Yeasen GMP -kvalitet mRNA -enzymer og nukleotider til vaccine- og lægemiddeludvikling

Forskningen og formuleringen af ​​mRNA-vacciner nødvendiggør en bred vifte af råmaterialer for at sikre deres succesfulde udvikling. Som en banebrydende kraft i den molekylære enzymindustri har Yeasen opnået succes med at skabe forskellige molekylære enzymer og reagenser gennem avanceret molekylær enzymbioteknologi og storstilede proteinfermenterings- og oprensningsteknikker.

For at garantere både produktkvalitet og produktionskapacitet har Yeasen etableret et produktionsanlæg på GMP-niveau i Wuhan, der fuldt ud kan opfylde produktionskrav i industriel skala med en årlig kapacitet på over 5 milliarder enheder. Yeasen står desuden som den første kinesiske virksomhed, der opnåede ISO 13485-certificeringen for forskning, udvikling, fremstilling og distribution af molekylære enzymer. Denne certificering sikrer kvaliteten, konsistensen og sporbarheden af ​​alle deres reagenser.

1. Fordel ved GMP
2. Yeasen kan levere GMP-produkter
3. Yeasen erhvervede DMF-numre for mange produkter
4. Anvendelsesscenarier for Yeasen-produkter
5. Råmaterialer til fremstilling af mRNA-vaccine leveret af Yeasen
6. Bestillingsoplysninger

1. Fordel ved GMP

"GMP-grade" er et branding-udtryk, som Yeasen bruger til at beskrive reagenser fremstillet på ISO 13485-certificerede faciliteter. Yeasens GMP-grade reagenser er produceret i overensstemmelse med ISO 13485 kvalitetsstyringssystemstandarder og med strengere proceskontrol og komplette dokumentationsposter. Yeasen kan ikke kun tilbyde reagenser af høj kvalitet, men også levere dokumenter, siterevisioner og anden support til vores kunder.

Tabel 1. Fordel ved GMP

2. Yeasen kan levere GMP-produkter

Ved at udnytte omfattende ekspertise og teknisk ekspertise inden for enzymudvikling og produktion i industriel skala har Yeasen etableret en banebrydende facilitet kendt som "mRNAtools." Denne facilitet, der strækker sig over 50.000 kvadratfod, overholder GMP-reglerne og kan prale af state-of-the-art funktioner, herunder 2×1500L automatiserede fermenteringsenheder, storstilet rensningsudstyr og lyofiliseringsfunktioner. mRNAtools er dedikeret til at levere stringente reagenser, der stemmer overens med kundens produktion og regulatoriske krav.

Yeasens anlæg til fremstilling af molekylære enzymer, specialbygget til GMP-produkter, sikrer produktkvalitet på både hardware- og softwareniveau. Det består af et højt kvalificeret team på 70 fagfolk, som hver især besidder omfattende GMP-produktionserfaring. Lager- og logistikoperationerne er modulopbygget, hvilket sikrer sikker opbevaring og effektiv transport af produkter. Et landsdækkende multi-center distributionsnetværk garanterer yderligere en pålidelig forsyningscyklus.

3. Yeasen erhvervede DMF-numre for mange produkter

Drug master-filer (DMF'er) er fortrolige dokumenter, der frivilligt indsendes til US Food & Drug Administration (FDA). De indeholder detaljerede oplysninger om faciliteter, processer eller artikler, der anvendes til produktion, forarbejdning, emballering og opbevaring af humane lægemidler.

FDA undersøger det tekniske indhold af en DMF, når en producent af aktiv farmaceutisk ingrediens (API) henviser til den for at understøtte deres Investigational New Drug Application (IND), New Drug Application (NDA), Abbreviated New Drug Application (ANDA) eller Export Application. DMF'er spiller en central rolle i disse applikationer.Når producenter indgiver DMF'er for specifikke materialer, kan FDA-godkendelsesprocessen fremskyndes betydeligt.

Yeasen besidder DMF-filer, der kan strømline projekttidslinjer. Hvis det ønskes, kan du anmode om referencegodkendelse til vores DMF'er for at understøtte din FDA-ansøgning. For at påbegynde referencegodkendelsen af ​​vores DMF'er skal du indsende en anmodning om autorisationsbrev til Yeasen, hvor du anmoder om, at vi leverer et FDA-centerspecifikt DMF-autorisationsbrev.

4. Anvendelsesscenarier for Yeasen-produkter

4.1 Generering af skabeloner

Plasmidlinearisering er et uundværligt trin under skabelongenerering, når plasmidvektorer bruges som transkriptionsskabeloner. Efterhånden som transkriptionen fortsætter til slutningen af ​​DNA-skabeloner, sikrer plasmid-linearisering, at RNA-transkripter af en defineret længde og sekvens genereres. Yeasen leverer forskellige restriktionsenzymer for at imødekomme dine behov. Vi anbefaler at vælge restriktionsenzymer, der genererer stumpe ender eller 5'-udhæng.

4.2 In vitro Transskription (IVT)

In vitro-transskription påvirkes af forskellige faktorer. Enzymer, buffere og modificerede substrater har alle en stor indflydelse på transskriptionseffektiviteten.

Baseret på ZymeEditor-platformen har YEASEN Biotech udviklet nye T7 RNA-polymeraser, som signifikant reducerer dannelsen af ​​dsRNA under in vitro-transkriptionsprocessen (IVT) (T7 RNA Polymerase, lav ds RNA, 250 U/μL). Det sænker i høj grad immunogeniciteten af ​​mRNA og forbedrer til en vis grad integriteten af ​​mRNA. Denne udvikling forventes at spille en afgørende rolle i at fremme udviklingen af ​​mRNA-vacciner og kræftlægemidler.

