La transfección celular es una técnica para introducir ácidos nucleicos exógenos (como ADN, ARNm, ARNi, miARN, etc.) en las células y desempeña un papel crucial en la investigación biomédica moderna. A medida que la investigación científica continúa profundizando, la demanda de una variedad de tipos de células también se ha vuelto cada vez más diversa, desde células HEK293 comunes hasta tipos especiales de células tumorales y células primarias, cada una con sus características y requisitos únicos. De manera similar, los diferentes tipos de ácidos nucleicos también requieren estrategias de transfección específicas para garantizar una administración de genes eficiente y segura. Por lo tanto, elegir el reactivo de transfección adecuado es esencial para el éxito del experimento.
Los reactivos de transfección química son herramientas indispensables en la investigación de biología celular, que introducen ácidos nucleicos como ADN, ARNm, ARNi, miARN, etc., en las células a través de diferentes mecanismos para lograr la expresión génica, el silenciamiento o estudios funcionales. En la actualidad, los reactivos de transfección química de uso común incluyen principalmente reactivos de transfección de liposomas, reactivos de transfección de PEI y reactivos de transfección de fosfato de calcio, cada uno con sus ventajas únicas y escenarios aplicables.
Tabla 1: ¿Cuáles son las diferencias entre los distintos reactivos de transfección química?
| Categoría de producto | Principio | Ventajas | Desventajas |
| Reactivo de transfección de liposomas | 1. Los reactivos de transfección de liposomas tienen lípidos con carga positiva que se unen a ácidos nucleicos con carga negativa para formar complejos lípido-ácido nucleico. 2. Estos complejos son atraídos por la membrana celular cargada negativamente. 3. La célula engulle los complejos en endosomas a través de endocitosis. 4. El efecto de "esponja de protones" de los lípidos en los complejos evita la acidificación de los endosomas, lo que conduce a la desestabilización y ruptura de la membrana, liberando los complejos al citoplasma. 5. Los ácidos nucleicos pequeños como el ARNi, el miARN o el ARNm pueden funcionar en el citoplasma, mientras que el ADN necesita ingresar al núcleo para expresarse. 6. Una vez en el núcleo, el ADN se transcribe en ARNm y se traduce en proteínas, expresando el gen extraño. | 1. Los reactivos de transfección de liposomas ofrecen una alta eficiencia con varias líneas celulares, incluidas las células primarias difíciles de transfectar. 2. Son versátiles, compatibles tanto con células adherentes como en suspensión y con diversos ácidos nucleicos como ADN, ARNi y miARN. 3. Estos reactivos funcionan bien en medios que contienen suero, evitando la necesidad de eliminar el suero y minimizando así el daño celular. | 1. Los reactivos de transfección de liposomas pueden ser tóxicos para las células, especialmente en altas concentraciones o durante períodos prolongados, lo que potencialmente afecta la supervivencia y la función celular. 2. Son más costosos en comparación con los métodos tradicionales como la transfección con fosfato de calcio. 3. Su aplicación in vivo es limitada debido a la depuración sérica, la acumulación en el tejido pulmonar y el potencial de causar fuertes respuestas inflamatorias y alta toxicidad. |
| Isla del Príncipe Eduardo reactivo de transfección | 1. El PEI, un polímero con carga positiva, se une al ADN con carga negativa para formar complejos PEI-ADN a través de interacciones electrostáticas. 2. Estos complejos se adhieren a la membrana celular cargada negativamente. 3. Las células engullen los complejos PEI-ADN mediante endocitosis, formando endosomas. 4. El efecto de "esponja de protones" del PEI hace que los endosomas se hinchen y estallen en el ambiente ácido, liberando los complejos en el citoplasma. 5.En el citoplasma, los enlaces PEI-ADN se rompen, permitiendo que el ADN ingrese al núcleo, donde se transcribe y se traduce en proteínas. | 1. Los reactivos de transfección de PEI forman complejos estables con el ADN, mejorando la eficiencia de la transfección. 2. Tienen menor citotoxicidad en comparación con otros polímeros catiónicos, preservando la viabilidad y función celular. 3. Los reactivos PEI ofrecen una solución rentable, especialmente para transfecciones a gran escala como la producción de vectores virales. 4. Los reactivos PEI están disponibles en grado GMP para producción clínica y comercial, lo que garantiza la calidad y el cumplimiento. | 1. Los reactivos de transfección PEI tienen una versatilidad limitada, se utilizan principalmente para ADN y son menos efectivos con otros ácidos nucleicos como ARNm, ARNi y miARN. 2. Muestran una alta eficiencia en tipos de células específicos, como las células HEK293, para el empaquetamiento de virus y la expresión de proteínas, pero funcionan mal con células difíciles de transfectar. |
| Reactivo de transfección de fosfato de calcio | 1. Los coprecipitados de ADN/fosfato de calcio se forman en el tampón HEPES con fosfato, donde la carga negativa del ADN se une a los iones de calcio positivos. 2. Las células engullen estos coprecipitados, que se adhieren a su superficie, a través de la endocitosis, un paso crítico para la eficiencia de la transfección. 3. Dentro de las células, los coprecipitados liberan ADN, lo que puede conducir a una expresión transitoria o una integración estable en el genoma. | 1. La transfección con fosfato de calcio es rentable y adecuada para laboratorios con presupuestos limitados. 2. Es fácil de realizar, requiere pasos simples y una habilidad técnica mínima. 3. Se puede utilizar tanto para la expresión transitoria de proteínas como para la creación de líneas celulares estables. | 1. La eficiencia de la transfección con fosfato de calcio es variable y sensible a factores como el pH y la pureza del ADN, lo que puede provocar transfecciones fallidas, especialmente con ADN impuro. 2. No es adecuado para todos los tipos de células, se utiliza principalmente para células HEK293 y es menos efectivo para células primarias y algunos otros tipos de células. |
Yeasen Biotech, aprovechando sus sólidas capacidades de I+D y su equipo de tecnología de producción, optimiza continuamente las formulaciones de reactivos de transfección de ADN y ARN y mejora los procesos de producción. La empresa ha lanzado una línea de productos diversificada basada en liposomas catiónicos y polímeros catiónicos para satisfacer las amplias necesidades de las instituciones de investigación y las empresas en el campo de los reactivos de transfección. Estos productos cubren diversas aplicaciones de reactivos de transfección y tienen las siguientes ventajas:
Amplia aplicabilidad: Capaz de transfectar eficientemente ADN plasmídico, ARNi, miARN y ARNm.
