Yeasen Enzyme mRNA và Nucleotide đạt chuẩn GMP dùng cho phát triển vắc-xin và thuốc

Nghiên cứu và xây dựng công thức vắc-xin mRNA đòi hỏi nhiều loại nguyên liệu thô khác nhau để đảm bảo sự phát triển thành công của chúng. Là một lực lượng tiên phong trong ngành công nghiệp enzyme phân tử, Yeasen đã đạt được thành công trong việc tạo ra nhiều loại enzyme phân tử và thuốc thử thông qua công nghệ sinh học enzyme phân tử tiên tiến và các kỹ thuật lên men và tinh chế protein quy mô lớn.

Để đảm bảo cả chất lượng sản phẩm và năng lực sản xuất, Yeasen đã thành lập một cơ sở sản xuất đạt chuẩn GMP tại Vũ Hán, có khả năng đáp ứng đầy đủ các yêu cầu sản xuất quy mô công nghiệp với công suất hàng năm vượt quá 5 tỷ đơn vị. Ngoài ra, Yeasen là công ty Trung Quốc đầu tiên đạt chứng nhận ISO 13485 về nghiên cứu, phát triển, sản xuất và phân phối enzyme phân tử. Chứng nhận này đảm bảo chất lượng, tính nhất quán và khả năng truy xuất nguồn gốc của tất cả các thuốc thử của họ.

1. Ưu điểm của GMP
2. Yeasen có thể cung cấp các sản phẩm đạt tiêu chuẩn GMP
3. Yeasen Đã có được số DMF cho nhiều sản phẩm
4. Các kịch bản ứng dụng của Yeasen các sản phẩm
5. Nguyên liệu thô để chế tạo vắc-xin mRNA do Yeasen
6. Thông tin đặt hàng

1. Ưu điểm của GMP

"GMP-grade" là một thuật ngữ thương hiệu Yeasen dùng để mô tả thuốc thử được sản xuất tại cơ sở đạt chứng nhận ISO 13485. YeasenThuốc thử đạt chuẩn GMP được sản xuất theo tiêu chuẩn hệ thống quản lý chất lượng ISO 13485 với quy trình kiểm soát chặt chẽ hơn và hồ sơ tài liệu đầy đủ. Yeasen không chỉ cung cấp thuốc thử chất lượng cao mà còn cung cấp tài liệu, kiểm toán tại chỗ và các hỗ trợ khác cho khách hàng.

Bảng 1. Ưu điểm của GMP

2. Yeasen có thể cung cấp các sản phẩm đạt tiêu chuẩn GMP

Tận dụng chuyên môn sâu rộng và sự xuất sắc về mặt kỹ thuật trong phát triển enzyme và sản xuất quy mô công nghiệp, Yeasen đã thành lập một cơ sở tiên tiến được gọi là "mRNAtools." Cơ sở này, rộng 50.000 feet vuông, tuân thủ các quy định GMP và tự hào có các tính năng hiện đại, bao gồm 2x1500L đơn vị lên men tự động, thiết bị tinh chế quy mô lớn và khả năng đông khô. mRNAtools chuyên cung cấp các thuốc thử nghiêm ngặt phù hợp với các yêu cầu về sản xuất và quy định của khách hàng.

YeasenCơ sở sản xuất enzyme phân tử của, được xây dựng chuyên dụng cho các sản phẩm đạt chuẩn GMP, bảo vệ chất lượng sản phẩm ở cả cấp độ phần cứng và phần mềm. Cơ sở bao gồm một đội ngũ 70 chuyên gia có tay nghề cao, mỗi người đều có kinh nghiệm sản xuất GMP sâu rộng. Các hoạt động kho bãi và hậu cần được mô-đun hóa, đảm bảo lưu trữ an toàn và vận chuyển sản phẩm hiệu quả. Mạng lưới phân phối đa trung tâm trên toàn quốc đảm bảo chu kỳ cung ứng đáng tin cậy.

3. Yeasen Đã có được số DMF cho nhiều sản phẩm

Hồ sơ thuốc chính (DMF) là các tài liệu mật được nộp tự nguyện cho Cục Quản lý Thực phẩm và Dược phẩm Hoa Kỳ (FDA). Chúng chứa thông tin chi tiết về các cơ sở, quy trình hoặc mặt hàng được sử dụng trong sản xuất, chế biến, đóng gói và lưu trữ các sản phẩm thuốc dành cho người.

