Yeasen과 Molefuture, 분자생물학 과제 극복을 위한 고급 T4 DNA 리가제 출시

Yeasen과 Molefuture는 ZymeEditor 플랫폼을 사용하여 최첨단 T4 DNA 리가제를 공동 개발하여 차세대 시퀀싱(NGS)을 위한 분자 생물학 및 DNA 라이브러리 구축의 핵심 문제를 해결했습니다. 기존 T4 DNA 리가제는 안정성 저하, 높은 어댑터 다이머 형성, 높은 DNA 단편 자가 결찰과 같은 문제에 직면합니다. 이 새로운 효소는 이러한 한계를 극복하는 것을 목표로 합니다.

ATP 의존 효소인 T4 DNA 리가제는 컴팩트 나선형 DNA 결합 도메인(DBD), 뉴클레오티딜 전이효소(NTase) 도메인, OB 폴드 도메인을 특징으로 합니다. 연구자들은 단백질 구조를 분석하여 DNA 기질에서 5~20Å 이내의 주요 잔류물을 식별했습니다. 고급 계산 도구, 실리코 스크리닝, 구조-기능 분석을 사용하여 합의 시퀀스 정렬을 통해 돌연변이를 설계하고 구조-기능적 통찰력을 통합했습니다.

이 팀은 합리적인 설계 외에도 지시된 진화를 위한 MTPS 방법을 사용하여 안정성, 활성 및 잔류 활성을 위해 10,000개 이상의 돌연변이체를 스크리닝했습니다. 유망한 후보는 엄격한 정제 및 테스트를 거쳤습니다. 자세한 특성화가 이어졌으며, 활성, 안정성, 어댑터 자가 결찰, DNA 단편 자가 결찰 및 DNA 수율을 평가했습니다.

연구자들은 DNA 합리적 설계와 G1 돌연변이에 대한 지시된 돌연변이를 결합하여 다양한 응용 분야에 적합한 뛰어난 변종을 개발했습니다. 이 포괄적인 접근 방식은 NGS에서 분자 생물학 연구와 DNA 라이브러리 구축을 향상시킬 수 있는 매우 효율적이고 신뢰할 수 있는 T4 DNA 리가제를 만들어냈습니다.

그림 1. Versatility T4 DNA Ligase의 진화를 보여줍니다. (A) T4 DNA 리가제의 합리적 설계. (B) 45℃에서 내열성 T4 DNA 리가제 돌연변이체의 스크리닝으로, 특이적 활성이 상당히 향상된 돌연변이체를 식별합니다. (C) DNA 라이브러리 제조 중 어댑터 다이머 형성을 줄이는 것을 목표로 한 T4 DNA 리가제 돌연변이체의 스크리닝. (D) 라이브러리 평가는 DNA 라이브러리 제조 방법을 사용하여 42℃에서 1시간 동안 열 처리한 후 보존을 제공합니다.
표 1. Yeasen Versatile T4 DNA 리가제는 열안정성입니다. 효소는 30℃에서 5일 동안 처리되었고 DNA Lib Prep 방법으로 분석되었습니다.
그림 2. Yeasen Versatile T4 DNA 리가제는 자가 오결합으로 인한 어댑터 다이머 형성이 적은 야생형(WT) T4 DNA 리가제에 비해 정확도가 더 높습니다(A) 및 (B)는 DNA Lib Prep 방법으로 분석되었습니다.
그림 3. DNA Lib Prep 방법으로 분석한 결과, Yeasen Versatile T4 DNA 리가제는 내열성 리가제를 포함한 상업용 T4 DNA 리가제와 비교했을 때 어댑터 다이머 형성이 가장 낮았습니다.
 
이번 획기적인 성과는 효소 공학 분야에서 Yeasen과 Molefuture가 혁신과 우수성을 추구한다는 것을 보여줍니다.

주문 정보

이름 고양이# 노트
효소 Hieff™ 다목적 T4 DNA 리가제(600 U/µL) 12996ES 열 내성 및 높은 충실도의 종양 유전자 검출
DNA Hieff NGS® DNA 라이브러리 준비 키트 13577ES 종양/기계적 방법
Hieff NGS® OnePot Pro DNA 라이브러리 준비 키트 V2 12194ES 종양/효소법
Illumina용 Hieff NGS® OnePot II DNA 라이브러리 준비 키트 13490ES 병원체/효소/정규시간(140분)
Hieff NGS® OnePot Flash DNA 라이브러리 준비 키트 12316ES 병원체/효소/초고속(100분)
Hieff NGS® DNA&RNA 라이브러리 공동 준비 키트 V2 12305ES 병원체/효소/DNA 및 RNA 공동 준비
RNA Hieff NGS® Ultima 듀얼모드 mRNA 라이브러리 준비 키트 12308ES 올리고 dT 자기 비드 없음, 11개 튜브
Hieff NGS® Ultima 듀얼모드 mRNA 라이브러리 준비 키트 12309ES 올리고 dT 자기 비드 플러스, 14개 튜브
Hieff NGS® Ultima 듀얼모드 RNA 라이브러리 준비 키트 12310ES 사전 혼합 버전, 5개 튜브
Hieff NGS ® EvoMax RNA 라이브러리 준비 키트(사전 혼합 버전)(액티노마이신 D 무함유) 12340ES 사전 혼합 버전(Actinomycin D Free)
Hieff NGS® MaxUp rRNA 고갈 키트(식물) 12254ES 식물
Hieff NGS® MaxUp 인간 rRNA 고갈 키트(rRNA 및 ITS/ETS) 12257ES 인간

이 효소와 다른 최상급 내열성 T4 DNA 리가제 및 기존 T4 DNA 리가제 간의 성능 비교 데이터에 대한 문의는 메시지를 남겨주세요.

몰퓨처 바이오테크놀로지 소개

Molefuture Biotechnology는 Yeasen Biotechnology(Shanghai) Co., Ltd.의 자회사로, 효소 진화 기술을 기반으로 하는 맞춤형 효소 변형 솔루션을 제공하는 데 특화되어 있습니다. Molefuture는 Yeasen Biotechnology의 리소스를 활용하여 6가지 주요 기술 플랫폼, 즉 혁신적인 효소 진화 플랫폼인 ZymeEditor, 다중 호스트 고효율 발현 플랫폼, 발효 공정 개발 플랫폼, 정제 공정 개발 플랫폼, 초고청정 효소 생산 플랫폼, 효소 분석 및 품질 관리 플랫폼에서 운영됩니다. 이러한 6가지 기술 플랫폼을 통해 Molefuture는 효소 지향 진화, 새로운 효소 개발, 효소 공정 개발, GMP 수준의 스케일업 생산을 포함한 완전한 맞춤형 솔루션을 제공하여 체외 진단, 생물 의학, 합성 생물학, 의료 미학, 제약 중간체 등과 같은 분야에서 효소의 적용 요구 사항을 충족할 수 있습니다.

문의