1장: PCR 기술
1.1 PCR의 원리
PCR(Polymerase Chain Reaction) 또는 중합효소 연쇄 반응은 특정 프라이머를 사용하여 모 DNA 가닥을 템플릿으로 하여 DNA 중합효소가 촉매하는 것을 말합니다 . 시작점 확장을 위해 dNTP, Mg 2+ 및 확장 인자, 증폭 증강 요인 . 변성, 어닐링 및 확장 단계를 통해 딸 가닥의 시험관 내 복제는 부모 가닥 템플릿 DNA와 보완적이어서 시험관 내에서 모든 표적 DNA를 빠르고 특정하게 증폭시킬 수 있습니다.
1.2 DNA 중합효소의 분류
DNA pol은 DNA의 세포 복제 에 중요한 효소 입니다. 열 안정성, 합성 능력, 속도, 충실도 및 특이성 에 따라 Taq DNA 중합효소, 고충실도 DNA 중합효소, 핫스타트 DNA 중합효소, 직접 확장 DNA 중합효소, 긴 단편 DNA 중합효소로 분류할 수 있습니다. 효소, 빠른 DNA 중합효소, 다중 DNA 중합효소 등 .
이 중 가장 흔한 것은 Taq DNA 중합효소로, 5'→3' 말단에 중합효소 활성을 갖고 5'→3' 말단에 엑소뉴클레아제 활성을 갖지만 3'→5' 말단 교정 활성. Taq의 가장 중요한 특징은 내열성이 뛰어나 PCR의 열 변성 단계를 견딜 수 있어 과정 중간에 효소를 더 추가할 필요가 없다는 것입니다. 그러나 Taq는 교정 활성이 없기 때문에 충실도가 낮습니다. 충실도는 주로 마그네슘 이온과 dNTP의 농도와 비율에 의해 달성됩니다.
고충실도 DNA 중합효소는 중합 센터와 절단 센터를 포함하고 있으며, 중합 센터는 5'→3' DNA 중합효소 활성을 가지고 있어 5'→3' 방향으로 DNA 합성을 촉매할 수 있고 , 절단 센터는 3'→5' 엑소뉴클레아제 활성을 가지고 있어 염기 불일치를 복구할 수 있습니다. 따라서 Taq DNA 중합효소의 특성 외에도 고충실도 DNA 중합효소는 교정 활성도 가지고 있어 불일치한 뉴클레오타이드를 절제하여 제품의 정확성을 보장합니다 .
위의 다이어그램은 DNA 중합효소가 작동하는 방식을 보여줍니다 [1] .
Direct PCR(Direct PCR)은 정제되지 않은 샘플을 PCR 증폭에 사용하고 동물 또는 식물 조직을 직접 증폭하는 반응 입니다 . 현재
위의 그림은 직접 PCR 기술을 보여줍니다.
에이. 직접적인 방법: 소량의 샘플을 채취하여 PCR 마스터 믹스에 직접 첨가하여 PCR을 식별합니다.
