El rápido avance de la biotecnología ha tenido un profundo impacto en la lucha contra enfermedades infecciosas como la COVID-19 a través de la creación de vacunas de ARNm producidas mediante tecnología de síntesis de ARN in vitro. Numerosas empresas, entre ellas Moderna en Estados Unidos, CureVac en Alemania y BioNTech en Alemania, no solo han desarrollado vacunas terapéuticas de ARNm, sino también tratamientos para afecciones como tumores, enfermedades infecciosas y enfermedades crónicas.
La investigación y formulación de vacunas de ARNm requiere una amplia gama de materias primas para garantizar su desarrollo exitoso. Como fuerza pionera en la industria de las enzimas moleculares, Yeasen ha logrado el éxito en la creación de diversas enzimas moleculares y reactivos mediante biotecnología de enzimas moleculares avanzada y técnicas de fermentación y purificación de proteínas a gran escala.
Para garantizar tanto la calidad del producto como la capacidad de producción, Yeasen ha establecido una planta de producción de nivel GMP en Wuhan, capaz de satisfacer plenamente los requisitos de producción a escala industrial con una capacidad anual que supera los 5 mil millones de unidades. Además, Yeasen es la primera empresa china en obtener la certificación ISO 13485 para la investigación, el desarrollo, la fabricación y la distribución de enzimas moleculares. Esta certificación asegura la calidad, la consistencia y la trazabilidad de todos sus reactivos.
1. Ventajas de las BPM
2. Yeasen puede proporcionar productos de calidad GMP
3. Yeasen obtuvo números DMF para muchos productos
4. Escenarios de aplicación de los productos Yeasen
5. Materias primas para la preparación de la vacuna de ARNm proporcionadas por Yeasen
6. Información para pedidos
1. Ventajas de las BPM
"Grado GMP" es un término de marca que Yeasen utiliza para describir los reactivos fabricados en instalaciones con certificación ISO 13485. Los reactivos de grado GMP de Yeasen se producen de conformidad con los estándares del sistema de gestión de calidad ISO 13485 y con controles de proceso más estrictos y registros de documentación completos. Yeasen no solo puede ofrecer reactivos de alta calidad, sino que también proporciona documentos, auditorías de instalaciones y otro tipo de asistencia a nuestros clientes.
Tabla 1. Ventajas de las BPM
| Controles de calidad | Nivel de investigación | Grado GMP |
| Libre de animales | Se puede utilizar material de origen animal. | Se pueden proporcionar certificados libres de animales si es necesario. |
| Caracterización de bancos de células | Menos estricto | Estricto (cumple con las regulaciones GMP) |
| Información de trazabilidad de materias primas y producto terminado | Menos estricto | Estricto (cumple con las regulaciones GMP) |
| Control del nivel de endotoxinas | / | Riguroso |
| Control estéril | / | Riguroso |
| Registros de lotes para fabricación y pruebas | Menos estricto | Estricto (se pueden proporcionar registros de lotes si es necesario) |
| Informe de validación de procesos | / | El informe se puede proporcionar si es necesario. |
| Sistema de control de cambios | Autoevaluación | Estricto (cumple con las regulaciones GMP) |
| Sistema de gestión de calidad | Autoevaluación | Certificación ISO 13485 |
| Número DMF | / | Sí (informando) |
2. Yeasen puede proporcionar productos de calidad GMP
Yeasen, que aprovecha su amplia experiencia y excelencia técnica en el desarrollo de enzimas y la producción a escala industrial, ha creado una instalación de vanguardia conocida como "mRNAtools". Esta instalación, que abarca 50.000 pies cuadrados, cumple con las normas GMP y cuenta con características de última generación, incluidas dos unidades de fermentación automatizadas de 1500 l, equipos de purificación a gran escala y capacidades de liofilización. mRNAtools se dedica a ofrecer reactivos rigurosos que se alinean con los requisitos de producción y reglamentarios del cliente.
