——Protein A/G Agarose oder magnetische Kügelchen
Protein A und Protein G sind die am häufigsten verwendeten Proteine für die Antikörperaffinitätsreinigung und Immunpräzipitation. Protein A/G-Agarose oder magnetische Kügelchen koppeln Protein A und G kovalent an die Oberfläche des Mediums und zeichnen sich dadurch durch eine stärkere Bindungskapazität, einen breiteren Bindungsbereich und höhere Praktikabilität aus.
RProtein A/G Agarose Harz | ||
Matrix | Hochvernetzte 4% Agarose-Mikrokügelchen | Polymere magnetische Mikrokugeln |
Partikelgröße | 45-165 µm | 1 µm |
Kapazität | >20 mg hIgG/ml Harz | >0,7 mg hIgG/mg Magnetkügelchen |
Vorteile | Einfach zu bedienen, keine Zusatzgeräte erforderlich | Einfache Bedienung |
Große Porengröße, starke Bindungskraft | Kleiner Durchmesser, gute Kinetik | |
Hohe Ausbeute an Zielprotein | Glatte Oberfläche, minimale Perlenadsorption, geringer Hintergrund, geringerer Antikörperverbrauch | |
Nachteile | Porös und anfällig für Adsorption (Vorreinigung erforderlich) | Bequem zu bedienen mit magnetischem Rack |
Produktanwendungen
1.Reinigung von Antikörpern
Durch einen einzigen Reinigungsschritt können hochreine Antikörper aus Serum- oder Aszitesproben isoliert werden.
Anreicherung eines bestimmten Proteins zur Untersuchung seiner Eigenschaften (z. B. posttranslationale Modifikationen).
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3. Co-Immunpräzipitation (Co-IP)
Anreicherung eines bestimmten Proteins, um andere Proteine zu untersuchen, die daran binden (z. B. Protein-Protein-Interaktionen, Proteinkomplexe usw.).
Vorgehensweise
Testdaten
1.Reinigung von Antikörpern aus Kaninchenserum mit rProtein A/GAgarose Harz.
Abbildung 1. Elektrophorese-Ergebnis der Antikörperreinigung mit rProtein A/G Agarose Harz
2.Verwendung von Protein A/G Magbeads für Co-IP: Spezifische Antikörper gegen p65 und Cyclin-abhängige Kinase 9 (CDK9) werden für die Immunpräzipitationsanalyse des extrahierten gesamten Zellproteins verwendet.
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Figur 2. Die Immunpräzipitanten wurden dann einer Western-Blot-Analyse mit spezifischen Antikörpern gegen CDK9 und p65 unterzogen.
Produktinformationen
Produktname | Produktnummer | Spezifikation |
rProtein A/G Agarose Harz | 36403ES08/25/60 | 5 ml/25 ml/100 ml |
36417ES03/05 | 1 ml/5 ml |
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