細胞轉染是將外源核酸(如DNA、mRNA、siRNA、miRNA等)引入細胞的技術,在現代生物醫學研究中發揮至關重要的作用。隨著科學研究的不斷深入,對各種細胞類型的需求也愈加多樣化,從常見的HEK293細胞到特殊類型的腫瘤細胞和原代細胞,每種細胞都有其獨特的特性和要求。同樣,不同類型的核酸也需要特定的轉染策略以確保高效、安全的基因傳遞。因此,選擇正確的轉染試劑對於實驗的成功至關重要。

化學轉染試劑是細胞生物學研究中不可或缺的工具,它透過不同的機制將DNA、mRNA、siRNA、miRNA等核酸引入細胞,實現基因表現、沉默或功能研究。目前常用的化學轉染試劑主要有脂質體轉染試劑、PEI轉染試劑、磷酸鈣轉染試劑等,每種試劑都有其獨特的優點和適用情境。

表1:不同化學轉染試劑有何差別

產品類別

原則

優點

缺點

脂質體轉染試劑

1.脂質體轉染試劑中含有帶正電荷的脂質,可與帶負電荷的核酸結合形成脂質-核酸複合物。

2. 這些複合物被帶負電荷的細胞膜吸引。

3. 細胞透過內吞作用將複合物吞噬到內體。

4. 複合物中脂質的「質子海綿」效應阻止了內體酸化,導致膜不穩定和破裂,將複合物釋放到細胞質中。

5.小核酸如siRNA、miRNA或mRNA可以在細胞質中發揮作用,而DNA則需要進入細胞核才能表現。

6. 一旦進入細胞核,DNA就會轉錄成mRNA,並翻譯成蛋白質,表達外來基因。

1. 脂質體轉染試劑對各種細胞株均具有高轉染效率,包括難以轉染的原代細胞。

2.它們用途廣泛,既適用於黏附細胞,也適用於懸浮細胞,以及各種核酸,如DNA、siRNA和miRNA。

3. 這些試劑在含血清的培養基中效果良好,避免了去除血清的需要,從而最大限度地減少細胞損傷。

1. 脂質體轉染試劑對細胞有毒性,尤其是在高濃度或長時間使用時,可能會影響細胞的存活和功能。

2. 與磷酸鈣轉染等傳統方法相比,它們更昂貴。

3. 由於血清清除率、肺組織蓄積以及可能引起強烈的發炎反應和高毒性,它們在體內的應用受到限制。

愛德華王子島 轉染試劑

1. PEI 是一種帶正電荷的聚合物,它透過靜電相互作用與帶負電荷的 DNA 結合形成 PEI-DNA 複合物。

2. 這些複合物附著在帶負電荷的細胞膜上。

3. 細胞以內吞作用吞噬 PEI-DNA 複合物,形成內體。

4. PEI的「質子海綿」效應導致內體在酸性環境中膨脹、破裂,將複合物釋放到細胞質中。

5.在細胞質中,PEI-DNA 鍵斷裂,使 DNA 進入細胞核,在那裡轉錄並翻譯成蛋白質。

1. PEI轉染試劑與DNA形成穩定的複合物,提高轉染效率。

2. 與其他陽離子聚合物相比,它們具有較低的細胞毒性,可維持細胞活力和功能。

3. PEI 試劑提供了一種經濟高效的解決方案,特別是對於病毒載體生產等大規模轉染。

4. PEI 試劑為 GMP 級,可用於臨床和商業生產,確保品質和合規性。

1. PEI 轉染試劑用途有限,主要用於 DNA,對 mRNA、siRNA 和 miRNA 等其他核酸效果較差。

2. 它們在特定細胞類型(例如 HEK293 細胞)中表現出較高的病毒包裝和蛋白質表現效率,但在難以轉染的細胞中表現不佳。

磷酸鈣轉染試劑

1. DNA/磷酸鈣在含有磷酸鹽的 HEPES 緩衝液中形成共沉澱,其中 DNA 的負電荷與正鈣離子結合。

2. 細胞透過內吞作用吞噬這些黏附在其表面的共沉澱物,這是轉染效率的關鍵步驟。

3. 在細胞內部,共沉澱物釋放 DNA,這可以導致瞬時表達或穩定地整合到基因組中。

1.磷酸鈣轉染成本效益高,適合預算有限的實驗室。

2. 操作簡單,只需簡單的步驟和最少的技術技能。

3. 它既可用於瞬時蛋白質表達,也可用於建立穩定的細胞系。

1. 磷酸鈣的轉染效率不穩定,且對 pH 值和 DNA 純度等因素敏感,這可能導致轉染失敗,尤其是使用不純的 DNA 時。

2.不是適用於所有細胞類型,主要用於HEK293細胞,對原代細胞和一些其他細胞類型效果較差。

Yeasen 生物技術憑藉其強大的研發能力和生產技術團隊,不斷優化DNA和RNA轉染試劑的配方並改進生產流程。該公司推出了以陽離子脂質體和陽離子聚合物為基礎的多元化產品系列,滿足轉染試劑領域科學研究機構和企業的廣泛需求。這些產品涵蓋了轉染試劑的各個應用領域,並具有以下優勢:

廣泛適用性: 能有效轉染質粒DNA、siRNA、miRNA和mRNA。

高轉染效率: 細胞轉染效率超過90%,滿足多種質粒共轉染的需求。

已在多種細胞系中驗證: 在超過40種不同的細胞系中表現出良好的轉染效率。

應用範圍廣泛: 用於穩定細胞系構建、瞬時蛋白質表現以及 AAV 和 LV 病毒包裝。

文獻中引用頻率高: 超過 400 篇高影響力出版品引用,總影響因子超過 3000+。

如何選擇適合您需求的轉染試劑

鑑於不同細胞類型和核酸(如DNA、mRNA、siRNA等)對轉染效率和條件的特殊要求,),選擇正確的轉染試劑對於實驗的成功至關重要。根據實驗的具體需要,選擇能夠優化轉染效率、最大限度降低細胞毒性的轉染試劑,確保實驗數據的準確性和實驗結果的穩健性。 Yeasen Biotech 提供一系列針對不同應用情境最佳化的產品,確保您能夠找到最適合您的研究目的的轉染試劑並滿足您的特定實驗需求。


病例陳述

在 6 孔板系統中,使用 Yeasen 40802ES 轉染試劑和競爭對手的轉染試劑。轉染後48小時在顯微鏡下觀察轉染細胞中GFP的表現。的表現 Yeasen的轉染試劑非常出色。

在12孔板中,將共1μg質粒DNA轉染HEK293細胞;使用3 μL轉染試劑,可以成功共轉染兩個質粒。

客戶案例

已在多種細胞系中驗證,應用範圍更為廣泛。

單元格

單元格

單元格

單元格

單元格

293F

碳酸氫鈉

HEK 293T

LM3

NIH-3T3

293T

CHO-K1

HEK293

MCF10A

PC12

3t3

COS-7

海拉

MCF-7

鐳w264。7

5-8F

東風-1

乙肝

MDA-MB-231

雷電華

A549

H520

肝素1-6

中東呼吸聯合會

SGC-7901

BV-2

H9

肝癌

MKN-28

SMCC7721

C2C12

H9c2

臍靜脈內皮細胞

N2A

維羅

C6

鈣調蛋白

倫蒂 X-293T

NCI-H1975

HCT116

WRL-68

THP-1

糖尿病腎病變

Hep2C

更多的…

產品列表

貓號

產品名稱

核酸

應用

40802ES

Hieff Trans® 脂質體轉染試劑

脫氧核糖核酸

高效脂質體轉染試劑

40804ES

Hieff Trans®Polybrene(六亞甲基溴化銨)(10 毫克/毫升)

路威酩軒

增強慢病毒感染能力。

40806ES

Hieff Trans® 體外 siRNA/miRNA 轉染試劑

siRNA、miRNA、反義寡核苷酸

具有高敲低效率的 siRNA 和 miRNA 特異性轉染試劑。

40808ES

Hieff Trans® 通用轉染試劑

DNA、siRNA、miRNA

升級版的脂質體轉染試劑,可對多種細胞類型進行DNA和RNA轉染,對難以轉染的細胞仍能表現出良好的效果。

40809ES

Hieff Trans® mRNA 轉染試劑

信差核糖核酸

mRNA特異性轉染試劑,在多種細胞類型中具有高轉染效率。

40815ES

Hieff Trans®聚乙烯亞胺線性(PEI)MW25000

脫氧核糖核酸

廣泛適用於蛋白質表現和病毒包裝(粉末形式)。

40816ES

Hieff Trans® 聚乙烯亞胺線性 (PEI) MW40000(快速裂解)

脫氧核糖核酸

40820ES

PEI 轉染試劑

脫氧核糖核酸

專用於病毒包裝的轉染試劑,能夠實現更高的 AAV 和 LV 病毒包裝產量

40821ES

PEI-GMP轉染試劑

脫氧核糖核酸

40823ES

Ultra PEI-AAV 轉染試劑

脫氧核糖核酸

最高的轉染效率。特別適合懸浮培養生產AAV,產量較高。

被多種高影響力出版物引用,確保品質(部分引用參考文獻清單)

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