UCF.ME™ UltraNuclease는 다른 말로 Totipotent nuclease, broad-spectrum nuclease, non-limiting Inhibitory endonuclease라고도 하며, Serratia Marcescen에서 유래되었지만, 이후
1. 전능성 핵산분해효소란 무엇입니까?
2. 전능성 핵산 분해효소의 사용 시나리오는 무엇입니까?
3. 전능성 핵산 분해 효소가 가져야 할 장점은 무엇입니까?
4. 자주 묻는 질문
5. 관련 상품
1. 전능성 핵산분해효소란 무엇입니까?
전능성 뉴클레아제는 단일 가닥, 이중 가닥, 선형, 네이티브 및 변성 핵산을 포함하는 광범위한 핵산 형태를 분해할 수 있는 능력을 가진 유전자 변형 엔도뉴클레아제입니다. 이들은 3~5개 염기의 길이를 가진 5'-모노포스페이트 올리고뉴클레오타이드를 생성하고 특정 염기 인식을 나타내지 않습니다. 이러한 다재다능한 뉴클레아제는 다양한 조건에서 강력한 안정성과 소화 활성을 나타내므로 샘플이나 제품에서 핵산 잔류물을 제거하는 데 매우 효율적입니다. 이는 샘플 순도와 제품의 생물학적 효과를 향상시켜 전능성 뉴클레아제를 과학 연구, 백신 및 단백질 및 폴리사카라이드 제약과 같은 산업에 선호되는 효소 제제로 만듭니다.
또한 전능성 뉴클레아제는 백신, 항체, 세포 치료 및 기타 생물학적 제품을 준비하는 동안 핵산을 제거하는 데 중요한 역할을 하며, 치료적 용도의 최종 제품에 잔류 핵산이 10 pg/용량을 초과해서는 안 된다는 FDA 규정을 준수합니다. 전능성 뉴클레아제는 핵산을 분해하여 세포 용해물의 점도를 낮추어 바이러스, AAV 벡터 및 봉입체와 같은 세포 유래 입자를 정제하는 동안 용액 여과/초여과 공정을 용이하게 합니다. 이를 통해 공정이 간소화되고 원심분리가 개선되며 침전 및 상층액의 분리 효율이 향상되고 크로마토그래피 정제의 효과가 높아져 궁극적으로 수율과 제품 순도가 증가합니다.
2. 전능성 핵산 분해효소의 사용 시나리오는 무엇입니까?
UltraNuclease는 광범위한 분야에 적용되며 구체적인 사용 시나리오는 다음과 같습니다.
2.1 바이러스 정제(렌티바이러스, AAV, 재조합 아데노바이러스 백신, 불활성화 바이러스, 종양용해 바이러스 등)
생물의학 분야에서 바이러스 활용은 백신, 세포 치료, 유전자 치료 및 기타 다양한 분야와 같은 응용 분야에 걸쳐 크게 확대되고 있습니다. 바이러스 생산을 담당하는 숙주 세포는 주로 연속 통과 세포(CCL)입니다. CCL은 조절되지 않는 성장에 대한 유전적 소인을 나타내어 무기한으로 증식할 수 있는 능력을 부여합니다. 그러나 CCL의 잔류 DNA가 존재하면 통제되지 않는 인간 세포 증식으로 인해 종양이 형성되는 것과 같은 잠재적인 위험이 발생할 수 있습니다. 또한 이러한 잔류 DNA 단편에는 감염성 바이러스 게놈이 포함되어 있어 종양 형성과 함께 감염 위험에 대한 우려가 발생할 수 있습니다. 결과적으로 생물학적 제품의 잔류 DNA를 관리하고 안전을 보장하기 위해 엄격한 통제 조치가 필수적입니다. 이와 관련하여 UCF.ME™ UltraNuclease는 바이러스 정제를 위한 안전한 솔루션을 제공합니다.
