——更多基因分型，更少時間和更少試劑
基於 PCR 的基因分型和其他實驗通常需要從樣本中純化基因組 DNA。當需要檢測的樣本很多時，純化基因組DNA的過程費時、重複，而且成本高。
智慧 PCR：直接 PCR
圖1 直接PCR擴增工作流程
A.直接法：取少量樣本直接加入PCR Master Mix進行PCR鑑定。技術優勢
直接：無需耗時且昂貴的 DNA 純化。
快速：10分鐘完成模板製備，30分鐘完成PCR反應。
簡單：無需切割或研磨即可裂解樣品，且 PCR 混合物處於預混合形式，從而減少了移液步驟的數量。
節省：所用材料量少。
高通量：裂解反應可在96孔板中完成。
抗抑制：對各種動物、植物樣本有耐受性。
Direct PCR Kit實驗流程
本系列產品採用獨特的蛋白酶裂解系統來裂解樣品。裂解液可直接作為模板，與試劑盒中提供的PCR Master Mix配對進行基因擴增。
圖2 小鼠組織直接PCR實驗流程
圖。3 植物組織直接PCR實驗流程
直接 PCR 產品選擇表
| 產品系列 | 小鼠直接PCR第二代 | |||
| 產品編號 | 10189ES | 10185ES | 10188ES | 10187ES |
| 規格 | 20 噸/50 噸/200 噸/500 噸 | 50噸/200噸 | 20 噸/50 噸/200 噸/500 噸 | 50噸/200噸 |
| 特徵 | ||||
| 擴增子長度 | ≤5kb | ≤1kb | ≤8kb | ≤1kb |
| 延伸時間 (s/kb) | 3-20秒 | 30 秒 | ≤2kb：3-5秒 ≤8kb：10秒 | 60 秒 |
| 適用生物 | 小鼠、大鼠 | 小鼠、大鼠 | 人類、老鼠、山羊、雞、豬等。 | 米、玉米、煙草、油菜籽、小麥、大豆等。 |
| 適用組織/材料類型 | 老鼠尾巴、老鼠耳朵、腳趾（有肌肉）等器官 | 老鼠尾巴、老鼠耳朵、腳趾（有肌肉）等器官 | 含有常見抗凝血劑（如 EDTA、肝素、檸檬酸鹽）的新鮮血液、冷藏（冷凍）血液以及商用乾血斑（如 Whatman903）® 和自由貿易協定® | 嫩葉、老葉、幼苗、嫩莖 |
| 範例用法 | 組織：5 毫克 鼠尾：1-5 毫米 | 組織：5-10 毫克 鼠尾：1-5 毫米 | 全血：0。5%-20% 沃特曼® 乾血斑：1 mm2 | 葉：1-10毫米 種子：1-3毫米 |
| 基因組釋放時間 | 5-10分鐘 | 15 分鐘 | 0-3分鐘 | 0-10 分鐘 |
| 產品最終結構 | 鈍端 | 鈍端 | 鈍端 | 鈍端 |
| 退火溫度 | 溫度-(2~5)℃ | 溫度-(2~5)℃ | 溫度-(1~2)℃ | 溫度-(2~5)℃ |
| GC 裁剪範圍 | 29-70％ | 30-70% | 30-75% | 40-65％ |
| 5'-3' 核酸外切酶活性 | 是的 | 是的 | 是的 | 是的 |
| 應用 | ||||
| 基因分型 | 是的 | 是的 | 是的 | 是的 |
| 多重PCR | 最多 5X |
| 最多 3-4 倍 |
|
| 直接樣本擴增 | 是的 | 是的 | 是的 | 是的 |
| 其他功能 | ||||
| 電泳指示劑 | 無色 | 藍色的 | 無色 | 藍色的 |
| 熱啟動 | 是的 | 是的 | 是的 | 是的 |
| 預混/套裝 | 套件（含混合料） | 套件（含混合料） | 套件（含混合液+緩衝液） | 套件（含混合料） |
產品優勢
改良的Taq DNA聚合酶是直接PCR的保證：它對抑制劑有超強的耐受性。