La planta de producción de enzimas moleculares de Yeasen, diseñada específicamente para productos de calidad GMP, protege la calidad del producto tanto a nivel de hardware como de software. Está compuesta por un equipo altamente calificado de 70 profesionales, cada uno de ellos con una amplia experiencia en producción GMP. Las operaciones de almacenamiento y logística están modularizadas, lo que garantiza el almacenamiento seguro y el transporte eficiente de los productos. Una red de distribución multicentro a nivel nacional garantiza además un ciclo de suministro confiable.
3. Yeasen obtuvo números DMF para muchos productos
Los archivos maestros de medicamentos (DMF) son documentos confidenciales que se envían voluntariamente a la Administración de Alimentos y Medicamentos de los Estados Unidos (FDA). Contienen información detallada sobre las instalaciones, los procesos o los artículos utilizados en la producción, el procesamiento, el envasado y el almacenamiento de medicamentos para uso humano.
La FDA examina el contenido técnico de un DMF cuando un fabricante de un ingrediente farmacéutico activo (API) lo cita para respaldar su solicitud de nuevo fármaco en investigación (IND), solicitud de nuevo fármaco (NDA), solicitud abreviada de nuevo fármaco (ANDA) o solicitud de exportación. Los DMF desempeñan un papel fundamental en estas solicitudes.Cuando los fabricantes presentan DMF para materiales específicos, el proceso de aprobación de la FDA puede acelerarse significativamente.
Yeasen posee archivos DMF que pueden agilizar los plazos de los proyectos. Si lo desea, puede solicitar una autorización de referencia para nuestros DMF para respaldar su solicitud ante la FDA. Para iniciar la autorización de referencia de nuestros DMF, envíe una solicitud de carta de autorización a Yeasen, solicitando que le proporcionemos una carta de autorización de DMF específica del centro de la FDA.
4. Escenarios de aplicación de los productos Yeasen
4.1 Generación de plantillas
La linealización de plásmidos es un paso indispensable durante la generación de plantillas cuando se utilizan vectores plasmídicos como plantillas de transcripción. A medida que la transcripción avanza hasta el final de las plantillas de ADN, la linealización de plásmidos garantiza que se generen transcripciones de ARN de una longitud y secuencia definidas. Yeasen ofrece varias enzimas de restricción para satisfacer sus necesidades. Recomendamos seleccionar enzimas de restricción que generen extremos romos o salientes 5'.
4.2 In Vitro Transcripción (IVT)
La transcripción in vitro se ve afectada por varios factores. Las enzimas, los tampones y los sustratos modificados tienen un gran impacto en la eficiencia de la transcripción.
Basándose en la plataforma ZymeEditor, YEASEN Biotech ha desarrollado nuevas ARN polimerasas T7 que reducen significativamente la generación de dsRNA durante el proceso de transcripción in vitro (IVT) (ARN polimerasa T7, ARN de cadena corta bajo, 250 U/μL). Reduce en gran medida la inmunogenicidad del ARNm y, en cierta medida, mejora su integridad. Se espera que este avance desempeñe un papel crucial en el avance del desarrollo de vacunas de ARNm y medicamentos contra el cáncer.
Al optimizar el tampón y ajustar el tipo de sal del sustrato de nucleótido, mejoramos enormemente la eficiencia de la transcripción y redujimos la producción de dsRNA.
Figura 2. Tris NTP puede mejorar en gran medida la eficiencia de lVT y reducir la producción de dsRNA
4.3 Protección del ARNm
Como una estructura de tapa 5' reduce la inmunogenicidad y es necesaria para una traducción eficiente de los ARNm, es necesario agregar estructuras de tapa a los extremos 5' del ARNm generado por la transcripción.
Figura 3. Resultados de detección de tasa de concentración (detección LC-MS)
4.4 Purificación del ARNm
La purificación es un paso indispensable para lograr ARNm de alta pureza.
5. Materias primas para la preparación de la vacuna de ARNm proporcionadas por Yeasen
En la actualidad, Yeasen puede proporcionar un conjunto completo de productos en el proceso de producción de solución madre de ARNm. Los productos están estrictamente controlados por la producción GMP y cumplen plenamente con los requisitos de la producción de vacunas de ARNm.