소금은 단백질이나 바이러스 응집을 완화하는 데 중요한 역할을 하며, 단백질과 다른 세포 구성 요소에서 DNA와 RNA를 분리하는 것을 용이하게 합니다. 비특이적 엔도뉴클레아제인 Salt Active UltraNuclease는 높은 염 농도에서 최적의 활성을 보입니다. 고염 조건에서 효소는 방출된 DNA와 RNA에 대한 접근성을 높여 분해를 향상시킵니다. 고염 환경에서 활성이 높은 뉴클레아제는 정제 과정을 향상시키는 데 더 효과적인 것으로 입증되었습니다. Salt Active UltraNuclease는 세포 상층액과 용해물의 점도를 낮추어 고염 조건에서 정제 효율을 높이는 데 사용할 수 있습니다. 이 효소는 또한 숙주 핵산 잔류물을 피코그램 수준으로 줄여 바이러스 정제, 백신 제조, 단백질 및 폴리사카라이드 의약품 생산을 포함한 다양한 생물학적 제품 응용 분야의 성능과 안전성을 향상시킵니다.
2.2 E. coli에서 발현된 재조합 단백질의 정제
대장균에서 발현된 특정 단백질은 포함체로 응집되는 경향이 있어 종종 숙주 DNA와 얽히게 되어 정제 과정을 복잡하게 만듭니다. 결과적으로 파열된 박테리아 세포는 높은 점도를 나타낼 수 있으며, 단백질 정제 효율을 크게 떨어뜨립니다. 그러나 초음파 파쇄 중에 박테리아 용액에 10-50 U/mL의 UCF.ME™UltraNuclease를 도입하고 파쇄가 완료된 후 샘플을 37°C에서 30분 동안 또는 4°C에서 밤새도록 배양하면 박테리아 용액의 점도를 효과적으로 줄일 수 있습니다. 이는 차례로 정제 과정의 효율성을 크게 향상시킵니다. 요약하자면, 단백질의 효과적인 정제를 용이하게 하기 위해 UCF.ME™ UltraNuclease를 신뢰할 수 있습니다.
2.3 세포 응집 방지
최근 몇 년 동안, 면역 검정에서 냉동보존된 말초혈 단핵세포(PBMC)의 사용이 극적으로 증가했습니다. PBMC 세포의 가장 큰 특징은 소생 후 응집되기 매우 쉽다는 것입니다. 이는 쉽게 낮은 세포 품질과 신뢰할 수 없는 검사 결과로 이어질 수 있습니다. 세포를 소생시킬 때, 적절한 농도(25-50 U/mL)의 UCF.ME™UltraNuclease를 배양 배지에 첨가하고 세포를 공동 배양하면 세포 응집을 효과적으로 방지할 수 있습니다. 따라서, 당사의 UCF.ME™ UltraNuclease를 최대한 활용하여 성공적인 결과의 확률을 높일 수 있습니다.
3. 전능성 핵산 분해 효소가 가져야 할 장점은 무엇입니까?
3.1 광범위한 응용 분야
UCF.ME™ UltraNuclease는 다양한 실험 조건에서 다양한 형태의 DNA와 RNA를 절단하고 분해할 수 있으며, 다양한 생물학적 제품에 있는 잔류 핵산을 제거하는 데 적용될 수 있습니다.
3.2 고순도, 높은 효소활성
UCF.ME™ UltraNuclease의 경우, 효소 순도는 99% 이상(HPLC)이고, 효소 활성은 1.5*106 U/mg 이상(일반 기질에 대한 절대 정량 방법을 사용)입니다.
3.3 강한 적응력
UCF.ME™ UltraNuclease는 보관 및 동결-해동 시 안정성이 높습니다. UCF.ME™ UltraNuclease는 효소 활성의 추세를 감지하기 위해 -20°C, 4°C, 37°C에서 보관합니다. 2주 동안 37°C에 두었을 때 효소 활성에 유의미한 변화가 없었습니다. 한편, 효소의 안정성을 보장하기 위해 드라이 아이스 + 아이스 팩을 조합하여 UCF.ME™ UltraNuclease를 귀하의 장소로 운송합니다. 또한 내성이 강하고 다양한 작동 조건에 적응할 수 있습니다.
3.4 약전 준수
UCF.ME™ UltraNuclease는 UCF.ME(Ultra Clean Factory. Molecular Enzyme)에서 제조되며 일종의 Ultra-clean 효소입니다. Ultra-clean 효소란 무엇입니까? HCD, HCR, HCP, DNASE FREE, RNASE FREE, protease 잔류물 없음, 미생물 잔류물 없음, 병원균 없음, 동물성, 항생제 오염, 초저 엔도톡신 잔류물, 효소 활성도 높음, 순도 높음 등의 품질 기준을 달성한 분자 효소입니다. 따라서 안전하고 신뢰할 수 있는 당사 제품을 신뢰할 수 있습니다.