B. 용해법: 검체를 채취한 후 용해액에 넣어 유전체를 방출시키고, 용해 상층액을 소량 취해 PCR 마스터 믹스에 넣어 PCR을 확인합니다.
1.3 자주 묻는 질문과 해결책
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문제 |
이유 |
해결책 |
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증폭된 대역 없이 |
전기영동 시스템 문제 |
핵산 염색약, 젤 농도, 전기영동 완충액과 관련된 문제를 해결합니다. |
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부정확한 변성 온도 |
PCR 기기의 표시된 온도가 실제 온도와 일치합니까? 온도가 너무 높으면 효소가 처음 몇 사이클에서 빠르게 변하고, 너무 낮으면 템플릿 변성이 완료되지 않습니다. |
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반응계내 프로테아제 및 뉴클레아제 오염 |
Taq 효소를 첨가하기 전에 반응 시스템을 95°C에서 5~10분 동안 가열해야 합니다. |
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프라이머 오류 |
BLAST를 사용하여 프라이머 특이성을 확인하거나 프라이머를 재설계합니다. |
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템플릿에 불순물이 포함되어 있습니다. |
특히, 포름알데히드에 고정된 조직과 파라핀에 포매된 조직에는 종종 포름산이 포함되어 있어 DNA 탈퓨린화를 일으키고 PCR 결과에 영향을 미칩니다. |
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프라이머의 열화 및 파손 |
합성 프라이머가 올바른지, 정제되었는지, 또는 부적절한 보관 조건으로 인해 비활성화되었는지 확인하세요. |
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PCR산물의 양이 적음 |
부적절한 어닐링 온도 |
2도의 기울기로 어닐링 온도를 최적화하기 위해 기울기 PCR 반응이 설계되었습니다. |
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DNA 템플릿에 억제제가 존재함 |
DNA 템플릿이 깨끗한지 확인하세요. |
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장시간 변성 |
장기간의 변성은 DNA 중합효소의 비활성화로 이어진다. |
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확장자가 너무 짧습니다 |
연장 시간이 너무 짧습니다. 연장 시간을 1kb/min의 원칙에 따라 설정하세요. |
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DNA 템플릿 양이 너무 적습니다 |
DNA 템플릿의 양을 늘립니다. |
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프라이머의 양이 부족합니다 |
시스템의 프라이머 함량을 늘립니다. |
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PCR 사이클 횟수가 부족합니다 |
반응 사이클의 횟수를 늘립니다. |
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여러 밴드 |
프라이머 특이성이 낮음 |
BLAST와 Primer와 같은 프라이머 설계 소프트웨어를 사용하여 프라이머 특이성을 확인하거나 프라이머를 재설계했습니다. |
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루프의 수가 너무 많음 |
템플릿의 양을 적절히 늘리고, 사이클 횟수를 줄이세요. |
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외인성 DNA 오염 |
깨끗한 작동을 보장하세요. |
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템플릿의 양이 너무 많음 |
플라스미드 DNA의 양은 <50ng이어야 하고, 게놈 DNA의 양은 <200ng이어야 합니다. |
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프라이머가 너무 많아요 |
반응 시스템의 프라이머 양을 줄이세요. |
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반응용액이 잘 섞이지 않았습니다 |
반응 완충액이 완전히 녹고 완전히 혼합되었는지 확인하세요. |
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Mg 고농도 |
Mg의 농도를 적절히 조절해 사용하세요. |
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효소 투여량이 높거나 효소 품질이 좋지 않음 |
효소의 양을 줄이거나 다른 것으로 대체하세요. |
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낮은 어닐링 온도, 긴 어닐링 및 연장 시간 |
변성 및 연장 시간을 줄이려면 어닐링 온도를 높이거나 기울기 PCR 반응을 설계하여 어닐링 온도를 최적화합니다. |
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PCR 혼합물 자체의 문제 |
PCR 프리믹스인 경우 시약 자체의 품질 문제일 수 있으며, 배치나 다른 브랜드를 변경하는 것이 좋습니다. |
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잘못된 크기 |
오염 |
새로운 시약과 팁으로 실험대를 청소합니다. |
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템플릿이나 프라이머의 잘못된 사용 |
프라이머와 템플릿을 교체하세요. |
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유전자형 |
연구된 유전자에 대해 서열 분석과 BLAST 연구가 수행되었습니다. |
2장: 핵산 전기영동
2.1 핵산 전기영동의 원리
전기장의 작용 하에 대전된 입자가 전기적 특성과 반대되는 전극을 향해 움직이는 것을 전기영동이라고 합니다. 전기장에서 대전된 입자를 사용하는 것 다른 속도로 움직이고 분리를 달성하는 기술을 전기영동이라고 합니다. 핵산 전기영동은 핵산 연구에 중요한 도구 이며 핵산 프로브, 핵산 증폭 및 시퀀스 분석 과 같은 기술의 필수적인 부분 입니다 . 핵산 전기영동은 일반적으로 아가로스 또는 폴리아크릴아미드 젤에서 수행됩니다 . 다양한 농도의 아가로스와 폴리아크릴아마이드는 서로 다른 분자체 메쉬 크기를 갖는 겔을 형성할 수 있으며, 이를 사용하여 서로 다른 분자량의 핵산 단편을 분리할 수 있습니다.
2.2 아가로스 겔 전기영동
아가로스는 해초에서 추출한 선형 폴리머입니다. 아가로스는 완충액에서 가열하여 맑고 투명한 졸로 녹인 다음 젤라틴 몰드에 붓고 응고하여 젤이라고 알려진 고체 매트릭스를 형성합니다. 젤의 밀도는 아가로스 농도에 따라 달라집니다.