Ved at optimere bufferen og justere salttypen af ​​nukleotidsubstratet forbedrede vi i høj grad effektiviteten af ​​transskription og reducerede produktionen af ​​dsRNA.

Figur 2. Tris NTP kan i høj grad forbedre lVT-effektiviteten og reducere dsRNA-produktion

4,3 mRNA-afdækning

Da en 5' cap-struktur reducerer immunogenicitet og er nødvendig for effektiv translation af mRNA'er, er det nødvendigt at tilføje cap-strukturer til 5'-enderne af mRNA genereret ved transkription.

Figur 3. Cap rate-detektionsresultater (LC-MS-detektion)

4,4 mRNA-oprensning

Oprensning er et uundværligt trin for at opnå mRNA'er med høj renhed.

5. Råmaterialer til fremstilling af mRNA-vaccine leveret af Yeasen

På nuværende tidspunkt kan Yeasen levere et komplet sæt produkter i produktionsprocessen af ​​mRNA-stamopløsning. Produkterne er strengt kontrolleret af GMP-produktion og opfylder fuldt ud kravene til mRNA-vaccineproduktion.

Tabel 2.Råmaterialer til fremstilling af mRNA-vaccine leveret af Yeasen

Skabelon forberedelse		In vitro transkription
2× Hieff Canace AdvanceFast High-Fidelity PCR Master Mix	10164ES	T7 High Yield RNA Synthesis Kit	10623ES
dNTP sæt løsning	10122ES	T7 RNA polymerase	10625ES
Hieff Clone Universal One Step Cloning Kit	10922ES	Pyrophosphatase, uorganisk GMP-kvalitet	10672ES
Guld T4 DNA Ligase	10300ES	Murin RNase-hæmmer GMP-kvalitet	10621ES
BspQI GMP-grad	10664ES	DNase I	10611ES
Bsa I GMP-grad	10661ES	NTP sæt løsning	10133ES
RNAse R (20U/uL)	14615ES	Pseudo UTP-natriumopløsning GMP-kvalitet (100 mM)	10650ES
Xba I	10662ES	N1-Me-Pseudo UTP natriumopløsning GMP-kvalitet (100 mM)	10651ES
Afdækning		Oprensning
mRNA Vaccinia Capping Enzyme GMP-kvalitet	10614ES	Hieff NGS™ RNA Cleaner	12602ES
mRNA Cap 2´-O-Methyltransferase GMP-kvalitet	10612ES	Magnetisk separationsstativ	80460ES
S-adenosylmethionin (SAM) GMP-kvalitet	10619ES	Dobbeltstrenget RNA (dsRNA) ELISA kit	36717ES
ARCA (Anti Reverse Cap Analog)	10681ES

6. Bestillingsoplysninger

Følgende er repræsentative produkter, der tilbydes af Yeasen. Yderligere størrelser er tilgængelige.Vores produkter er yderst optimeret til at fungere sammen, for at sikre overlegen ydeevne og reproducerbarhed. Vi kan også levere skræddersyede tjenester. Hvis du er interesseret i et produkt, der ikke er vist, så kontakt os, og vi vil arbejde sammen med dig for at opfylde dine behov.

Tabel 3. Bestillingsoplysninger

Angående læsning:

GMP-grade reagenser til mRNA in vitro syntese

DNase I og deres anvendelser i biomedicin

Referencer:

[1] Chaudhary, N., Weissman, D., & Whitehead, KA (2021). mRNA-vacciner til infektionssygdomme: principper, levering og klinisk oversættelse. Naturanmeldelser. Narkotika opdagelse, 20(11), 817-838.
[2] Vogel, AB et al. Selvforstærkende RNA-vacciner giver tilsvarende beskyttelse mod influenza til mRNA-vacciner, men
ved meget lavere doser. Molekylær terapi: tidsskriftet for American Society of Gene Therapy 26, 446-455,
[3] Fuchs, AL, Neu, A. & Sprangers, R. En generel metode til hurtig og omkostningseffektiv storskalaproduktion af 5'
lukket RNA. RNA (New York, NY) 22, 1454-1466, doi:10.1261/rna.056614.116 (2016).
[4] Schmid, A.Overvejelser for fremstilling af mRNA-vacciner til kliniske forsøg. Metoder i molekylærbiologi (Clifton, NJ) 1499, 237-251,
[5] Banerji, A. et al. mRNA-vacciner til forebyggelse af COVID-19-sygdom og rapporterede allergiske reaktioner: aktuelle beviser og foreslået tilgang. Tidsskriftet for allergi og klinisk immunologi. I praksis 9, 1423-1437,
[6] Richner, JM et al. Modificerede mRNA-vacciner beskytter mod Zika-virusinfektion. Celle 168, 1114-1125.e1110,
[7] Corbett, KS et al. SARS-CoV-2 mRNA-vaccinedesign muliggjort af prototype-patogenberedskab. Nature 586.567-571,
[8] Corbett, KS et al. mRNA-1273 beskytter mod SARS-CoV-2 beta-infektion hos ikke-menneskelige primater. Nature immunology 22, 1306-1315,
[9] Keech, C. et al. Fase 1-2-forsøg med en SARS-CoV-2 rekombinant spikeprotein nanopartikelvaccine. The New England Journal of Medicine 383, 2320-2332,
[10] Kramps, T. & Elbers, K. Introduktion til RNA-vacciner. Metoder i molekylærbiologi (Clifton, NJ) 1499, 1-11,
[11] Linares-Fernández, S., Lacroix, C., Exposito, JY & Verrier, B. Skræddersy mRNA-vaccine til at balancere medfødt/- adaptiv immunrespons. Tendenser i molekylær medicin 26, 311-323,