FDA xem xét kỹ lưỡng nội dung kỹ thuật của DMF khi nhà sản xuất thành phần dược phẩm hoạt tính (API) tham chiếu đến nó để hỗ trợ cho Ứng dụng thuốc mới nghiên cứu (IND), Ứng dụng thuốc mới (NDA), Ứng dụng thuốc mới rút gọn (ANDA) hoặc Ứng dụng xuất khẩu của họ. DMF đóng vai trò quan trọng trong các ứng dụng này.Khi các nhà sản xuất nộp DMF cho các vật liệu cụ thể, quá trình phê duyệt của FDA có thể được đẩy nhanh đáng kể.

Yeasen sở hữu các tệp DMF có thể hợp lý hóa thời gian biểu của dự án. Nếu muốn, bạn có thể yêu cầu ủy quyền tham chiếu đến các DMF của chúng tôi để hỗ trợ đơn xin FDA của bạn. Để bắt đầu ủy quyền tham chiếu đến các DMF của chúng tôi, vui lòng gửi yêu cầu Thư ủy quyền đến Yeasen, yêu cầu chúng tôi cung cấp Thư ủy quyền DMF cụ thể của Trung tâm FDA.

4. Các kịch bản ứng dụng của Yeasen các sản phẩm

4.1 Tạo mẫu

Tuyến tính hóa plasmid là một bước không thể thiếu trong quá trình tạo khuôn mẫu khi các vectơ plasmid được sử dụng làm khuôn mẫu phiên mã. Khi phiên mã tiến hành đến cuối khuôn mẫu DNA, tuyến tính hóa plasmid đảm bảo rằng các bản sao RNA có độ dài và trình tự xác định được tạo ra. Yeasen cung cấp nhiều loại enzyme hạn chế khác nhau để đáp ứng nhu cầu của bạn. Chúng tôi khuyên bạn nên chọn các enzyme hạn chế tạo ra các đầu tù hoặc phần nhô ra 5´.

4.2 Trong ống nghiệm Phiên âm ( IVT )

Phiên mã trong ống nghiệm bị ảnh hưởng bởi nhiều yếu tố khác nhau. Enzym, chất đệm và chất nền biến đổi đều có tác động lớn đến hiệu quả phiên mã.

Dựa trên nền tảng ZymeEditor, Yeasen Công nghệ sinh học đã phát triển các loại RNA polymerase T7 mới có khả năng làm giảm đáng kể quá trình tạo ra dsRNA trong quá trình phiên mã trong ống nghiệm (IVT) (T7 RNA Polymerase, RNA ds thấp, 250 U/μL). Nó làm giảm đáng kể khả năng sinh miễn dịch của mRNA và ở một mức độ nhất định, tăng cường tính toàn vẹn của mRNA. Sự phát triển này dự kiến ​​sẽ đóng vai trò quan trọng trong việc thúc đẩy sự phát triển của vắc-xin mRNA và thuốc điều trị ung thư.

Bằng cách tối ưu hóa bộ đệm và điều chỉnh loại muối của chất nền nucleotide, chúng tôi đã cải thiện đáng kể hiệu quả phiên mã và giảm sản xuất dsRNA.

Hình 2. Tris NTP có thể tăng cường đáng kể hiệu quả lVT và giảm sản xuất dsRNA

4.3 Đóng nắp mRNA

Do cấu trúc mũ 5´ làm giảm khả năng sinh miễn dịch và cần thiết cho quá trình dịch mã mRNA hiệu quả nên việc thêm cấu trúc mũ vào đầu 5′ của mRNA được tạo ra bởi phiên mã là cần thiết.

Hình 3. Kết quả phát hiện tỷ lệ mũ (phát hiện LC-MS)

4.4 Tinh chế mRNA

Tinh chế là bước không thể thiếu để đạt được mRNA có độ tinh khiết cao.

5. Nguyên liệu thô để chế tạo vắc-xin mRNA do Yeasen

Hiện tại, Yeasen có thể cung cấp một bộ sản phẩm hoàn chỉnh trong quá trình sản xuất dung dịch dự trữ mRNA. Các sản phẩm được kiểm soát chặt chẽ theo tiêu chuẩn sản xuất GMP và đáp ứng đầy đủ các yêu cầu của sản xuất vắc-xin mRNA.