아가로스 젤 전기영동은 아가로스를 지지매체로 사용하는 일종의 전기영동 방법으로 분석 원리와 다른 지지 전기영동의 주요 차이점은 이중 역할을 한다는 것입니다. "분자체"와 "전기영동"의. 젤을 넣습니다 전기장, 아래에 의 행동 전기장 하에서 하전된 핵산은 이동한다 긍정적인 폴 ~을 통해 메시 ~의 그만큼 젤 . 의 비율 마이그레이션은 크기에 영향을 받습니다. 핵산 분자, 아가로스 농도, 인가 전압, 전기장, 전기영동 완충액 및 매립된 염료의 양. 적절한 전기영동 시간 후 s 는 다른 조건 에서는 크기와 형태가 다른 핵산 조각이 젤에서 다른 위치에 있게 되어 분리의 목적을 달성하게 됩니다. 아가로스 젤의 분리 넓은 범위를 가지고 있으며, 일반적으로 DNA 절단 젤 회수, DNA 분리에 사용되며 DNA가 재조합인지, 플라스미드인지 등을 확인하는 데 사용됩니다. 플라스미드가 절단되었는지 여부에 관계없이 다양한 농도의 아가로스 젤을 사용하여 200bp 에서 50kb 길이 의 DNA 단편 을 분리할 수 있습니다 .
2.3 실험 방법
만들기 아교
예를 들어 1% 농도를 예로 들면 아가로스 1g을 달아 250ml 삼각플라스크에 붓고 0.5×TBE 전기영동 완충액 100ml을 넣어 잘 섞은 후 전자레인지에서 데워 약 60℃로 공기 건조한 다음 핵산염색약 적당량을 넣고 잘 흔들어 미리 준비해둔 깨끗한 겔판에 붓고 양손으로 빗을 잡고 겔용액에 수직으로 넣고 기다린다. 젤이 완전히 굳을 때까지 자연적으로 식힙니다(25~30분).
접착제를 만드는 빗을 제거하세요
젤을 전기영동 탱크로 조심스럽게 옮긴 다음(젤 트레이 또는 젤만 ) 샘플 웰 쪽을 음극에 놓고 젤이 아래 약 1mm가 될 때까지 0.5× TBE 전기영동 완충액을 첨가합니다.
샘플 추가
DNA 샘플에 10× 로딩 버퍼(loading buffer)를 넣고 잘 섞은 다음, 피펫 건으로 서브 머지드 젤 웰에 샘플 혼합물을 천천히 넣고 웰당 5-10 μL 의 샘플 을 추가합니다(최대 40 μL). 일반적으로 첫 번째 웰은 DNA 마커로, 두 번째 웰은 양성 대조군(정의된 DNA ) 으로 채워야 합니다 . 세 번째 샘플은 음성 대조군(시약이나 물 )과 함께 처리하고, 샘플의 순서를 기록해야 합니다.
전기영동
덮다 전기영동 탱크, 전선을 연결하고 전원을 켜고 전기영동 전압, 전류를 설정합니다. 그리고 시간 매개변수. 일반적으로 전압은 5v/cm를 초과해서는 안 됩니다(길이는 전기영동 탱크의 양극과 음극 사이의 거리를 말합니다 ). 전기영동 시간은 일반적으로 15~30분이다.
전기영동 종료
제거하다 그만큼 젤(젤 트레이 없음)을 UV 이미징 시스템 아래에서 이미징하여 선명한 전기영동 이미지를 얻은 다음 전기영동 이미지를 편집합니다. 이미지 편집 소프트웨어를 사용하여 샘플 정보, 날짜 및 운영자를 라벨로 표시합니다.
