Die aktuellen Richtlinien der WHO und der US-amerikanischen FDA empfehlen, dass die Rest-DNA in Fertigprodukten nicht höher als 10 ng/Dosis sein sollte, und die US-amerikanische FDA weist auch darauf hin, dass die Rest-DNA in Wirtszellen biologischer Produkte nicht höher als 100 pg/Dosis sein sollte. Die Allgemeinen Grundsätze des Europäischen Arzneibuchs legen fest, dass der Grenzwert für Rest-DNA in biologischen Produkten nicht höher als 10 ng/Dosis sein sollte, aber der Grenzwert für Rest-DNA für einzelne Impfstoffe ist strenger, z. B. sollte die Rest-DNA im inaktivierten Impfstoff gegen Hepatitis A nicht höher als 100 pg/Dosis sein und im Impfstoff gegen Hepatitis B nicht höher als 10 pg/Dosis. Die Ausgabe 2020 des chinesischen Arzneibuchs, Teil III, legt fest, dass der DNA-Rückstand in biologischen Präparaten, die auf einer zellulären Matrix hergestellt werden, 100 pg/Dosis nicht überschreiten sollte und der DNA-Rückstand in Impfstoffen, die auf einer bakteriellen oder pilzlichen Matrix hergestellt werden, 10 ng/Dosis nicht überschreiten sollte.
Darüber hinaus enthalten nationale Arzneibücher auch Leitlinienempfehlungen zu den Methoden zur Bestimmung exogener DNA-Rückstände. Die US-amerikanische Arzneibuchausgabe 2017 der Allgemeinen Bestimmungen USP40-NF35 1130 beschreibt drei Methoden zur Bestimmung exogener DNA-Rückstände: DNA-Sondenhybridisierung, Schwellenwertmethode und quantitative Echtzeit-PCR-Methode. Das Europäische Arzneibuch schlägt quantitative Echtzeit-PCR und immunenzymatische Methode vor, zwei empfindliche Analysemethoden zur Quantifizierung von DNA-Rückständen in Wirtszellen. Die drei Allgemeinen Bestimmungen 3407 der Chinesischen Arzneibuchausgabe 2020 legen außerdem fest, dass die Methoden zur Erkennung von DNA-Rückständen in Wirtszellen DNA-Sondenhybridisierung, Fluoreszenzfärbung und quantitative PCR sind.
Unter ihnen weist die qPCR-Methode eine sehr hohe Sensitivität, Sequenzspezifität und Genauigkeit auf, sodass sie der biopharmazeutischen Industrie bei der Prozessforschung und Qualitätskontrolle von Fertigprodukten ein zuverlässiges Nachweismittel bieten kann und mittlerweile für alle Hersteller biologischer Produkte zur bevorzugten Nachweismethode geworden ist.
Produkteigenschaften
Hohe Empfindlichkeit:Die untere Nachweisgrenze kann bis zu 0,5 fg/µL betragen.
Hohe Präzision: Wiederholbarkeit CV <10 %, Zwischenpräzision <15 %.
Sstark PEigentumswohnung:Keine Kreuzreaktivität zwischen verschiedenen Zelllinien.
Qmengenmäßig AGenauigkeit: Exklusives Probenvorbereitungskit für die Analyse magnetischer Perlen.
Kurze Betriebszeit: Vollständiger Testvorgang innerhalb von 3 Stunden.
Produktparameter
| Produkt-Nr. | 41332ES | 41331ES | 41307ES | 41308 |
| Produktname | ||||
| Produktkomponente
| CHO DNA Kontrolle CHO qPCR mischen DNA Verdünnung Puffer | HEK293 DNA Kontrolle HEK293 qPCR mischen (UDG Plus) HEK293 Primer & Sonde mischen DNA Verdünnung Puffer | Vero DNA Kontrolle Vero qPCR mischen Vero Primer & Sonde mischen DNA Verdünnung Puffer | E.coli DNA Kontrolle E.coli qPCR mischen E.coli Primer & Sonde mischen DNA Verdünnung Puffer |
| Produktspezifikation | 100T | 100T | 100T | 100T |
| Gerät | Quantitative Analyse von Wirtszell-DNA-Rückständen in Zwischen-, Halbfertig- und Fertigprodukten verschiedener biologischer Produkte | |||
| Bestimmungsgrenze | 0,5 fg/µL | 10fg/µL | 0,5fg/µL | 30 fg/µL |
| Vorbehandlungsset | Vorbehandlungskit für DNA-Rückstände mit magnetischen Perlen: Manuelle Extraktion, Kat.-Nr. 18461ES, passt an alle Rückstandskits | |||
| Betroffene Modelle | Thermo: ABI 7500;ABI QuantStudio 5;ABI StepOnePlus; Bio-Rad: CFX96 Optik Modul. | |||
Workflow
Produktdaten
Kit zur Erkennung von DNA-Resten
Abbildung 1 Standardkurve, die aus einer 10-fachen Verdünnungsreihe von CHO-Standard-DNA generiert wurde. Die Ergebnisse zeigen, dass die Kits zur Quantifizierung der Wirtszell-Rest-DNA einen breiten dynamischen Bereich und eine hohe Empfindlichkeit aufweisen.
Probenvorbehandlungskit für die Magnetperlenmethode
Tabelle 1 DNA-Rückgewinnung mit dem MolPure® Magnetic Residual DNA Sample Preparation Kit – Leistungsdaten aus einer unabhängigen Validierungsstudie unter Verwendung von E.coli-Genom-DNA-Spikes pro Probe.
| Probe | Konzentration | Mittlere Wiederfindung | Lebenslauf |
| 300 pg/µl | 288,49 pg/µl | 96,16 % | 7,66 % |
| 150 pg/µl | 162,51 pg/µl | 108,34 % | 10,02 % |
| 10 pg/µl | 10,48 pg/µl | 104,89 % | 8,15 % |
| 5 pg/µL | 4,66 pg/µl | 93,20 % | 9,67 % |
| 60fg/uL | 56,97fg/µL | 94,95 % | 12,82 % |
| 30fg/uL | 31,76 fg/µL | 104,91 % | 12,49 % |
F&E-Plattform
Basierend auf der Plattform des bidirektionalen molekularen Enzymdesigns und der gerichteten Evolution und der Plattform der Proteinhochdichtefermentation und ultrareinen Reinigung haben wir die F&E-Plattform für wichtige Rohstoffe für molekulare Diagnosereagenzien und ein unabhängiges Labor für die Entwicklung von molekularen und Immunassay-Produkten eingerichtet, die mit hochmodernen F&E-Instrumenten und -Geräten ausgestattet sind.
Produktionsplattformen
Wir verfügen über unabhängige, saubere Produktionswerkstätten, die streng nach den Qualitätssystemstandards ISO13485 aufgebaut und verwaltet werden, um die quantitativen und qualitativen Anforderungen verschiedener Produkte zu erfüllen. Schicht für Schicht durchlief jeder Schritt der Freigabe eine Reihe strenger und hochstandardmäßiger Qualitätsabnahmen.
Produktinformationen
| Beschreibung | Bericht | Katze# |
| Validierung | 41332ES | |
| HEK293-Kit zur Erkennung von DNA-Rückständen in Wirtszellen (3G) | Validierung | 41331ES |
| MycAway™ Mycoplasma qPCR-Nachweiskit (2G) | Validierung | 40619ES |
| Vero Kit zur Erkennung von DNA-Rückständen in Wirtszellen (2G) | Validierung | 41307ES |
| Validierung | 41308ES | |
| 18461ES |