Tổng quan
Coelenterazine là một fluorescein tự nhiên có nhiều trong tự nhiên và là phân tử lưu trữ năng lượng ánh sáng của hầu hết các sinh vật phát quang biển (hơn 75%). Coelenterazine có thể được sử dụng làm chất nền cho nhiều loại enzyme luciferase, chẳng hạn như luciferase thận biển (Rluc), luciferase tiết ra bởi Gaussia (Gluc) và Photoprotein bao gồm aequorin và Obelia. Không giống như hệ thống luciferin/luciferase đom đóm, hệ thống Coelenterazine/luciferase không yêu cầu adenosine triphosphate (ATP), giúp nghiên cứu huỳnh quang sinh học trong cơ thể sống dễ dàng hơn. Do đó, Coelenterazine thường được sử dụng làm chất nền phát quang cho các xét nghiệm huỳnh quang dựa trên xét nghiệm gen báo cáo và xét nghiệm động vật sống.
Coelenterazine thương mại chính hiện đang được sử dụng là Coelenterazine bản địa. Ngoài ra còn có nhiều dẫn xuất coelenterin như Coelenterazine h, Coelenterazine 400a, Coelenterazine cp, Coelenterazine f, Coelenterazine hcp, Coelenterazine n tương đương được tổng hợp. Về mặt lý thuyết, các coelenterin này có thể được sử dụng trong cùng một thí nghiệm, nhưng do sự khác biệt về bước sóng phát sáng, tính thấm màng tế bào và hiệu suất lượng tử ánh sáng, chúng cho thấy các hiệu ứng thực nghiệm khác nhau trong cùng một ứng dụng.
Các loài Coelenterazin
Còn được gọi là axit tự do Coelenterazine. Nó là chất nền của nhiều enzyme luciferase như Renilla luciferase (Rluc) và Gaussia luciferase (Gluc), và cũng là cofactor của protein phát quang của sứa.
Các tình huống ứng dụng: Phát hiện nồng độ ion canxi trong tế bào sống, phân tích báo cáo gen, nghiên cứu BRET (Chuyển giao năng lượng cộng hưởng phát quang sinh học), ELISA, HTS và phát hiện hóa học phát quang của mức ROS trong mô hoặc tế bào, v.v.
Nó là chất nền của nhiều enzyme luciferase như Renilla luciferase (Rluc) và Gaussia luciferase (Gluc), và cũng là cofactor của protein phát quang ở sứa.
Kịch bản ứng dụng: Cường độ phát sáng cao hơn Coelenterazine Native hơn 10 lần, thích hợp cho phân tích gen báo cáo và phát hiện nồng độ ion canxi trong tế bào sống.
Coelenterazine hcp
Đây là một trong những dẫn xuất của Coelenterazine Native. Cường độ huỳnh quang của phức hợp Coelenterazine hcp-Aequorin cao hơn 190 lần so với phức hợp Coelenterazine Native, với năng suất lượng tử cao và Ca nhanh2+ tốc độ phản ứng rất thích hợp để phát hiện nồng độ ion canxi.
Kịch bản ứng dụng: Thích hợp để phát hiện nồng độ ion canxi.
Còn được gọi là DeepBlue CTM, đây là một trong những dẫn xuất của Coelenterazine Native. Đây là chất nền tốt cho Renilla luciferase (Rluc), và bước sóng phát xạ của nó là khoảng 400nm, ít gây nhiễu tín hiệu của protein thụ thể GFP và không thể bị oxy hóa bởi luciferase tiết ra bởi Gaussia (Gluc).
Kịch bản ứng dụng: Đây là chất nền Coelenterazine được ưa chuộng cho nghiên cứu BRET (Truyền năng lượng cộng hưởng phát quang sinh học).
Đây là chất nền được ưa thích cho aequorin và điểm khác biệt duy nhất về mặt cấu trúc so với Coelenterazine Native là nhóm hydroxyl trên nhóm phenol R-1 của nó được thay thế bằng flo (F).So với tổng số photon do phức hợp Coelenterazine Native-Apoaequorin tạo ra, phức hợp này chỉ tạo ra 80% năng lượng photon. Ưu điểm là chỉ mất rất ít thời gian để tạo ra phức hợp aequorin. Khi nó tiếp xúc với Ca2+, nó phát sáng nhanh và cho năng suất cao, với cường độ sản xuất gấp 20 lần so với Coelenterazine Native. Ngoài ra, nó còn có tính thấm tế bào tốt.
Kịch bản ứng dụng: Khi Ca cực kỳ cao2+ Độ nhạy phát hiện là cần thiết để nghiên cứu các thí nghiệm tái tạo protein sứa, nên sử dụng chất nền.
Coelenterazine cp
Đây là một dẫn xuất của Coelenterazine Native. Phức hợp photoprotein được hình thành với protein Apoaequorin sáng hơn 15 lần so với Coelenterazine Native và có Ca nhanh hơn2+ tốc độ phản ứng.
Kịch bản ứng dụng: Nó có thể được sử dụng để sàng lọc thông lượng cao các loại thuốc có thụ thể liên kết với protein G (GPCR).
Coelenterazine n
Cường độ huỳnh quang của nó yếu hơn trong tất cả các dẫn xuất Coelenterazine và tốc độ phản ứng với Ca2+ thấp hơn đáng kể so với Coelenterazine Native.