2.4 자주 묻는 질문과 해결책
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문제 |
이유 |
해결책 |
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타겟 밴드가 없습니다 |
작은 DNA가 젤에서 떨어집니다. |
전기영동 시간을 단축하고, 전압을 낮추고, 젤 농도를 증가시킵니다. |
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유사한 분자량 크기의 DNA 밴드는 쉽게 구별되지 않습니다. |
최적의 젤 농도에 맞춰 전기영동 시간을 늘리세요. |
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대상 조각이 기존 전기영동법에겐 너무 큽니다. |
펄스 젤 전기영동으로 분석되었습니다. |
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목적없는 클립 |
PCR 과정에 오류가 있어 표적 산물을 증폭시키지 못했습니다. |
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흐릿한 DNA 밴드 |
오래된 전기영동 완충액 |
전기영동 완충액을 여러 번 사용할 경우 이온강도가 감소하고, PH값이 느리게 상승하며, 플러싱 능력이 약해져 전기영동 효과에 영향을 미치므로 전기영동 완충액을 자주 교체하는 것이 좋습니다. |
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DNA 분해 |
핵산분해효소 오염을 피하세요. |
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사용된 전기영동 조건은 전기영동에 적합하지 않습니다. |
전기영동 전압은 20V/cm를 초과해서는 안 되며 온도는 <30°C여야 합니다. 거대한 DNA 가닥의 전기영동 온도는 <15°C여야 합니다. 사용하는 전기영동 완충액의 완충 용량이 충분한지 확인하세요. |
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과도한 DNA 샘플링 |
젤에서 업샘플링되는 DNA 양을 줄입니다. |
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DNA 샘플이 너무 짜다 |
전기영동 전 에탄올 침전을 통해 과도한 소금을 제거했습니다. |
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단백질 오염 |
전기영동 전 페놀 추출을 통해 단백질을 제거합니다. |
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샘플 농도가 너무 높습니다 |
상부 시료의 농도는 500ng/well보다 낮아야 하며, 농도가 너무 높으면 전기영동 속도에 영향을 미쳐 끌림과 흐릿함이 발생합니다. |
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밴드가 약하거나 없음 |
DNA 샘플 크기가 부족합니다 |
DNA 흡수량 증가 |
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DNA 분해 |
DNA의 뉴클레아제 오염 방지 |
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핵산염료에 적합하지 않은 광원 |
핵산염색약에 대한 지침에 따라 적절한 파장의 광원을 선택하세요. |
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분리되지 않은 밴드 |
시간 부족 |
전기영동 시간을 늘리세요 |
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잘못된 젤 농도 |
접착제 농도가 너무 높아서 분리에 대한 저항성이 너무 큽니다. |
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샘플의 소금 이온 농도가 너무 높습니다. |
고농도의 소금 이온은 전기영동 저항을 증가시키고 밴드 분리를 방지합니다(예: 엔도뉴클레아제 완충액을 함유한 소화 샘플). |
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비특정 밴드 |
RNA 오염 |
샘플 재준비 |
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샘플 간 오염 |
채우는 동안 팁을 교체하세요. 용량이 40 μl 이상인 샘플이 쏟아지는 것을 방지하세요. |
2.5 폴리아크릴아마이드 겔 전기영동
폴리아크릴아마이드 겔은 아크릴아마이드 단량체, 사슬 중합 촉매 N,N,N',N'-테트라메틸에틸렌디아민(TEMED) 및 암모늄 퍼설페이트, 가교제 N,N'-메틸렌비스아크릴아마이드 간의 화학 반응에 의해 형성된다. 아크릴아마이드 단량체는 촉매의 존재 하에 중합되어 긴 사슬을 형성하고, 이는 가교제 에 의해 가교되어 겔을 형성하며, 이 겔의 기공 크기는 사슬 길이와 가교 정도에 의해 결정된다. 기공 크기는 사슬 길이와 가교 정도에 의해 결정된다. 사슬 길이는 아크릴아마이드 농도에 따라 달라지며, 중합체의 가교 정도는 아크릴아마이드와 가교제의 비율을 조정하여 변경할 수 있다 .
폴리아크릴아마이드 겔 전기영동은 전기영동된 샘플의 전하, 분자 크기 및 모양의 차이 에 따라 샘플을 분리하는 데 사용할 수 있습니다 . 분자 체질과 정전기를 결합하며 아가로스 겔 전기영동보다 분해능이 더 높습니다. 뉴클레오티드가 하나만 다른 DNA 단편을 분리할 수 있습니다 .
폴리아크릴아마이드 젤 전기영동은 길이가 1kb 미만인 DNA 단편을 분석하고 준비하는 데 사용됩니다. 분리할 핵산 단편의 크기에 따라 다양한 젤 을 준비 할 수 있습니다 .
아래 표는 아크릴아마이드와 DNA의 농도에 따른 효과적인 분리 범위를 보여줍니다.
