细胞转染是将外源核酸(如DNA、mRNA、siRNA、miRNA等)引入细胞的技术,在现代生物医学研究中起着至关重要的作用。随着科学研究的不断深入,对各种细胞类型的需求也越来越多样化,从常见的HEK293细胞到特殊类型的肿瘤细胞和原代细胞,每种细胞都有其独特的特性和要求。同样,不同类型的核酸也需要特定的转染策略,以确保高效、安全的基因传递。因此,选择合适的转染试剂对于实验的成功至关重要。

化学转染试剂是细胞生物学研究中不可缺少的工具,通过不同的机制将DNA、mRNA、siRNA、miRNA等核酸引入细胞,实现基因表达、沉默或功能研究。目前常用的化学转染试剂主要有脂质体转染试剂、PEI转染试剂、磷酸钙转染试剂等,每种试剂都有其独特的优势和适用场景。

表1:不同化学转染试剂有何区别

产品类别

原则

优点

缺点

脂质体转染试剂

1.脂质体转染试剂中含有带正电荷的脂质,可与带负电荷的核酸结合形成脂质-核酸复合物。

2. 这些复合物被带负电荷的细胞膜吸引。

3. 细胞通过内吞作用将复合物吞噬到内体中。

4. 复合物中脂质的“质子海绵”效应阻止了内体酸化,导致膜不稳定和破裂,将复合物释放到细胞质中。

5.小核酸如siRNA、miRNA或mRNA可以在细胞质中发挥作用,而DNA则需要进入细胞核才能表达。

6. 一旦进入细胞核,DNA就会转录成mRNA,并翻译成蛋白质,表达外来基因。

1. 脂质体转染试剂对各种细胞系均具有高转染效率,包括难以转染的原代细胞。

2.它们用途广泛,既适用于粘附细胞,也适用于悬浮细胞,以及各种核酸,如DNA、siRNA和miRNA。

3. 这些试剂在含血清的培养基中效果良好,避免了去除血清的需要,从而最大限度地减少细胞损伤。

1. 脂质体转染试剂对细胞有毒性,尤其是在高浓度或长时间使用时,可能会影响细胞的存活和功能。

2. 与磷酸钙转染等传统方法相比,它们更昂贵。

3. 由于血清清除率、肺组织蓄积以及可能引起强烈的炎症反应和高毒性,它们在体内的应用受到限制。

爱德华王子岛 转染试剂

1. PEI 是一种带正电荷的聚合物,它通过静电相互作用与带负电荷的 DNA 结合形成 PEI-DNA 复合物。

2. 这些复合物附着在带负电荷的细胞膜上。

3. 细胞通过内吞作用吞噬 PEI-DNA 复合物,形成内体。

4. PEI的“质子海绵”效应导致内体在酸性环境中膨胀、破裂,将复合物释放到细胞质中。

5.在细胞质中,PEI-DNA 键断裂,使 DNA 进入细胞核,在那里转录并翻译成蛋白质。

1. PEI转染试剂与DNA形成稳定的复合物,提高转染效率。

2. 与其他阳离子聚合物相比,它们具有较低的细胞毒性,可保持细胞活力和功能。

3. PEI 试剂提供了一种经济高效的解决方案,特别是对于病毒载体生产等大规模转染。

4. PEI 试剂为 GMP 级,可用于临床和商业生产,确保质量和合规性。

1. PEI 转染试剂用途有限,主要用于 DNA,对 mRNA、siRNA 和 miRNA 等其他核酸效果较差。

2. 它们在特定细胞类型(例如 HEK293 细胞)中表现出较高的病毒包装和蛋白质表达效率,但在难以转染的细胞中表现不佳。

磷酸钙转染试剂

1. DNA/磷酸钙在含有磷酸盐的 HEPES 缓冲液中形成共沉淀,其中 DNA 的负电荷与正钙离子结合。

2. 细胞通过内吞作用吞噬这些粘附在其表面的共沉淀物,这是转染效率的关键步骤。

3. 在细胞内部,共沉淀物释放 DNA,这可以导致瞬时表达或稳定整合到基因组中。

1.磷酸钙转染成本效益高,适合预算有限的实验室。

2. 操作简单,只需简单的步骤和最少的技术技能。

3. 它既可用于瞬时蛋白质表达,也可用于建立稳定的细胞系。

1. 磷酸钙的转染效率不稳定,且对 pH 值和 DNA 纯度等因素敏感,这可能导致转染失败,尤其是使用不纯的 DNA 时。

2.不是适用于所有细胞类型,主要用于HEK293细胞,对原代细胞和一些其他细胞类型效果较差。

Yeasen 生物科技凭借强大的研发能力和生产技术团队,不断优化DNA、RNA转染试剂配方,改进生产工艺,推出了以阳离子脂质体、阳离子聚合物为主的多元化产品线,满足科研机构和企业在转染试剂领域的广泛需求,涵盖了转染试剂的各类应用领域,具有以下优势:

