ワクチンおよび医薬品開発のための Yeasen GMP グレード mRNA 酵素およびヌクレオチド

mRNAワクチンの研究と配合には、開発を成功させるために多様な原材料が必要です。分子酵素業界の先駆者として、Yeasenは高度な分子酵素バイオテクノロジーと大規模なタンパク質発酵および精製技術を通じて、さまざまな分子酵素と試薬の作成に成功しました。

製品の品質と生産能力の両方を保証するために、Yeasen は武漢に GMP レベルの生産施設を設立しました。この施設は、年間 50 億ユニットを超える生産能力を備え、産業規模の生産要件を完全に満たすことができます。さらに、Yeasen は分子酵素の研究、開発、製造、流通に関する ISO 13485 認証を取得した中国初の企業です。この認証により、Yeasen のすべての試薬の品質、一貫性、トレーサビリティが保証されます。

1. GMPの利点
2. YeasenはGMPグレードの製品を提供できます
3. イェーセンは多くの製品でDMF番号を取得しました
4. Yeasen製品の応用シナリオ
5. Yeasen社が提供するmRNAワクチン製造のための原材料
6. 注文情報

1. GMPの利点

「GMP グレード」は、Yeasen が ISO 13485 認定施設で製造された試薬を表すために使用するブランド用語です。Yeasen の GMP グレード試薬は、ISO 13485 品質管理システム標準に準拠し、より厳格なプロセス制御と完全な文書記録に基づいて製造されています。Yeasen は高品質の試薬を提供するだけでなく、文書、現場監査、その他のサポートもお客様に提供できます。

表1. GMPの利点

2. YeasenはGMPグレードの製品を提供できます

Yeasen は、酵素開発と工業規模の生産における豊富な専門知識と優れた技術力を活かして、「mRNAtools」と呼ばれる最先端の施設を設立しました。50,000 平方フィートに及ぶこの施設は、GMP 規制に準拠しており、2×1500L の自動発酵ユニット、大規模な精製装置、凍結乾燥機能など、最先端の機能を誇ります。mRNAtools は、顧客の生産および規制要件に適合する厳格な試薬を提供することに専念しています。

Yeasen の分子酵素製造施設は、GMP グレードの製品専用に建設されており、ハードウェアとソフトウェアの両方のレベルで製品の品質を保護します。この施設は、それぞれが広範な GMP 製造経験を持つ 70 人の専門家からなる高度なスキルを持つチームで構成されています。倉庫と物流業務はモジュール化されており、製品の安全な保管と効率的な輸送が保証されています。全国に広がるマルチセンター配送ネットワークにより、信頼性の高い供給サイクルがさらに保証されます。

3. イェーセンは多くの製品でDMF番号を取得しました

ドラッグマスターファイル (DMF) は、米国食品医薬品局 (FDA) に自主的に提出される機密文書です。このファイルには、ヒト用医薬品の製造、加工、包装、保管に使用される施設、プロセス、または物品に関する詳細な情報が記載されています。

FDA は、医薬品有効成分 (API) メーカーが新薬臨床試験申請 (IND)、新薬申請 (NDA)、新薬簡略申請 (ANDA)、または輸出申請をサポートするために DMF を参照する場合、DMF の技術的内容を精査します。DMF はこれらの申請で重要な役割を果たします。メーカーが特定の材料に対して DMF を提出すると、FDA の承認プロセスが大幅に迅速化されます。

Yeasen は、プロジェクトのタイムラインを効率化できる DMF ファイルを所有しています。必要に応じて、FDA 申請をサポートするために、当社の DMF への参照承認をリクエストできます。当社の DMF の参照承認を開始するには、FDA センター固有の DMF 承認書を提供するよう依頼する承認書リクエストを Yeasen に提出してください。

4. Yeasen製品の応用シナリオ

4.1 テンプレート生成

プラスミドの線形化は、プラスミドベクターを転写テンプレートとして使用する場合のテンプレート生成中に不可欠なステップです。転写が DNA テンプレートの末端まで進むと、プラスミドの線形化によって、定義された長さと配列の RNA 転写産物が生成されます。Yeasen は、お客様のニーズを満たすためにさまざまな制限酵素を提供しています。平滑末端または 5' オーバーハングを生成する制限酵素を選択することをお勧めします。

4.2インビトロ転写（IVT）

インビトロ転写はさまざまな要因の影響を受けます。酵素、バッファー、修飾基質はすべて転写効率に大きな影響を与えます。

YEASEN Biotechは、ZymeEditorプラットフォームに基づいて、in vitro転写（IVT）プロセス中のdsRNAの生成を大幅に削減する新しいT7 RNAポリメラーゼを開発しました（ T7 RNAポリメラーゼ、低dsRNA、250 U/μL ）。これはmRNAの免疫原性を大幅に低下させ、ある程度までmRNAの完全性を高めます。この開発は、mRNAワクチンと癌治療薬の開発を進める上で重要な役割を果たすと期待されています。