|
콘셉트 (%) |
유효 분리 범위(bp) |
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3.5 |
100에서 2000까지 |
|
5 |
80에서 500까지 |
|
8 |
60에서 400까지 |
|
12 |
40에서 200까지 |
|
15 |
25에서 150까지 |
|
20 |
10에서 100까지 |
2.4 관련제품 선정 가이드라인
기존 PCR |
||||
| 사양 | 10167ES | 10102ES | 10103ES | 10108ES |
| 증폭 길이 | ≤10 -15 kb | ≤5킬로바이트 | ≤5킬로바이트 | ≤4킬로바이트 |
| 연장 시간 | 1~10초/kb | 30초/kb | 30초/kb | 30초/kb |
| 제품 최종 구조 | 3'-다에이 | 3'-다에이 | 3'-다에이 | 3'-다에이 |
| 어닐링 온도 | 60℃ | 온도-(2~5)℃ | 온도-(2~5)℃ | 온도-(2~5)℃ |
| GC 호환성 범위 | 30-70% | 40-70% | 40-70% | 30-70% |
| 5'-3' 엑소뉴클레아제 활성 | 현재의 | 현재의 | 현재의 | 현재의 |
| 콜로니 PCR | 적합한 | 적합한 | 적합한 | 적합한 |
| 유전자 식별 | 적합한 | 적합한 | 적합한 | 적합한 |
| 멀티플렉스 PCR | 적합하지 않음 | 적합하지 않음 | 적합하지 않음 | 3-4 플렉스 PCR |
| 전기영동 지시약 | 보라색-빨간색 | 파란색 | 무색 | 파란색 |
| 핫 스타트 | 핫 스타트 | 핫 스타트가 아닙니다 | 핫 스타트가 아닙니다 | 핫 스타트 |
| 프리믹스/키트 | 사전 혼합 | 사전 혼합 | 사전 혼합 | 사전 혼합 |
직접 PCR |
||||
| 사양 | 10185ES | 10188ES | 10187ES | |
| 제품 유형 | 마우스 직접 증폭 | 혈액 직접 증폭 | 식물 직접 증폭 | |
| 증폭 길이 | ≤1킬로바이트 | ≤8킬로바이트 | ≤1킬로바이트 | |
| 연장 시간 | 30초/kb | ≤2kb의 경우 3-5초/kb | 60초/kb | |
| ≤8kb의 경우 10s/kb | ||||
| 샘플 용해 시간 | 15분 | 0-3분 | 0-10분 | |
| 제품 최종 구조 | 블런트 엔드 | 블런트 엔드 | 블런트 엔드 | |
| 어닐링 온도 | 온도-(2~5) ℃ | 온도-(1~2) ℃ | 온도-(2~5) ℃ | |
| GC 호환성 범위 | 30-70% | 30-75% | 40-65% | |
| 5'-3' 엑소뉴클레아제 활성 | √ | √ | √ | |
| 유전자 식별 | √ | √ | √ | |
| 멀티플렉스 PCR | 3-4 플렉스 | |||
| 직접 샘플 증폭 | √ | √ | √ | |
| 전기영동 지시약 | 파란색 | 무색 | 파란색 | |
| 핫 스타트 | √ | √ | √ | |
| 프리믹스/키트 | 키트(믹스 포함) | 키트(믹스+버퍼 포함) | 키트(믹스 포함) | |
| 적합한 생물 | 쥐, 쥐 | 사람, 쥐, 염소, 닭, 돼지 등 | 쌀, 옥수수, 담배, 유채, 밀, 대두 등 | |
| 적합한 조직/소재 | 꼬리, 귀, 발가락(근육 포함) 및 기타 기관 | EDTA, 헤파린, 시트르산 등이 포함된 신선한 혈액, 냉장(냉동) 혈액, 시중에서 판매하는 건조 혈액 반점 | 어린 잎, 늙은 잎, 묘목, 어린 줄기 | |
| 샘플 입력 | 조직: 5-10 mg; 꼬리: 1-5 mm | 전혈 : 0.5%-20%, 건조혈반 : 1 mm² | 잎: 1-10 mm, 씨앗: 1-3 mm | |
고충실도 PCR |
||||
| 사양 | 10164ES | 10153ES | 10154ES | |
| 증폭 길이 | ≤10kb gDNA, ≤10kb cDNA, ≤16kb λDNA | ≤10kb gDNA, ≤10kb cDNA, ≤13kb λDNA | ≤10kb gDNA, ≤10kb cDNA, ≤13kb λDNA | |
| 연장 시간 | 5초/kb | 30초/kb | 30초/kb | |
| 충실도(Taq) | 83× | 83× | 83× | |
| 제품 최종 구조 | 블런트 엔드 | 블런트 엔드 | 블런트 엔드 | |
| 어닐링 온도 | 60 ℃ | 68 ℃ | 68 ℃ | |
| GC 호환성 범위 | 20-80% | 30-60% | 30-60% | |
| 5'-3' 엑소뉴클레아제 활성 | 결석한 | 결석한 | 결석한 | |
| 전기영동 지시약 | 파란색 | 무색 | 파란색 | |
| 단일 효소/프리믹스 | 사전 혼합 | 단일 효소 | 사전 혼합 | |