Tabla 2.Materias primas para la preparación de la vacuna de ARNm proporcionadas por Yeasen
| Preparación de plantillas | Transcripción in vitro | ||
| Mezcla maestra de PCR de alta fidelidad Hieff Canace AdvanceFast 2× | 10164ES | 10623ES | |
| 10122ES | 10625ES | ||
| 10922ES | 10672ES | ||
| 10300ES | 10621ES | ||
|
| 10611ES | ||
| 10661ES | 10133ES | ||
| ARNasa R (20 U/uL) | 14615ES | 10650ES | |
| Xba yo | 10662ES | 10651ES | |
| Tapado |
| Purificación |
|
| 10614ES | 12602ES | ||
| 10612ES | Estante de separación magnética | 80460ES | |
| 10619ES | 36717ES | ||
| 10681ES |
| ||
6. Información para pedidos
Los siguientes son productos representativos ofrecidos por Yeasen. Hay tamaños adicionales disponibles.Nuestros productos están altamente optimizados para funcionar en conjunto, a fin de garantizar un rendimiento y una reproducibilidad superiores. También podemos brindar servicios personalizados. Si está interesado en un producto que no se muestra, comuníquese con nosotros y trabajaremos con usted para satisfacer sus necesidades.
Tabla 3. Información para pedidos
Respecto a la lectura:
Reactivos de grado GMP para la síntesis in vitro de ARNm
DNasa I y sus aplicaciones en biomedicina
Referencias:
[1] Chaudhary, N., Weissman, D. y Whitehead, KA (2021). Vacunas de ARNm para enfermedades infecciosas: principios, administración y traducción clínica. Reseñas de la naturaleza. Descubrimiento de fármacos. 20(11), 817–838.
[2] Vogel, AB et al. Las vacunas de ARN autoamplificantes brindan una protección equivalente contra la influenza a las vacunas de ARNm, pero
en dosis mucho más bajas. Terapia molecular: la revista de la Sociedad Americana de Terapia Génica 26, 446-455,
[3] Fuchs, AL, Neu, A. y Sprangers, R. Un método general para la producción rápida y rentable a gran escala de 5'
ARN con capuchón. RNA (Nueva York, NY) 22, 1454-1466, doi:10.1261/rna.056614.116 (2016).
[4] Schmid, A.Consideraciones para la producción de vacunas de ARNm para ensayos clínicos. Métodos en biología molecular (Clifton, NJ) 1499, 237-251,
[5] Banerji, A. et al. Vacunas de ARNm para prevenir la enfermedad por COVID-19 y las reacciones alérgicas notificadas: evidencia actual y enfoque sugerido. Revista de alergia e inmunología clínica. En la práctica 9, 1423-1437,
[6] Richner, JM et al. Las vacunas de ARNm modificadas protegen contra la infección por el virus del Zika. Cell 168, 1114-1125.e1110,
[7] Corbett, KS et al. El diseño de la vacuna de ARNm del SARS-CoV-2 fue posible gracias a la preparación de prototipos de patógenos. Nature 586,567-571,
[8] Corbett, KS et al. El ARNm-1273 protege contra la infección beta por SARS-CoV-2 en primates no humanos. Nature immunology 22, 1306-1315,
[9] Keech, C. et al. Ensayo de fase 1-2 de una vacuna de nanopartículas de proteína de pico recombinante contra el SARS-CoV-2. The New England journal of medicine 383, 2320-2332,
[10] Kramps, T. y Elbers, K. Introducción a las vacunas de ARN. Métodos en biología molecular (Clifton, NJ) 1499, 1-11,
[11] Linares-Fernández, S., Lacroix, C., Exposito, JY y Verrier, B. Adaptación de la vacuna de ARNm para equilibrar la respuesta inmunitaria innata/adaptativa. Tendencias en medicina molecular 26, 311-323,