図 1. T7 RNA ポリメラーゼ変異体によって生成された dsRNA の定量分析。

バッファーを最適化し、ヌクレオチド基質の塩の種類を調整することで、転写の効率が大幅に向上し、dsRNAの生成が減少しました。

図2. Tris NTPはLVT効率を大幅に高め、dsRNAの生成を減らすことができる

4.3 mRNAキャッピング

5′ キャップ構造は免疫原性を低下させ、mRNA の効率的な翻訳に必要であるため、転写によって生成された mRNA の 5′ 末端にキャップ構造を追加する必要があります。

図3. キャップレート検出結果（LC-MS検出）

4.4 mRNAの精製

精製は、高純度の mRNA を実現するために不可欠なステップです。

5. Yeasen社が提供するmRNAワクチン製造のための原材料

現在、Yeasen は mRNA 原液の製造工程において完全な製品セットを提供できます。製品は GMP 製造によって厳密に管理されており、mRNA ワクチン製造の要件を完全に満たしています。

表2. Yeasen社提供のmRNAワクチン製造用原材料

テンプレートの準備		インビトロ転写
2× Hieff Canace AdvanceFast ハイフィデリティ PCR マスターミックス	10164ES	T7 高収量RNA合成キット	10623ES
dNTP セットソリューション	10122ES	T7 RNAポリメラーゼ	10625ES
Hieff Clone ユニバーサル ワンステップ クローニング キット	10922ES	ピロホスファターゼ、無機GMPグレード	10672ES
ゴールドT4 DNAリガーゼ	10300ES	マウスRNase阻害剤GMPグレード	10621ES
BspQI GMPグレード	10664ES	DNase I	10611ES
Bsa I GMPグレード	10661ES	NTP セットソリューション	10133ES
RNase R (20U/uL)	14615ES	擬似UTPナトリウム溶液GMPグレード（100 mM）	10650ES
シュバ1世	10662ES	N1-Me-擬似UTPナトリウム溶液GMPグレード（100 mM）	10651ES
キャッピング		精製
mRNA ワクシニアキャッピング酵素 GMP グレード	10614ES	Hieff NGS™ RNAクリーナー	12602ES
mRNA キャップ 2´-O-メチルトランスフェラーゼ GMPグレード	10612ES	磁気分離ラック	80460ES
S-アデノシルメチオニン（SAM）GMPグレード	10619ES	二本鎖RNA（dsRNA）ELISAキット	36717ES
ARCA (アンチリバースキャップアナログ)	10681ES

6. 注文情報

以下は Yeasen が提供する代表的な製品です。その他のサイズもご用意しています。当社の製品は連携して動作するように高度に最適化されており、優れたパフォーマンスと再現性を保証します。カスタマイズされたサービスも提供できます。表示されていない製品にご興味がある場合は、当社までご連絡ください。お客様のニーズに合わせて対応いたします。

表3. 注文情報

 

 

読書に関して：

mRNA in vitro合成用GMPグレード試薬

DNase I とバイオメディカルにおける応用

参考文献:

[1] Chaudhary, N., Weissman, D., & Whitehead, KA (2021). 感染症に対するmRNAワクチン：原理、送達および臨床応用。ネイチャーレビュー。ドラッグディスカバリー、20(11), 817–838。
[2] Vogel, AB et al. 自己増幅RNAワクチンはインフルエンザに対してmRNAワクチンと同等の防御力を発揮するが、
はるかに低い用量で。分子療法：米国遺伝子治療学会誌26、446-455、
[3] Fuchs, AL, Neu, A. & Sprangers, R. 5'の迅速かつコスト効率の高い大規模生産のための一般的な方法
キャップドRNA。RNA（ニューヨーク、NY）22、1454-1466、doi：10.1261 / rna.056614.116（2016）。
[4] シュミット、A. 臨床試験用mRNAワクチン製造に関する考慮事項。分子生物学の方法（クリフトン、ニュージャージー州）1499、237-251、
[5] Banerji, A. et al. COVID-19疾患および報告されたアレルギー反応を予防するためのmRNAワクチン：最新のエビデンスと提案されたアプローチ。アレルギーおよび臨床免疫学ジャーナル。実践9、1423-1437、
[6] Richner, JM et al. 改変mRNAワクチンはジカウイルス感染を予防する。Cell 168, 1114-1125.e1110、
[7] コルベット、KS他「プロトタイプ病原体対策により可能になったSARS-CoV-2 mRNAワクチン設計」ネイチャー586、567-571、
[8] コルベット、KSら「mRNA-1273は非ヒト霊長類におけるSARS-CoV-2ベータ感染を防ぐ」ネイチャー免疫学22、1306-1315、
[9] Keech, C. et al. SARS-CoV-2組換えスパイクタンパク質ナノ粒子ワクチンの第1-2相試験。ニューイングランド医学ジャーナル383、2320-2332、
[10] クランプス、T. & エルバース、K. RNAワクチン入門。分子生物学の方法（クリフトン、ニュージャージー州）1499、1-11、
[11] Linares-Fernández, S., Lacroix, C., Exposito, JY & Verrier, B. 自然免疫と獲得免疫のバランスをとるmRNAワクチンの調整。分子医学の動向26、311-323、