Alta eficiencia de transfección: La eficiencia de transfección celular supera el 90%, lo que satisface las necesidades de cotransfección de múltiples plásmidos.
Verificado en múltiples líneas celulares: Se demostró una buena eficiencia de transfección en más de 40 líneas celulares diferentes.
Amplia gama de aplicaciones: Se utiliza para la construcción de líneas celulares estables, expresión transitoria de proteínas y empaquetamiento viral de AAV y LV.
Alta frecuencia de citas en la literatura: Citado en más de 400 publicaciones de alto impacto, con un factor de impacto total superior a 3000+.
Cómo elegir un reactivo de transfección que se adapte a sus necesidades
Dados los requisitos especiales de eficiencia y condiciones de transfección en diferentes tipos de células y ácidos nucleicos (como ADN, ARNm, ARNi, etc.), seleccionar el reactivo de transfección correcto es crucial para el éxito del experimento.En función de las necesidades específicas del experimento, elija un reactivo de transfección que pueda optimizar la eficiencia de la transfección y minimizar la citotoxicidad para garantizar la precisión de los datos experimentales y la solidez de los resultados experimentales. YEASEN Biotech ofrece una gama de productos optimizados para diferentes escenarios de aplicación, lo que garantiza que pueda encontrar el reactivo de transfección más adecuado para sus fines de investigación y satisfacer sus necesidades experimentales específicas.
Presentación del caso
En un sistema de placa de 6 pocillos, se transfectaron plásmidos que expresaban GFP en células HEK293 utilizando el reactivo de transfección YEASEN 40802ES y un reactivo de transfección de un competidor. La expresión de GFP en las células transfectadas se observó bajo un microscopio 48 horas después de la transfección. El rendimiento del reactivo de transfección de YEASEN fue superior.
En una placa de 12 pocillos, se transfectaron células HEK293 con un total de 1 μg de ADN plasmídico; utilizando 3 μL de reactivo de transfección, fue posible cotransfectar con éxito dos plásmidos.
Caso de cliente
Validado en múltiples líneas celulares, con una gama más amplia de aplicaciones.
| Células | Células | Células | Células | Células |
| 293F | Caco2 | HEK293T | LM3 | NIH-3T3 |
| 293T | CHO-K1 | HEK293 | MCF10A | PC12 |
| 3t3 | COS-7 | HeLa | MCF-7 | Real academia de bellas artesw264.7 |
| 5-8F | DF-1 | Hepatitis 3B | MDA-MB-231 | RKO |
| A549 | H520 | Hepa1-6 | Ministerio de Economía y Finanzas | SGC-7901 |
| BV-2 | H9 | HepG2 | MKN-28 | SMCC7721 |
| C2C12 | H9c2 | HUVEC | N2A | Vero |
| C6 | HaCaT | Lente X-293T | Instituto Nacional de Ciencia y Tecnología (NCI-H1975) | HCT116 |
| WRL-68 | THP-1 | MDCK | Hep2C | Más… |
Lista de productos
| Número de gato | Nombre del producto | Ácido nucleico | Solicitud |
| 40802ES | ADN | Reactivo de transfección de liposomas de alto rendimiento | |
| 40804ES | Vuelta al cole | Mejorar la capacidad de infección lentiviral. | |
| 40806ES | Reactivo de transfección de ARNi/miARN in vitro Hieff Trans® | ARNi, ARNmi, ASO | Reactivos de transfección específicos de siRNA y miRNA con alta eficiencia de eliminación. |
| 40808ES | ADN, ARNi, miARN | Reactivo de transfección de liposomas mejorado que puede realizar transfecciones de ADN y ARN en varios tipos de células, y aún muestra buenos efectos en células difíciles de transfectar. | |
| 40809ES | ARNm | Reactivo de transfección específico de ARNm con alta eficiencia de transfección en una variedad de tipos de células. | |
| 40815ES | ADN | Ampliamente aplicable para la expresión de proteínas y el empaquetamiento viral (forma de polvo). | |
| 40816ES | Polietilenimina lineal (PEI) M de Hieff Trans®W40000(lisis rápida) | ADN | |
| 40820ES | ADN | Reactivos de transfección dedicados para el empaquetamiento viral, capaces de lograr mayores rendimientos para el empaquetamiento viral de AAV y LV | |
| 40821ES | ADN | ||
| 40823ES | ADN | La más alta eficiencia de transfección. Especialmente adecuado para la producción de AAV en cultivos en suspensión, con rendimientos más altos. |
Citado en múltiples publicaciones de alto impacto, lo que garantiza la calidad (lista parcial de referencias citadas)
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