細胞轉染是將外源核酸(如DNA、mRNA、siRNA、miRNA等)引入細胞的技術,在現代生物醫學研究中發揮至關重要的作用。隨著科學研究的不斷深入,對各種細胞類型的需求也愈加多樣化,從常見的HEK293細胞到特殊類型的腫瘤細胞和原代細胞,每種細胞都有其獨特的特性和要求。同樣,不同類型的核酸也需要特定的轉染策略以確保高效、安全的基因傳遞。因此,選擇正確的轉染試劑對於實驗的成功至關重要。
化學轉染試劑是細胞生物學研究中不可或缺的工具,它透過不同的機制將DNA、mRNA、siRNA、miRNA等核酸引入細胞,實現基因表現、沉默或功能研究。目前常用的化學轉染試劑主要有脂質體轉染試劑、PEI轉染試劑、磷酸鈣轉染試劑等,每種試劑都有其獨特的優點和適用情境。
表1:不同化學轉染試劑有何差別
產品類別 | 原則 | 優點 | 缺點 |
脂質體轉染試劑 | 1.脂質體轉染試劑中含有帶正電荷的脂質,可與帶負電荷的核酸結合形成脂質-核酸複合物。 2. 這些複合物被帶負電荷的細胞膜吸引。 3. 細胞透過內吞作用將複合物吞噬到內體。 4. 複合物中脂質的「質子海綿」效應阻止了內體酸化,導致膜不穩定和破裂,將複合物釋放到細胞質中。 5.小核酸如siRNA、miRNA或mRNA可以在細胞質中發揮作用,而DNA則需要進入細胞核才能表現。 6. 一旦進入細胞核,DNA就會轉錄成mRNA,並翻譯成蛋白質,表達外來基因。 | 1. 脂質體轉染試劑對各種細胞株均具有高轉染效率,包括難以轉染的原代細胞。 2.它們用途廣泛,既適用於黏附細胞,也適用於懸浮細胞,以及各種核酸,如DNA、siRNA和miRNA。 3. 這些試劑在含血清的培養基中效果良好,避免了去除血清的需要,從而最大限度地減少細胞損傷。 | 1. 脂質體轉染試劑對細胞有毒性,尤其是在高濃度或長時間使用時,可能會影響細胞的存活和功能。 2. 與磷酸鈣轉染等傳統方法相比,它們更昂貴。 3. 由於血清清除率、肺組織蓄積以及可能引起強烈的發炎反應和高毒性,它們在體內的應用受到限制。 |
愛德華王子島 轉染試劑 | 1. PEI 是一種帶正電荷的聚合物,它透過靜電相互作用與帶負電荷的 DNA 結合形成 PEI-DNA 複合物。 2. 這些複合物附著在帶負電荷的細胞膜上。 3. 細胞以內吞作用吞噬 PEI-DNA 複合物,形成內體。 4. PEI的「質子海綿」效應導致內體在酸性環境中膨脹、破裂,將複合物釋放到細胞質中。 5.在細胞質中,PEI-DNA 鍵斷裂,使 DNA 進入細胞核,在那裡轉錄並翻譯成蛋白質。 | 1. PEI轉染試劑與DNA形成穩定的複合物,提高轉染效率。 2. 與其他陽離子聚合物相比,它們具有較低的細胞毒性,可維持細胞活力和功能。 3. PEI 試劑提供了一種經濟高效的解決方案,特別是對於病毒載體生產等大規模轉染。 4. PEI 試劑為 GMP 級,可用於臨床和商業生產,確保品質和合規性。 | 1. PEI 轉染試劑用途有限,主要用於 DNA,對 mRNA、siRNA 和 miRNA 等其他核酸效果較差。 2. 它們在特定細胞類型(例如 HEK293 細胞)中表現出較高的病毒包裝和蛋白質表現效率,但在難以轉染的細胞中表現不佳。 |
磷酸鈣轉染試劑 | 1. DNA/磷酸鈣在含有磷酸鹽的 HEPES 緩衝液中形成共沉澱,其中 DNA 的負電荷與正鈣離子結合。 2. 細胞透過內吞作用吞噬這些黏附在其表面的共沉澱物,這是轉染效率的關鍵步驟。 3. 在細胞內部,共沉澱物釋放 DNA,這可以導致瞬時表達或穩定地整合到基因組中。 | 1.磷酸鈣轉染成本效益高,適合預算有限的實驗室。 2. 操作簡單,只需簡單的步驟和最少的技術技能。 3. 它既可用於瞬時蛋白質表達,也可用於建立穩定的細胞系。 | 1. 磷酸鈣的轉染效率不穩定,且對 pH 值和 DNA 純度等因素敏感,這可能導致轉染失敗,尤其是使用不純的 DNA 時。 2.不是適用於所有細胞類型,主要用於HEK293細胞,對原代細胞和一些其他細胞類型效果較差。 |