广泛适用性: 能够有效转染质粒DNA、siRNA、miRNA和mRNA。

高转染效率: 细胞转染效率超过90%,满足多种质粒共转染的需要。

已在多种细胞系中验证: 在超过40种不同的细胞系中表现出良好的转染效率。

应用范围广泛: 用于稳定细胞系构建、瞬时蛋白质表达以及 AAV 和 LV 病毒包装。

文献中引用频率高: 被超过 400 篇高影响力出版物引用,总影响因子超过 3000+。

如何选择适合您需求的转染试剂

鉴于不同细胞类型和核酸(如DNA、mRNA、siRNA等)对转染效率和条件的特殊要求,),选择合适的转染试剂对于实验的成功至关重要。根据实验的具体需求,选择能够优化转染效率、最大限度降低细胞毒性的转染试剂,以保证实验数据的准确性和实验结果的稳健性。 Yeasen Biotech 提供一系列针对不同应用场景优化的产品,确保您能够找到最适合您的研究目的的转染试剂并满足您的特定实验需求。


病例陈述

在 6 孔板系统中,使用 Yeasen 40802ES 转染试剂和竞争对手的转染试剂。转染后 48 小时在显微镜下观察转染细胞中的 GFP 表达。 Yeasen的转染试剂非常出色。

在12孔板中,HEK293细胞转染共1 μg质粒DNA;使用3 μL转染试剂,可以成功共转染两个质粒。

客户案例

已在多种细胞系中验证,应用范围更为广泛。

单元格

单元格

单元格

单元格

单元格

293F

碳酸氢钠

HEK 293T

LM3

NIH-3T3

293T

CHO-K1

HEK293

MCF10A

PC12

3t3

COS-7

海拉

MCF-7

镭w264。7

5-8F

东风-1

乙肝

MDA-MB-231

雷电华

A549

H520

肝素1-6

中东呼吸联合会

SGC-7901

BV-2

H9

肝癌

MKN-28

SMCC7721

C2C12

H9c2

脐静脉内皮细胞

N2A

维罗

C6

肝细胞癌

伦蒂 X-293T

NCI-H1975

HCT116

WRL-68

THP-1

糖尿病肾病

Hep2C

更多的…

产品列表

猫号

产品名称

核酸

应用

40802ES

Hieff Trans® 脂质体转染试剂

脱氧核糖核酸

高效脂质体转染试剂

40804ES

Hieff Trans®Polybrene(六亚甲基溴化铵)(10 毫克/毫升)

路威酩轩

增强慢病毒感染能力。

40806ES

Hieff Trans® 体外 siRNA/miRNA 转染试剂

siRNA、miRNA、反义寡核苷酸

具有高敲低效率的 siRNA 和 miRNA 特异性转染试剂。

40808ES

Hieff Trans® 通用转染试剂

DNA、siRNA、miRNA

升级版的脂质体转染试剂,可对多种细胞类型进行DNA和RNA转染,对难以转染的细胞依然表现出良好的效果。

40809ES

Hieff Trans® mRNA 转染试剂

信使核糖核酸

mRNA特异性转染试剂,在多种细胞类型中具有高转染效率。

40815ES

Hieff Trans®聚乙烯亚胺线性(PEI)MW25000

脱氧核糖核酸

广泛适用于蛋白质表达和病毒包装(粉末形式)。

40816ES

Hieff Trans® 聚乙烯亚胺线性 (PEI) MW40000(快速裂解)

脱氧核糖核酸

40820ES

PEI 转染试剂

脱氧核糖核酸

专用于病毒包装的转染试剂,能够实现更高的 AAV 和 LV 病毒包装产量

40821ES

PEI-GMP转染试剂

脱氧核糖核酸

40823ES

Ultra PEI-AAV 转染试剂

脱氧核糖核酸

最高的转染效率。特别适合悬浮培养生产AAV,产量更高。

被多种高影响力出版物引用,确保质量(部分引用参考文献列表)

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