Enzimas e nucleotídeos de mRNA de grau de GMP YEASEN para o desenvolvimento de vacinas e medicamentos

A pesquisa e formulação de vacinas de mRNA necessitam de uma gama diversificada de matérias-primas para garantir seu desenvolvimento bem-sucedido. Como uma força pioneira na indústria de enzimas moleculares, a Yeasen obteve sucesso na criação de várias enzimas e reagentes moleculares por meio de biotecnologia avançada de enzimas moleculares e técnicas de fermentação e purificação de proteínas em larga escala.

Para garantir tanto a qualidade do produto quanto a capacidade de produção, a Yeasen estabeleceu uma unidade de produção de nível GMP em Wuhan, capaz de satisfazer totalmente os requisitos de produção em escala industrial com uma capacidade anual superior a 5 bilhões de unidades. Além disso, a Yeasen se destaca como a primeira empresa chinesa a obter a certificação ISO 13485 para pesquisa, desenvolvimento, fabricação e distribuição de enzimas moleculares. Esta certificação assegura a qualidade, consistência e rastreabilidade de todos os seus reagentes.

1. Vantagem do GMP
2. Yeasen pode fornecer produtos de qualidade GMP
3. Yeasen adquiriu números DMF para muitos produtos
4. Cenários de aplicação dos produtos Yeasen
5. Matérias-primas para preparação da vacina de mRNA fornecidas pela Yeasen
6. Informações sobre pedidos

1. Vantagem do GMP

"Grau GMP" é um termo de marca que a Yeasen usa para descrever reagentes fabricados em instalações certificadas pela ISO 13485. Os reagentes de grau GMP da Yeasen são produzidos em conformidade com os padrões do sistema de gestão de qualidade ISO 13485 e com controles de processo mais rigorosos e registros de documentação completos. A Yeasen pode não apenas oferecer reagentes de alta qualidade, mas também fornecer documentos, auditorias de local e outros suportes aos nossos clientes.

Tabela 1. Vantagem do GMP

2. Yeasen pode fornecer produtos de qualidade GMP

Aproveitando ampla experiência e excelência técnica em desenvolvimento de enzimas e produção em escala industrial, a Yeasen estabeleceu uma instalação de ponta conhecida como "mRNAtools". Esta instalação, abrangendo 50.000 pés quadrados, adere aos regulamentos GMP e ostenta recursos de última geração, incluindo unidades de fermentação automatizadas de 2×1500L, equipamento de purificação em larga escala e recursos de liofilização. A mRNAtools se dedica a fornecer reagentes rigorosos que se alinham com a produção do cliente e os requisitos regulatórios.

A unidade de produção de enzimas moleculares da Yeasen, construída especificamente para produtos de grau GMP, protege a qualidade do produto tanto em nível de hardware quanto de software. Ela compreende uma equipe altamente qualificada de 70 profissionais, cada um possuindo ampla experiência em produção GMP. As operações de armazenagem e logística são modularizadas, garantindo o armazenamento seguro e o transporte eficiente dos produtos. Uma rede de distribuição multicêntrica nacional garante ainda mais um ciclo de fornecimento confiável.

3. Yeasen adquiriu números DMF para muitos produtos

Os arquivos mestres de medicamentos (DMFs) são documentos confidenciais enviados voluntariamente à Food & Drug Administration (FDA) dos EUA. Eles contêm informações detalhadas sobre instalações, processos ou artigos utilizados na produção, processamento, embalagem e armazenamento de produtos farmacêuticos humanos.

O FDA examina o conteúdo técnico de um DMF quando um fabricante de ingrediente farmacêutico ativo (API) faz referência a ele para dar suporte ao seu Pedido de Novo Medicamento Investigacional (IND), Pedido de Novo Medicamento (NDA), Pedido de Novo Medicamento Abreviado (ANDA) ou Pedido de Exportação. Os DMFs desempenham um papel fundamental nesses pedidos.Quando os fabricantes registram DMFs para materiais específicos, o processo de aprovação do FDA pode ser significativamente acelerado.

A Yeasen possui arquivos DMF que podem agilizar cronogramas de projetos. Se desejar, você pode solicitar autorização de referência para nossos DMFs para dar suporte à sua solicitação à FDA. Para iniciar a autorização de referência de nossos DMFs, envie gentilmente uma solicitação de Carta de Autorização à Yeasen, solicitando que forneçamos uma Carta de Autorização DMF específica do FDA Center.