廣泛適用性: 能有效轉染質粒DNA、siRNA、miRNA和mRNA。
高轉染效率: 細胞轉染效率超過90%,滿足多種質粒共轉染的需求。
已在多種細胞系中驗證: 在超過40種不同的細胞系中表現出良好的轉染效率。
應用範圍廣泛: 用於穩定細胞系構建、瞬時蛋白質表現以及 AAV 和 LV 病毒包裝。
文獻中引用頻率高: 超過 400 篇高影響力出版品引用,總影響因子超過 3000+。
如何選擇適合您需求的轉染試劑
鑑於不同細胞類型和核酸(如DNA、mRNA、siRNA等)對轉染效率和條件的特殊要求,),選擇正確的轉染試劑對於實驗的成功至關重要。根據實驗的具體需要,選擇能夠優化轉染效率、最大限度降低細胞毒性的轉染試劑,確保實驗數據的準確性和實驗結果的穩健性。
病例陳述

在 6 孔板系統中,使用
在12孔板中,將共1μg質粒DNA轉染HEK293細胞;使用3 μL轉染試劑,可以成功共轉染兩個質粒。
客戶案例
已在多種細胞系中驗證,應用範圍更為廣泛。
單元格 | 單元格 | 單元格 | 單元格 | 單元格 |
293F | 碳酸氫鈉 | HEK 293T | LM3 | NIH-3T3 |
293T | CHO-K1 | HEK293 | MCF10A | PC12 |
3t3 | COS-7 | 海拉 | MCF-7 | 鐳w264。7 |
5-8F | 東風-1 | 乙肝 | MDA-MB-231 | 雷電華 |
A549 | H520 | 肝素1-6 | 中東呼吸聯合會 | SGC-7901 |
BV-2 | H9 | 肝癌 | MKN-28 | SMCC7721 |
C2C12 | H9c2 | 臍靜脈內皮細胞 | N2A | 維羅 |
C6 | 鈣調蛋白 | 倫蒂 X-293T | NCI-H1975 | HCT116 |
WRL-68 | THP-1 | 糖尿病腎病變 | Hep2C | 更多的… |
產品列表
貓號 | 產品名稱 | 核酸 | 應用 |
40802ES | 脫氧核糖核酸 | 高效脂質體轉染試劑 | |
40804ES | 路威酩軒 | 增強慢病毒感染能力。 | |
40806ES | siRNA、miRNA、反義寡核苷酸 | 具有高敲低效率的 siRNA 和 miRNA 特異性轉染試劑。 | |
40808ES | DNA、siRNA、miRNA | 升級版的脂質體轉染試劑,可對多種細胞類型進行DNA和RNA轉染,對難以轉染的細胞仍能表現出良好的效果。 | |
40809ES | 信差核糖核酸 | mRNA特異性轉染試劑,在多種細胞類型中具有高轉染效率。 | |
40815ES | 脫氧核糖核酸 | 廣泛適用於蛋白質表現和病毒包裝(粉末形式)。 | |
40816ES | 脫氧核糖核酸 | ||
40820ES | 脫氧核糖核酸 | 專用於病毒包裝的轉染試劑,能夠實現更高的 AAV 和 LV 病毒包裝產量 | |
40821ES | 脫氧核糖核酸 | ||
40823ES | 脫氧核糖核酸 | 最高的轉染效率。特別適合懸浮培養生產AAV,產量較高。 |
被多種高影響力出版物引用,確保品質(部分引用參考文獻清單)
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