Категория продукта

Принцип

Преимущества

Недостатки

Реагент для трансфекции липосом

1. Реагенты для трансфекции липосом содержат положительно заряженные липиды, которые связываются с отрицательно заряженными нуклеиновыми кислотами, образуя комплексы липидов и нуклеиновых кислот.

2. Эти комплексы притягиваются к отрицательно заряженной клеточной мембране.

3. Клетка поглощает комплексы в эндосомы посредством эндоцитоза.

4. Эффект «протонной губки» липидов в комплексах предотвращает закисление эндосом, приводящее к дестабилизации и разрыву мембраны, высвобождению комплексов в цитоплазму.

5. Малые нуклеиновые кислоты, такие как siRNA, miRNA или mRNA, могут работать в цитоплазме, в то время как ДНК для экспрессии необходимо проникнуть в ядро.

6. Попав в ядро, ДНК транскрибируется в мРНК и транслируется в белки, экспрессирующие чужеродный ген.

1. Реагенты для трансфекции липосом обеспечивают высокую эффективность при работе с различными клеточными линиями, включая трудно поддающиеся трансфекции первичные клетки.

2. Они универсальны, совместимы как с адгезивными, так и с суспензионными клетками, а также с различными нуклеиновыми кислотами, такими как ДНК, siRNA и miRNA.

3. Эти реагенты хорошо работают в средах, содержащих сыворотку, что позволяет избежать необходимости удаления сыворотки и, таким образом, свести к минимуму повреждение клеток.

1. Реагенты для трансфекции липосом могут быть токсичными для клеток, особенно в высоких концентрациях или в течение длительного времени, что может повлиять на выживаемость и функционирование клеток.

2. Они более дороги по сравнению с традиционными методами, такими как трансфекция фосфатом кальция.

3. Их применение in vivo ограничено из-за выведения из сыворотки, накопления в легочной ткани и способности вызывать сильные воспалительные реакции и высокую токсичность.

Остров Принца Эдуарда трансфекционный реагент

1. ПЭИ, положительно заряженный полимер, связывается с отрицательно заряженной ДНК, образуя комплексы ПЭИ-ДНК посредством электростатических взаимодействий.

2. Эти комплексы прикрепляются к отрицательно заряженной клеточной мембране.

3. Клетки поглощают комплексы ПЭИ-ДНК посредством эндоцитоза, образуя эндосомы.

4. Эффект «протонной губки» ПЭИ заставляет эндосомы набухать и лопаться в кислой среде, высвобождая комплексы в цитоплазму.

5.В цитоплазме связи ПЭИ-ДНК разрываются, позволяя ДНК проникнуть в ядро, где она транскрибируется и транслируется в белки.

1. Реагенты для трансфекции ПЭИ образуют стабильные комплексы с ДНК, повышая эффективность трансфекции.

2. Они обладают более низкой цитотоксичностью по сравнению с другими катионными полимерами, сохраняя жизнеспособность и функции клеток.

3. Реагенты ПЭИ представляют собой экономически эффективное решение, особенно для крупномасштабных трансфекций, таких как производство вирусных векторов.

4. Реагенты ПЭИ доступны в классе GMP для клинического и коммерческого производства, что гарантирует качество и соответствие требованиям.

1. Реагенты для трансфекции ПЭИ имеют ограниченную универсальность, в основном используются для ДНК и менее эффективны с другими нуклеиновыми кислотами, такими как мРНК, siRNA и miRNA.

2. Они показывают высокую эффективность в определенных типах клеток, таких как клетки HEK293, для упаковки вирусов и экспрессии белков, но плохо работают с клетками, которые трудно трансфицировать.

Реагент для трансфекции фосфата кальция

1. В буфере HEPES с фосфатом образуются сопреципитаты ДНК/фосфата кальция, где отрицательный заряд ДНК связывается с положительными ионами кальция.

2. Клетки поглощают эти копреципитаты, которые прилипают к их поверхности, посредством эндоцитоза, что является критическим этапом для эффективности трансфекции.

3. Внутри клеток копреципитаты высвобождают ДНК, что может привести к временной экспрессии или стабильной интеграции в геном.

1. Трансфекция с использованием фосфата кальция экономически эффективна и подходит для лабораторий с ограниченным бюджетом.

2. Его легко выполнить, он требует простых шагов и минимальных технических навыков.

3. Его можно использовать как для временной экспрессии белков, так и для создания стабильных линий клеток.

1. Эффективность трансфекции с использованием фосфата кальция изменчива и чувствительна к таким факторам, как pH и чистота ДНК, что может привести к неудачным трансфекциям, особенно с загрязненной ДНК.

2. Подходит не для всех типов клеток, в основном используется для клеток HEK293 и менее эффективен для первичных клеток и некоторых других типов клеток.