| 용인 | / | / | 혈액, 마우스 조직 용해물 | |
핵산 전기영동 |
||||
| 제품 카테고리 | 카탈로그 번호 | 제품 이름 | 애플리케이션 | |
| 아가로스 | 10208ES | 아가로스 | 정기적인 핵산 전기영동 | |
| 10221ES | 고분체 아가로스(PCR 등급) | 20bp-800bp의 DNA 단편 분리에 적합하며 폴리아크릴아마이드 젤과 유사함 | ||
| 10226ES | 아가로스 정제 (0.5g/정) | 일상적인 아가로스 응용 분야에 편리함 | ||
| 핵산염색 | 10202ES | YeaRed 핵산 겔 염색(물에서 10,000×) | 수용성이며 EB와 유사한 분광 특성을 갖고 있으며 300nm UV광에서 여기 가능합니다. | |
| DNA 마커 | 10510ES | 골드밴드 1kb DNA 래더 | 250-12000bp(13밴드) | |
| 10515ES | 골드밴드 50bp DNA 래더 | 50-1000bp(14개 밴드) | ||
| 10507ES | 골드밴드 100bp DNA 래더 | 100-1500bp(12밴드) | ||
| 10516ES | GoldBand 100 bp 플러스 DNA 래더 | 100-3000bp(14밴드) | ||
| 10517ES | 골드밴드 200bp DNA 래더 | 200-5000bp(12밴드) | ||
| 10518ES | 골드밴드 500bp DNA 래더 | 500-5000bp(8개 밴드) | ||
| 10501ES | 골드밴드 DL2000 DNA 마커 | 100-2000bp(6밴드) | ||
| 10504ES | 골드밴드 DL5000 DNA 마커 | 100-5000bp(9개 밴드) | ||
| 10505ES | 골드밴드 DL10,000 DNA 마커 | 100-10000 bp(10개 밴드) | ||
| 10511ES | 골드밴드 풀스케일 DNA 래더 | 100-12000bp(20밴드) | ||
| 10512ES | 골드밴드 DL15000 DNA 마커 | 250-15000 bp(7개 밴드) |
2.5 핵산 전기영동 제품을 사용한 출판물 ( 부분)
[1] Luo J, Yang Q, Zhang X, et al. TFPI는 과독성 클레이드 2 C. difficile의 TcdB에 대한 결장 융기부 수용체입니다. Cell. 2022;185(6):980-994 . e15. doi:10.1016/j.cell.2022.02.010 (IF:41.584)
[2] Huang N, Chen H, Gong H, et al. SeHed, 스트레스 유발 과산화수소 제거 특성과 노화 방지 효과가 있는 새로운 유전자 발현 시스템. 신호 전달 및 표적 치료. 2022, 7, 235. doi: 10.1038/s41392-022-01047-2. (IF: 38.1)
[3] Zhang C, Zhou B, Gu F, et al. 미세펩타이드 PACMP 억제는 CtIP 및 폴리(ADP-리보실)화를 감소시켜 합성 치사 효과를 유발합니다 . mol Cell. 2022;82(7):1297-1312.e8. doi:10.1016/j.molcel.2022.01.020 (IF: 17.970)
[4] Zhu M, DaiX. 변형된 (p)ppGpp 수준에 의한 성장 억제는 대장균의 비최적 자원 할당 으로 인해 발생합니다. Nucleic Acids Res. 2019;47(9):4684-4693. doi:10. 1093/nar/gkz211 (IF:11.147)
[5] Rizwan HM, Zhimin L, HarsonowatiW, et al. 수확 후 패션프루트(Passiflora edulis) 부패를 제어하기 위한 곰팡이 병원균 식별 및 다중 오믹스 비교 경로 분석 결과 보라색이 노란색 품종보다 병원균에 더 강함 . j Fungi(Basel). 2021;7(10):879. 2021년 10월 19일 출판. doi:10.3390/jof 7100879 (IF:5.816)
[6] LiT, Zhou B, Luo Z, et al. SARS-CoV-2 변종 에 대한 광범위한 활동을 가진 중화 나노바디 의 구조적 특성 . Front Microbiol. 2022;13:875840. 2022년 6월 2일 출판. doi:10.3389/fmicb.2022. 875840 (IF:5.640)
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인용:
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