I reagenti di trasfezione cellulare sono diventati reagenti di routine per studiare e controllare la funzione genica nelle cellule eucariotiche. I reagenti di trasfezione sono ampiamente utilizzati nella ricerca sulla funzione genica, nella regolazione dell'espressione genica e nell'analisi delle mutazioni, nonché nella terapia genica, nella terapia cellulare, nella produzione di proteine ​​e nella produzione di vaccini. Quindi, cos'è la trasfezione? E come scegliere un tipo di reagente di trasfezione in base ai propri esperimenti?

Quali sono i tipi di trasfezione?

Le caratteristiche dei reagenti di trasfezione di Yeasen

Come scegliere un tipo di reagente di trasfezione in base ai propri esperimenti?

Caso di applicazione

Riferimento per le condizioni di trasfezione

Domande frequenti

Considera la lettura

Quali sono i tipi di trasfezione?

A seconda che l'acido nucleico sia integrato nel cromosoma della cellula ospite dopo la trasfezione, è suddiviso in "transitorio" (trasfezione transitoria) e "stabile" (trasfezione stabile). L'efficienza della trasfezione, la citotossicità, gli effetti sulla fisiologia normale e i livelli di espressione genica dei diversi metodi di trasfezione sono diversi. I principi, le applicazioni e le caratteristiche sono confrontati nella seguente tabella:

Tabella 1 Confronto di diversi metodi di trasfezione

Le caratteristiche di reagenti di trasfezione di Yeasen

Per i reagenti di trasfezione del DNA e i reagenti di trasfezione dell'RNA, Yeasen Biotechnology ha un forte team di R&S e produzione, ottimizza continuamente le formule, migliora i processi di produzione e ha lanciato una varietà di prodotti basati su liposomi cationici e polimeri cationici. Gli istituti di ricerca scientifica e le aziende forniscono una gamma completa di prodotti e la linea di prodotti copre tutti i campi coinvolti nei reagenti di trasfezione.

• Elevata efficienza: adatto per la trasfezione transitoria o stabile di linee cellulari.
• Bassa tossicità: le cellule trasfettate rimangono vitali.
• Ampia adattabilità: copertura completa delle cellule comuni e delle cellule primarie difficili da trasfettare.
• Facile da usare: adatto per terreni in presenza di siero, senza cambiare il terreno prima e dopo la trasfezione.
• Conveniente: economico e pratico, elevata efficienza di trasfezione, prezzo basso.

Come scegliere un tipo di reagente di trasfezione in base ai propri esperimenti?

La selezione dei reagenti di trasfezione deve essere effettuata in base ai diversi scopi e contenuti sperimentali, come le sostanze trasfettate, le cellule specifiche, la praticità d'uso e altri fattori.

Caso di applicazione

Reagente di trasfezione liposomiale Hieff Trans™

Trasmettitore Hieff™ è fornito in forma liquida sterile. In genere, per la trasfezione di piastre a 24 pozzetti, circa 1,5 μL ogni volta, 1 mL di Hieff Trans™ può effettuare circa 660 trasfezioni; per una piastra a 6 pozzetti, circa 6 μL ogni volta, 1 mL di Hieff Trans™ può effettuare circa 660 trasfezioni. 160 trasfezioni;

Per maggiori dettagli, vedere Fiducia nella trasfezione con il reagente lipofectamina Hieff Trans™

Polietilenimmina lineare (PEI) MW40000 (lisi rapida)

PEI 40000 è un polimero cationico altamente carico con un peso molecolare di 40.000 che lega molto facilmente le molecole di acido nucleico caricate negativamente, formando un complesso e consentendo al complesso di entrare nelle cellule. PEI 40000 è un reagente di trasfezione transitorio con bassa citotossicità, elevata efficienza di trasfezione ed elevata efficienza di espressione genica in cellule come HEK293 e CHO. I reagenti di trasfezione PEI lineare sono stati convalidati per un'ampia gamma di linee cellulari tra cui HEK-293, HEK293T, CHO-K1, COS-1, COS-7, NIH/3T3, Sf9, HepG2 e cellule Hela. L'efficienza di trasfezione è pari all'80%~90%.

Per maggiori dettagli, vedere Nuovo favorito per la trasfezione —— Linear PEI MW 40000, un reagente di trasfezione più efficiente

Trasmettitore Hieff™ in vitro Reagente di trasfezione siRNA/miRNA

Questo prodotto può raggiungere oltre il 90% di efficienza di espressione di 1 nM siRNA in un'ampia gamma di linee cellulari, evitando effetti off-target. Adatto per la trasfezione di una varietà di cellule, tra cui Hela, MCF-7, HepG2, CHO e altre cellule aderenti; e linee cellulari di sospensione difficili da trasfezionare, come le cellule K562 o THP-1, possono raggiungere l'80% di efficienza di silenziamento; includendo alcune cellule primarie, fibroblasti umani primari ed epatociti umani primari, ecc., è possibile raggiungere l'80% di efficienza di silenziamento.