3.5 GMP 생산
UltraNuclease 생산의 전 과정은 GMP 생산 작업장에서 완료되며, 품질 검사 계획은 약전 방법을 엄격히 준수하여 연구개발에서 생산까지 대량 수요를 충족시킵니다.
UCF.ME™ UltraNuclease의 파트너 —— UltraNuclease ELISA 키트
일반적인 정제 단계에서 UCF.ME™ UltraNuclease는 불순물로 쉽게 제거됩니다. UCF.ME™ UltraNuclease의 잔류물을 검출하기 위해 YEASEN은 샘플에서 UCF.ME™ UltraNuclease의 잔류물을 정확하게 검출할 수 있는 지원 UltraNuclease ELISA 키트를 개발했습니다. 이 키트는 선형성, 반복성, 회수율 및 특이성이 뛰어납니다.
UltraNuclease ELISA 키트
선형 범위는 0.047~3ng/mL이고 R2는 0.99보다 큽니다. 배치 간 재현성이 우수하여 고정 농도의 UltraNuclease를 샘플에 첨가하고 3가지 다른 배치의 ELISA 키트를 사용하여 검출합니다. 핵산 분해 효소 농도가 3~0.186ng/mL이고 CV가 10% 미만일 때 검출 회수율은 70%~110%입니다. 게다가 다양한 농도의 UltraNuclease의 시뮬레이션 샘플 회수율은 모두 70%~130% 사이이며 다른 브랜드보다 우수합니다. 또한 8가지 일반 샘플에 대한 UltraNuclease 항체의 비특이적 결합을 평가한 것은 특이성이 강합니다. 간섭 그룹과 대조군의 결과가 겹치며 간섭이 나타나지 않았습니다.
UltraNuclease의 DMF 신청에 따라 YEASEN은 미국 FDA로부터 염 활성 울트라뉴클레아제의 DMF를 획득했습니다.
신청번호는 다음과 같습니다.
| 숫자 | 제품 이름 | 신고 번호 |
| 1 | 울트라뉴클레아제 | MF037298 |
| 2 | 솔트 액티브 울트라뉴클레아제 | MF037815 |
4. 자주 묻는 질문
Q1: UltraNuclease를 어느 단계에 추가해야 하나요?
A: 다루는 샘플에 따라 다릅니다. 바이러스 정제에서는 일반적으로 바이러스 정화 후에 첨가합니다. 대장균 단백질 정제에서는 세포가 용해될 때 첨가할 수 있습니다. 세포 응집을 다루는 경우 세포와 공동 배양하기 위해 배지에 직접 첨가할 수 있습니다.
Q2: 반응 온도가 37°C에 도달하지 못하는 경우 어떻게 사용합니까?
A: UltraNuclease의 효소 활성은 온도, 처리 시간, 효소 활성 단위에 영향을 받습니다. 온도가 37°C에 도달하지 못하면 효소 양을 적절히 추가하거나 배양 시간을 연장할 수 있습니다.
질문 3: UltraNuclease는 프로테아제 억제제와 호환됩니까?
A: 호환 가능하지만 많은 프로테아제 억제제에 EDTA가 포함되어 있다는 점을 알아두십시오. EDTA가 1mM보다 높아지면 EDTA가 일부 뉴클레아제의 활동을 억제합니다.
Q4: UltraNuclease를 제거하는 방법은?
A: TFF, 투석, 크로마토그래피 컬럼 등의 방법을 통해 제거할 수 있습니다.
질문 5: UltraNuclease ELISA 키트를 다른 브랜드의 전능성 뉴클레아제 잔류물을 검출하는 데 사용할 수 있나요?
A: 우리는 이것을 권장하지 않습니다. ELISA 키트는 UltraNuclease를 기반으로 완전히 개발되었으며 UltraNuclease를 정확하게 정량화할 수 있습니다. 다른 브랜드의 Altipotent nuclease는 시퀀스 및 생산 공정 측면에서 UltraNuclease와 다를 수 있으며 검사 결과가 정확하지 않을 수 있습니다.
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표 1 관련 제품
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제품 이름 |
제품유형 |
명세서 |
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20157ES25/60/80/90 |
25KU/100KU/1MU/5MU |
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20159ES25/60/80/90 |
25KU/100KU/1MU/5MU |
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36701ES59 |
96티 |
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| Salt Active UltraNuclease ELISA 키트 | 36703ES96 | 96티 |