Coelenterazine e
Một dẫn xuất của Coelenterazine Native có cấu trúc nhiều hơn một nhóm etyl so với Coelenterazine Native. Là chất nền cho Renilla luciferase, cường độ huỳnh quang của nó là 137% so với Coelenterazine Native. Coelenterazine e có phản ứng in vitro cao với protein phát quang của sứa và các đỉnh phát xạ kép (405 & 465), cho phép xác định Ca2+ nồng độ trong phạm vi pCa5-7 theo tỷ lệ bước sóng kép. Phương pháp này không phụ thuộc vào nồng độ Coelenterazine, do đó cải thiện độ chính xác phát hiện. Vì tính thấm tế bào của dẫn xuất này kém nên nó không có lợi thế này đối với các thí nghiệm liên quan đến nội bào.
Kịch bản ứng dụng: Chất nền rất hữu ích cho Ca2+ phát hiện độ nhạy thấp.
Coelenterazine 2-methyl
Là chất chống oxy hóa tế bào mạnh, có thể tác động hiệu quả lên các loài oxy phản ứng nội bào như oxy đơn và anion superoxide, stress oxy hóa là mắt xích trung gian trong quá trình apoptosis. Ngoài ra, hợp chất này có đặc tính không độc và thấm màng, do đó có thể dùng để nghiên cứu apoptosis.
Ứng dụng sản phẩm:
1) Là một công cụ quan trọng để nghiên cứu quá trình apoptosis;
2) Nó cũng có thể được sử dụng cho phát quang hóa học để phát hiện mức độ anion superoxide và anion peroxynitrite.
| Tên sản phẩm | Trọng lượng phân tử | Công thức phân tử | Em (nm) | RLC* | Cường độ tương đối | Thời gian tăng một nửa (ms)** |
| 423.46 |
| 466 | 1,00 | 1 | 6-30 | |
| 407,48 |
| 466 | 0,75 | 16 | 6-30 | |
| Coelenterazine hcp | 399,48 |
| 445 | 0,65 | 500 | 2-5 |
| Coelenterazine cp | 415,48 |
| 442 | 0,63 | 28 | 2-5 |
| 425,46 |
| 472 | 0,80 | 20 | 6-30 | |
| Coelenterazine n | 457,52 |
| 468 | 0,25 | 0,15 | 6-30 |
| Coelenterazine e | 449,5 |
| 405 và 465 | 0,5 | 4 | 0,15-0.3 |
| 2-methyl Coelenterazine | 331,37 |
| / | / | / | / |
| 391,48 |
| 400 | / | / | / |
Thông tin sản phẩm
| Tên sản phẩm | Số danh mục | Thông số kỹ thuật |
| 40901ES01/02/03/08 | 100mg/500mg/1g/5g | |
| 40902ES01/02/03/09 | 100mg/500mg/1g/5g | |
| 40903ES01/02/03 | 100mg/500mg/1g | |
| 40904ES02/03/08 | 1×500 μg/2×500 μg/5mg | |
| 40905ES02/03 | 1×500 μg/2×500 μg | |
| 40906ES02/03/08 | 1×500 μg/2×500 μg/5mg | |
| 40908ES02/03 | 1×500 μg/2×500 μg |
Tài liệu đã xuất bản từ người dùng (thống kê chưa đầy đủ)
- Xie J, Zheng H, Chen S, Shi X, Mao W, Wang F. Thiết kế hợp lý của một phóng viên có thể kích hoạt để chụp ảnh định lượng quá trình ghép nối RNA bất thường trong cơ thể sống. Mol Ther Methods Clin Dev. 2020;17:904-911. Xuất bản ngày 18 tháng 4 năm 2020.
- Lin GY, Lin L, Cai XQ, et al. Chiến dịch sàng lọc thông lượng cao xác định một chất chủ vận phân tử nhỏ của thụ thể peptide họ relaxin 4 [được xuất bản trực tuyến trước khi in, ngày 31 tháng 3 năm 2020]. Acta Pharmacol Sin. 2020;10.1038/s41401-020-0390-x.
- Shao L, Chen Y, Zhang S, Zhang Z, Cao Y, Yang D, Wang MW. Điều chỉnh tác dụng của RAMP trên hồ sơ truyền tín hiệu của họ thụ thể glucagon, Acta Pharmaceutica Sinica B.
- Haifeng Zheng, Si Chen, Xinan Wang, Jinrong Xie, Jie Tian và Fu Wang.Intron Retained Bioluminescence Reporter cho hình ảnh thời gian thực của quá trình ghép nối tiền mRNA ở các đối tượng sống.CAnal. Chem. 2019, 91, 12392−12398
- Peiyu Xu, Sijie Huang, Chunyou Mao, ..., Xi Cheng, Yan Zhang, H. Eric Xu. Cấu trúc của phức hợp thụ thể-Gi dopamine D3 ở người.2021, Tế bào phân tử 81, 1147–1159
- Moxuan Ji, Xinan Wang,Haifeng Zheng, Wenjie Mao, Xiaorui Shi, Si Chen, Chu Tang và Fu Wang Ci. Một phóng viên bí mật để theo dõi máu về cái chết của tế bào Pyroptotic. Hậu môn. Chem.
- F Hu, Y Zhang, Q Liu, Z Wang. PurA giúp Edwardsiella piscicida thoát khỏi sự kích hoạt tín hiệu NF-κB. Miễn dịch học cá và động vật có vỏ, 2022 - Elsevier
- Haifeng Zheng, Xinan Wang, Si Chen, Xiaorui Shi, Jinrong Xie, Wenjie Mao, Jie Tian và Fu Wang. Hình ảnh sinh học chức năng thời gian thực của động lực học microRNA dành riêng cho tế bào thần kinh trong quá trình biệt hóa tế bào thần kinh bằng cách sử dụng trình báo cáo luciferase kép. Hóa chất ACS. Neurosci.DOI: 10.1021/acschemneuro.8b00614