volte superiore a quella della Coelenterazina nativa, adatta all'analisi del gene reporter e al rilevamento della concentrazione di ioni calcio nelle cellule viventi.

Celenterazina hcp

È uno dei derivati ​​della Coelenterazina nativa. L'intensità di fluorescenza del complesso Coelenterazina hcp-Aequorina è 190 volte superiore a quella del complesso Coelenterazina nativa, con elevata resa quantica e Ca veloce²⁺ velocità di reazione, molto adatta per la rilevazione dei livelli di ioni calcio.

Scenario applicativo: Adatto per il rilevamento del livello di ioni calcio.

Celenterazina 400a

Noto anche come DeepBlue CTM, è uno dei derivati ​​della Coelenterazina nativa. È un buon substrato per la luciferasi Renilla (Rluc) e la sua lunghezza d'onda di emissione è di circa 400 nm, che interferisce poco con il segnale della proteina recettore GFP e non può essere ossidata dalla luciferasi secreta da Gaussia (Gluc).

Scenario applicativo: È il substrato di celenterazina preferito per la ricerca BRET (trasferimento di energia a risonanza bioluminescente).

Celenterazina f

È il substrato preferito per l'equorina e l'unica differenza strutturale rispetto alla Coelenterazina nativa è che il gruppo idrossilico sul suo gruppo fenolico R-1 è sostituito con fluoro (F).Rispetto al numero totale di fotoni prodotti dal complesso Coelenterazine Native-Apoaequorin, questo complesso produce solo l'80% dell'energia dei fotoni. Il vantaggio è che ci vuole pochissimo tempo per generare il complesso di equorina. Quando entra in contatto con Ca²⁺, emette luce rapidamente e con elevata resa, con un'intensità di produzione 20 volte superiore a quella della Coelenterazina nativa. Inoltre, ha una buona permeabilità cellulare.

Scenario applicativo: Quando Ca estremamente alto²⁺ Poiché è richiesta una sensibilità di rilevamento elevata per studiare gli esperimenti di rigenerazione delle proteine ​​delle meduse, si raccomanda l'uso di substrati.

Celenterazina cp

È un derivato della Coelenterazina nativa. Il complesso fotoproteico formato con la proteina Apoaequorina è 15 volte più luminoso della Coelenterazina nativa e ha una Ca più veloce²⁺ velocità di reazione.

Scenario applicativo: Può essere utilizzato per lo screening ad alto rendimento di farmaci basati sui recettori accoppiati alle proteine ​​G (GPCR).

Celenterazina n

La sua intensità di fluorescenza è più debole in tutti i derivati ​​della Celenterazina e la velocità di reazione a Ca²⁺ è significativamente inferiore a quello della Coelenterazina nativa.

Celenterazina e

Un derivato della Coelenterazina nativa che è strutturalmente un gruppo etilico in più rispetto alla Coelenterazina nativa. Come substrato per la luciferasi Renilla, la sua intensità di fluorescenza è il 137% di quella della Coelenterazina nativa. La Coelenterazina e ha un'elevata reattività in vitro della proteina luminescente delle meduse e doppi picchi di emissione (405 e 465), che consentono la determinazione di Ca²⁺ concentrazione nell'intervallo pCa5-7 tramite il rapporto delle doppie lunghezze d'onda. Questo metodo è indipendente dalla concentrazione di Celenterazina, migliorando così l'accuratezza del rilevamento. Poiché la permeabilità cellulare di questo derivato è scarsa, non ha questo vantaggio per gli esperimenti correlati intracellulari.

Scenario applicativo: Substrato molto utile per Ca²⁺ rilevamento a bassa sensibilità.

Celenterazina 2-metile

È un potente antiossidante cellulare. Può agire efficacemente sulle specie reattive dell'ossigeno intracellulare, come l'ossigeno singoletto e gli anioni superossido, e lo stress ossidativo è un collegamento intermedio nel processo di apoptosi. Inoltre, il composto ha le caratteristiche di non tossicità e permeabilità di membrana, quindi può essere utilizzato per studiare l'apoptosi.

Applicazione del prodotto:

1) Come strumento importante per studiare l'apoptosi;

2) Può essere utilizzato anche per la chemiluminescenza per rilevare i livelli di anioni superossido e perossinitrito.

Nome del prodotto	Peso molecolare	Formula molecolare	E (nm)	Codice di identificazione	Intensità relativa	Tempo di semi-ascesa (ms)**
Celenterazina nativa	423.46		466	1,00	1	6-30
Celenterazina h	407.48		466	0,75	16	6-30
Celenterazina hcp	399,48		445	0,65	500	2-5
Celenterazina cp	415,48		442	0,63	28	2-5
Celenterazina f	425,46		472	0,80	20	6-30
Celenterazina n	457,52		468	0,25	0,15	6-30
Celenterazina e	449,5		405 e 465	0,5	4	0,15-0.3
2-metil Celenterazina	331.37		/	/	/	/
Celenterazina 400 a	391,48		400	/	/	/

Informazioni sul prodotto

Nome del prodotto	Numero di catalogo	Specifiche
D-Luciferina, sale di sodio	40901ES01/02/03/08	100 mg/500 mg/1 g/5 g
D-Luciferina, Sale di Potassio	40902ES01/02/03/09	100 mg/500 mg/1 g/5 g
D-Luciferina Firefly, Acido libero	40903ES01/02/03	100 mg/500 mg/1 g
Celenterazina nativa	40904ES02/03/08	1×500 μg/2×500 μg/5mg
Celenterazina 400a	40905ES02/03	1×500 μg/2×500 μg
Celenterazina h	40906ES02/03/08	1×500 μg/2×500 μg/5mg
Celenterazina f	40908ES02/03	1×500 μg/2×500 μg

Letteratura pubblicata dagli utenti (statistiche incomplete)

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