Riferimento per le condizioni di trasfezione

Oltre alle istruzioni per ogni prodotto, i clienti operano in base al loro specifico contenuto sperimentale e ci saranno diverse differenze nella quantità di utilizzo. In base alle condizioni di trasfezione cellulare in vitro segnalate dai clienti dopo l'utilizzo del prodotto, sono state ordinate per il vostro riferimento.

Domande frequenti

1 reagente di trasfezione liposomiale Hieff Trans™

1.1 D: Il siero può essere presente durante la preparazione dei complessi di reagenti per la trasfezione degli acidi nucleici?

A: La presenza di siero influirà sulla formazione dei liposomi. Si raccomanda di utilizzare un mezzo privo di siero (generalmente un mezzo MEM) quando si preparano complessi di reagenti di trasfezione di acidi nucleici.

1.2 D: A cosa devo prestare attenzione quando utilizzo il reagente di trasfezione dell'acido nucleico liposomiale Hieff Trans™?

UN:

1) Quando le cellule vengono transfettate, la densità cellulare è preferibilmente dell'80%-95% e la densità di placcatura specifica viene determinata in base alla situazione delle cellule;

2) L'utilizzo di DNA ad elevata purezza aiuta a ottenere una maggiore efficienza di trasfezione;

3) Durante la preparazione dei complessi di trasfezione, è necessario diluire il DNA e i reagenti di trasfezione con il mezzo privo di siero;

4) Non è possibile aggiungere antibiotici al terreno durante la trasfezione;

5) I reagenti devono essere conservati a una temperatura compresa tra 2 e 8°C, prestando attenzione a non aprire ripetutamente il coperchio per un lungo periodo di tempo;

6) La concentrazione del DNA e il numero di reagenti liposomiali cationici devono essere ottimizzati per il primo utilizzo per ottenere la massima efficienza di trasfezione. Il rapporto tra DNA e reagente di trasfezione è generalmente raccomandato di essere 1:2-1:3.

1.3 D: È necessario terminare la procedura dopo la trasfezione?

R: Non è necessario. I complessi liposomiali sono stabili per 6 ore. Se il mezzo cellulare non viene cambiato prima della trasfezione, per garantire i nutrienti richiesti per la normale crescita cellulare, è necessario cambiare mezzo dopo 4-6 ore. Tuttavia, se il mezzo è stato cambiato prima della trasfezione, non è necessario cambiare mezzo dopo la trasfezione dei liposomi.

1.4 D: È possibile effettuare la co-trasfezione di DNA e siRNA? Qual è l'effetto?

R: Sì, quando DNA e siRNA vengono co-trasfettati, l'efficienza della trasfezione del siRNA sarà leggermente peggiore.

1.5 D: Il reagente di trasfezione può essere utilizzato per la trasfezione del confezionamento lentivirale?

A: È possibile il confezionamento lentivirale.

1.6 D: Le cellule in sospensione possono essere transfettate con il reagente di transfettazione degli acidi nucleici liposomiali Hieff Trans™?

A: Hieff Trans™ Liposome Nucleic Acid Transfection Reagent può essere utilizzato per la transfezione di cellule in sospensione, vedere Protocollo per i dettagli. Inoltre, abbiamo anche introdotto un reagente di transfezione specifico per cellule in sospensione (Cat. n.40805, reagente di trasfezione liposomiale acellulare Hieff Trans™ Suspension)

2 Trasmissioni Hieff™ in vitro Reagente di trasfezione siRNA/miRNA

2.1 D: È necessario cambiare il reagente di trasfezione dopo la trasfezione?

A: Questo problema può essere suddiviso in due casi: 1. Se non c'è alcun cambio di mezzo prima della trasfezione, il mezzo dovrebbe essere cambiato circa 6 ore dopo la trasfezione per garantire i nutrienti necessari per la crescita cellulare; 2. Se c'è un cambio di mezzo prima della trasfezione, può essere operato secondo il normale funzionamento delle cellule coltivate? ? Dopo l'operazione di cambio del liquido?

2.2 D: I reagenti di trasfezione possono essere congelati?

R: Non può essere congelato, perché il reagente di trasfezione è un reagente di trasfezione cationico PEI. Il congelamento a basse temperature distruggerà l'attività del reagente di trasfezione PEI. Pertanto, è meglio conservarlo a 2-8 °C per mantenere la migliore efficacia di trasfezione.

Informazioni sul prodotto

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