A Yeasen Biotech, com anos de experiência no campo de matérias-primas enzimáticas, tem fornecido matérias-primas de PCR de diagnóstico molecular de alta qualidade e custo-efetivas para empresas de IVD, instituições de testes terceirizadas e organizações de pesquisa. Isso inclui componentes únicos, como transcriptase reversa, inibidor de RNase, Taq DNA polimerase, uracil DNA glicosilase (enzima UDG/UNG), anticorpo de enzima Taq, dNTPs, bem como soluções de pré-mistura qPCR/RT-qPCR otimizadas para sistema, oferecendo desempenho superior e matérias-primas enzimáticas estáveis ​​para o desenvolvimento de kits de diagnóstico clínico/não clínico.

Kit de sonda RT-qPCR multiplex de uma etapa Hifair® V C58P2 (UDG Plus)

Descrição

Este master mix （Cat#13650ES）é um reagente projetado para reações de PCR quantitativa multiplex usando RNA como molde. Durante o procedimento experimental, a transcrição reversa e a PCR quantitativa são realizadas no mesmo tubo de reação, agilizando o fluxo de trabalho do laboratório e minimizando o risco de contaminação.

Os reagentes RT-qPCR de uma etapa integram o desempenho superior da transcriptase reversa e enzimas hot-start, complementados por um sistema de buffering otimizado, permitindo a detecção rápida e sensível de modelos de cópia de dígito único. Validados por vários mercados de clientes, incluindo doenças respiratórias, epidemias animais e sistemas de pesquisa, esses reagentes podem atender às necessidades de várias direções de aplicação.

Vantagens do produto

• Alta sensibilidade: O sistema de buffer cuidadosamente otimizado melhora a sensibilidade de detecção de modelos de baixa concentração de até 250 cópias/mL;
• Super estabilidade: O produto passou por testes de estabilidade em tempo real por 18 meses.
• Sistema antipoluição dUP/UDG: o sistema antipoluição dUTP/UDG foi introduzido para degradar a poluição por aerossol dos produtos de forma eficiente, reduzir falsos positivos e garantir resultados autênticos;
• Suporte ao programa rápido: compatível com programa rápido, 40 minutos podem produzir resultados.

Demonstração parcial do desempenho do produto

（1）Teste de sensibilidade

Os 13650 armazenados a -20°C por 18 meses (grupo experimental) e aqueles dentro do prazo de validade (grupo controle) foram testados simultaneamente para a diluição do gradiente (500 cópias/ml, 250 cópias/ml) do pseudovírus SARS-CoV-2, visando o gene ORF e o gene N. Oito poços replicados foram testados para cada concentração, com uma taxa de detecção de 100%. Além disso, não houve diferenças significativas nas formas de pico da curva de amplificação e nos valores de Ct.

Muito	FAMÍLIA (número de positivos)		VIC(número de positivos)
	250 cópias/ml	500 cópias/ml	250 cópias/ml	500 cópias/ml
grupo experimental	8/8	8/8	8/8	8/8
grupo de controle	8/8	8/8	8/8	8/8

（2）Teste de estabilidade em tempo real

Os 13650 armazenados a -20°C por 18 meses e aqueles dentro do prazo de validade.Ambos os grupos foram testados simultaneamente para o gene ORF do pseudovírus SARS-CoV-2 e o gene N em uma concentração de 1000 cópias/ml com 20 poços replicados. A taxa de detecção para ambos foi de 100%, e não houve diferenças significativas no formato das curvas de amplificação ou nos valores de Ct.

（3）desempenho estável após ciclos repetidos de congelamento e descongelamento

Submetendo o reagente 13650 a 30 e 50 ciclos de congelamento e descongelamento usando gelo seco, juntamente com reagentes armazenados normalmente a -20 °C e testando simultaneamente o gene ORF do pseudovírus SARS-CoV-2, os resultados indicaram que o desempenho do reagente 13650 não foi afetado após 50 ciclos de congelamento e descongelamento.

Usando 13650ES, o gene ORF e o gene N do pseudovírus SARS-CoV-2 foram detectados sob o mesmo sistema de reação com protocolos padrão e rápido. Os resultados mostraram que sob um sistema 4-plex, não houve diferença nas formas de pico da curva de amplificação e valores de Ct entre os dois protocolos.