Bảng 2.Nguyên liệu thô để chế tạo vắc-xin mRNA được cung cấp bởi Yeasen

Chuẩn bị mẫu		Phiên mã trong ống nghiệm
2× Hieff Canace AdvanceFast PCR Master Mix độ trung thực cao	10164ES	Bộ tổng hợp RNA năng suất cao T7	10623ES
Giải pháp đặt dNTP	10122ES	RNA polymerase T7	10625ES
Bộ dụng cụ nhân bản Hieff Clone Universal One Step	10922ES	Pyrophosphatase, vô cơ đạt chuẩn GMP	10672ES
DNA Ligase vàng T4	10300ES	Chất ức chế RNase ở chuột đạt chuẩn GMP	10621ES
BspQI đạt chuẩn GMP	10664ES	DNase I	10611ES
Bsa tôi Cấp độ GMP	10661ES	Giải pháp NTP Set	10133ES
RNAse R (20U/uL)	14615ES	Dung dịch natri UTP giả cấp GMP (100 mM)	10650ES
Xba tôi	10662ES	Dung dịch natri N1-Me-Pseudo UTP đạt chuẩn GMP (100 mM)	10651ES
Đóng nắp		Thanh lọc
mRNA Vaccinia Capping Enzyme GMP-grade	10614ES	Máy làm sạch RNA Hieff NGS™	12602ES
mRNA Nắp 2´-O-Methyltransferase đạt chuẩn GMP	10612ES	Giá tách từ	80460ES
S-adenosylmethionine (SAM) đạt chuẩn GMP	10619ES	Bộ xét nghiệm ELISA RNA sợi đôi (dsRNA)	36717ES
ARCA (Anti Reverse Cap Analog)	10681ES

6. Thông tin đặt hàng

Sau đây là các sản phẩm tiêu biểu được cung cấp bởi Yeasen. Có sẵn các kích thước bổ sung.Sản phẩm của chúng tôi được tối ưu hóa cao để hoạt động đồng bộ, giúp đảm bảo hiệu suất và khả năng tái tạo vượt trội. Chúng tôi cũng có thể cung cấp các dịch vụ tùy chỉnh. Nếu bạn quan tâm đến một sản phẩm không được hiển thị, hãy liên hệ với chúng tôi và chúng tôi sẽ làm việc với bạn để đáp ứng nhu cầu của bạn.

Bảng 3. Thông tin đặt hàng

Về việc đọc:

Thuốc thử đạt chuẩn GMP cho tổng hợp mRNA trong ống nghiệm

DNase I và ứng dụng của chúng trong Y sinh học

Tài liệu tham khảo:

[1] Chaudhary, N., Weissman, D., & Whitehead, KA (2021). Vắc-xin mRNA cho các bệnh truyền nhiễm: nguyên tắc, phân phối và dịch thuật lâm sàng. Đánh giá về thiên nhiên. Khám phá thuốc, 20(11), 817–838.
[2] Vogel, AB et al. Vắc-xin RNA tự khuếch đại cung cấp khả năng bảo vệ tương đương chống lại bệnh cúm với vắc-xin mRNA nhưng
ở liều thấp hơn nhiều. Liệu pháp phân tử: tạp chí của Hiệp hội Liệu pháp gen Hoa Kỳ 26, 446-455,
[3] Fuchs, AL, Neu, A. & Sprangers, R. Một phương pháp chung để sản xuất nhanh chóng và tiết kiệm chi phí trên quy mô lớn 5'
RNA có mũ. RNA (New York, NY) 22, 1454-1466, doi:10.1261/rna.056614.116 (2016).
[4] Schmid, A.Những cân nhắc khi sản xuất vắc-xin mRNA cho các thử nghiệm lâm sàng. Phương pháp trong sinh học phân tử (Clifton, NJ) 1499, 237-251,
[5] Banerji, A. et al. Vắc-xin mRNA để ngăn ngừa bệnh COVID-19 và các phản ứng dị ứng được báo cáo: Bằng chứng hiện tại và cách tiếp cận được đề xuất. Tạp chí dị ứng và miễn dịch lâm sàng. Trong thực hành 9, 1423-1437,
[6] Richner, JM et al. Vắc-xin mRNA được sửa đổi bảo vệ chống lại nhiễm trùng vi-rút Zika. Tế bào 168, 1114-1125.e1110,
[7] Corbett, KS et al. Thiết kế vắc-xin mRNA SARS-CoV-2 được kích hoạt bởi sự chuẩn bị nguyên mẫu cho mầm bệnh. Nature 586,567-571,
[8] Corbett, KS et al. mRNA-1273 bảo vệ chống lại nhiễm trùng SARS-CoV-2 beta ở động vật linh trưởng không phải người. Miễn dịch học tự nhiên 22, 1306-1315,
[9] Keech, C. et al. Thử nghiệm giai đoạn 1-2 của vắc-xin hạt nano protein gai tái tổ hợp SARS-CoV-2. Tạp chí y khoa New England 383, 2320-2332,
[10] Kramps, T. & Elbers, K. Giới thiệu về Vắc-xin RNA. Phương pháp trong sinh học phân tử (Clifton, NJ) 1499, 1-11,
[11] Linares-Fernández, S., Lacroix, C., Exposito, JY & Verrier, B. Điều chỉnh vắc-xin mRNA để cân bằng phản ứng miễn dịch bẩm sinh/thích ứng. Xu hướng trong y học phân tử 26, ​​311-323,