4. Cenários de aplicação dos produtos Yeasen

4.1 Geração de Template

A linearização do plasmídeo é uma etapa indispensável durante a geração de moldes quando vetores plasmídeos são usados ​​como moldes de transcrição. À medida que a transcrição prossegue até o final dos moldes de DNA, a linearização do plasmídeo garante que transcrições de RNA de um comprimento e sequência definidos sejam geradas. A Yeasen fornece várias enzimas de restrição para atender às suas necessidades. Recomendamos selecionar enzimas de restrição que gerem extremidades rombas ou saliências de 5´.

4.2 Em vitro Transcrição ( IVT )

A transcrição in vitro é afetada por vários fatores. Enzimas, tampões e substratos modificados têm um grande impacto na eficiência da transcrição.

Com base na plataforma ZymeEditor, a YEASEN Biotech desenvolveu novas polimerases de RNA T7 que reduzem significativamente a geração de dsRNA durante o processo de transcrição in vitro (IVT) (T7 RNA polimerase, RNA ds baixo, 250 U/μL). Ele reduz muito a imunogenicidade do mRNA e, até certo ponto, aumenta a integridade do mRNA. Espera-se que esse desenvolvimento desempenhe um papel crucial no avanço do desenvolvimento de vacinas de mRNA e medicamentos contra o câncer.

Ao otimizar o tampão e ajustar o tipo de sal do substrato nucleotídico, melhoramos muito a eficiência da transcrição e reduzimos a produção de dsRNA.

Figura 2. Tris NTP pode aumentar muito a eficiência do lVT e reduzir a produção de dsRNA

4.3 Capping de mRNA

Como uma estrutura cap 5' reduz a imunogenicidade e é necessária para a tradução eficiente de mRNAs, é necessário adicionar estruturas cap às extremidades 5' do mRNA gerado pela transcrição.

Figura 3. Resultados da detecção da taxa de capitalização (detecção LC-MS)

4.4 Purificação de mRNA

A purificação é uma etapa indispensável para obter mRNAs de alta pureza.

5. Matérias-primas para preparação da vacina de mRNA fornecidas pela Yeasen

Atualmente, a Yeasen pode fornecer um conjunto completo de produtos no processo de produção de solução estoque de mRNA. Os produtos são estritamente controlados pela produção GMP e atendem totalmente aos requisitos da produção de vacina de mRNA.

Tabela 2.Matérias-primas para preparação da vacina de mRNA fornecidas pela Yeasen

Preparação do modelo		Transcrição in vitro
2× Hieff Canace AdvanceFast Mistura principal de PCR de alta fidelidade	10164ES	Kit de síntese de RNA de alto rendimento T7	10623ES
Solução de conjunto dNTP	10122ES	T7 RNA Polimerase	10625ES
Hieff Clone Universal Kit de clonagem em uma etapa	10922ES	Pirofosfatase, grau GMP inorgânico	10672ES
Ligase de DNA T4 dourada	10300ES	Inibidor de RNase murina grau GMP	10621ES
BspQI grau GMP	10664ES	DNase I	10611ES
BSA eu Grau GMP	10661ES	Solução de conjunto NTP	10133ES
RNAse R (20U/uL)	14615ES	Solução de sódio pseudo UTP grau GMP (100 mM)	10650ES
Xba eu	10662ES	Solução de sódio N1-Me-Pseudo UTP grau GMP (100 mM)	10651ES
Tampando		Purificação
Enzima de encapsulamento de vacínia mRNA grau GMP	10614ES	Limpador de RNA Hieff NGS™	12602ES
Tampa de mRNA 2´-O-Metiltransferase grau GMP	10612ES	Rack de separação magnética	80460ES
S-adenosilmetionina (SAM) grau GMP	10619ES	Kit ELISA de RNA fita dupla (dsRNA)	36717ES
ARCA (Anti Reverse Cap Analógico)	10681ES

6. Informações sobre pedidos

Os seguintes são produtos representativos oferecidos pela Yeasen. Tamanhos adicionais estão disponíveis.Nossos produtos são altamente otimizados para trabalhar em conjunto, para ajudar a garantir desempenho e reprodutibilidade superiores. Também podemos fornecer serviços personalizados. Se você estiver interessado em um produto que não está sendo mostrado, entre em contato conosco e trabalharemos com você para atender às suas necessidades.

Tabela 3. Informações para pedidos

Sobre a leitura:

Reagentes de grau GMP para síntese in vitro de mRNA

DNase I e suas aplicações em biomedicina

Referências:

[1] Chaudhary, N., Weissman, D., & Whitehead, KA (2021). Vacinas de mRNA para doenças infecciosas: princípios, administração e tradução clínica. Nature reviews. Descoberta de medicamentos, 20(11), 817–838.
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[3] Fuchs, AL, Neu, A. & Sprangers, R. Um método geral para produção em larga escala, rápida e econômica de 5'
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