當使用未純化的樣本作為模板時，會引入許多抑制PCR反應的成分。採用普通的PCR反應體系和Taq DNA聚合酶很難達到理想的效果，甚至無法進行PCR擴增。此系列試劑盒中的PCR Mix為配方優化的預混料，採用改良的Taq DNA Polymerase，增加了與模板DNA的結合能力，並對常見的PCR抑制劑具有更高的耐受性，從而具有更廣泛的模板適應性。
圖4 Direct PCR Kit中的PCR Mix對雜質的耐受性較高。 使用不同PCR Mixes進行PCR時採用相同量的模板，並在系統中加入不同濃度的PCR反應抑制劑。比較不同條件下PCR產物的量。
是宜生 針對不同的樣品開發了一系列的產品：
- 一、囓齒類特異性：小鼠組織直接 PCR 試劑盒 Plus (10189ES)
適用樣本：小鼠組織（如小鼠尾巴、小鼠耳朵、小鼠腳趾等）
- 擴增效率高（長度、速度、GC 相容性）
圖 5 小鼠組織直接 PCR 試劑盒 Plus 擴增不同組織的裂解物。 1：質粒； 2：鼠耳； 3：老鼠尾巴； 4：肝臟。裂解條件：70℃裂解10分鐘，95℃滅活5分鐘。目標片段是 1 千位元組, 2 千字節, 3 kb和6 kb，延伸時間分別設定為3、5、10和20秒/kb。米： 10510ES60 (
- 廣泛的模板相容性（10189ES）
圖6 使用小鼠組織直接 PCR 試劑盒 Plus 直接裂解（70°C，10 分鐘）並擴增人類 293 細胞 （1）、唾液 （2）頭皮組織 （3）。所有樣品均顯示出清晰的目標條帶，M:10510ES60（
- 二.多物種血液通用類型：血液先進直接 PCR 試劑盒 (10188ES)
- 擴增增長度可達 8 kb
圖 7 使用 Blood Advanced Direct PCR Kit 直接從人類全血中擴增不同長度的 DNA 片段。血液樣本保存於-20℃，以EDTA作為抗凝血劑。血液模板濃度為10％，延伸時間設定為10秒/kb。手機：10510ES60 (
- 高耐受性
圖8A： Blood Advanced Direct PCR Kit 用於從人類 EDTA 抗凝血全血直接擴增 2 kb、GC 含量為 71% 的 DNA 片段。血液模板濃度0.5-50%梯度設置，延伸時間設定為10sec/kb。乙： Blood Advanced Direct PCR Kit用於從小鼠EDTA抗凝血全血直接擴增2.2 kb、GC含量67%的DNA片段。血液模板濃度設定為0.5-50%，延伸時間為10秒/kb。手機：10510ES60 (
- 三植物特異性類型：植物組織直接 PCR 試劑盒（10187ES）
- 已通過多種植物樣本驗證
圖9 不同類型植物葉組織直接擴增結果。 M：100 bp DNA 梯子。 C：以對應植物純化的基因組DNA作為模板。 1-2：葉組織裂解物作為模板。循環次數：30次。
客戶案例
- 一、小鼠基因型鑑定
廣州某生物公司：
圖 10 使用小鼠直接 PCR 試劑盒 (10189ES) 擴增小鼠尾部。目標基因：500 bp；裂解時間：10分鐘； PCR反應體系：25μL，延伸時間：5sec/kb。
- 二.水稻基因直接擴增
二十 大學
圖11 使用Plant Direct PCR Kit（10187ES）擴增水稻相關基因。
R興高采烈 磷產品
| 產品定位 | 產品名稱 | 產品編號 | 產品規格 |
| 高品質瓊脂糖 | 10208ES60/76 | 100克/500克 | |
| 核酸染色（紫外光下） | 10202ES76 | 500 μL | |
| PCR快速升級，可進行菌落PCR，適合複雜模板擴增 | 10167ES03/08 | 1毫升/5×1毫升 |